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目的探讨噬菌体展示随机肽库技术在结核分枝杆菌培养滤过蛋白10(CFP-10)/早期分泌抗原靶点6(ESAT-6)融合蛋白(CE融合蛋白)模拟抗原表位筛选中的应用。方法以抗CE融合蛋白多克隆抗体为靶分子,对随机噬菌体7肽库进行筛选,经3轮生物淘选后,随机选取18个单噬菌体进行测序分析。采用双抗体夹心和竞争ELISA方法对测序后噬菌体进行阳性克隆及其活性鉴定。采用间接ELISA方法,选取阳性单噬菌体与CE融合蛋白分别对20份活动性肺结核患者和10份有卡介苗接种史健康人的血清标本抗体进行检测。结果经过3轮生物淘选,能与靶分子特异性结合的噬菌体得到了明显富集。18个单噬菌体测序共获得9种序列,其中单噬菌体5、6、18的氨基酸序列均包含Trp-Asp-Ala-Thr(WDAT)保守序列,该序列与ESAT-6第58-61位氨基酸的序列一致。9种序列中各取1个单噬菌体经双抗体夹心和竞争ELISA检测,有7个单噬菌体(1、5、6、10、13、14、18,S/N值依次为9.2、9.7、9.4、8.9、9.6、9.9、9.0)确定为具有免疫活性的阳性克隆。选取含有WDAT保守序列的阳性单噬菌体5与CE融合蛋白分别对2种血清标本抗体进行间接ELISA检测结果显示,单噬菌体5对2种血清标本抗体检测的吸光度值均高于CE融合蛋白(分别为0.931±0.298 vs 0.317±0.157、0.496±0.073 vs 0.118±0.026,均P〈0.05);单噬菌体5对活动性肺结核患者血清标本抗体的检出率(95%,19/20)明显高于CE融合蛋白(60%,12/20),而对有卡介苗接种史健康人血清标本抗体的检出率(9/10)低于CE融合蛋白(10/10)。结论利用噬菌体展示随机肽库技术成功筛选出7个CE融合蛋白的模拟抗原表位,并获得了定位于ESAT-6第58-61位氨基酸序列的CE融合蛋白的1个线性B细胞抗原表位,提高了ELISA检测的敏感性,为进一步研究CE融合蛋白的? 相似文献
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心脏贯通伤并不多见 ,抢救机会和成功率少 ,自 1990年至 2 0 0 0年 8月 ,10年间共收治 9例。经急症手术抢救全部成活 ,无一例死亡 ,现报告如下。1 临床资料本组 9例中男性 8例 ,女性 1例 ,年龄 2 3~ 41岁 ,平均2 8 5岁。伤后 3小时内入院者 8例 ,伤后 2 0天入院者 1例。刀刺伤 8例 ,剪刀刺伤 1例 ,伤及右心房 3例 ,右心室 3例 ,左心室 2例 ,左心房 1例。 7例合并肺损伤 ,1例合并上腔静脉损伤 ,9例患者均无食管、大血管、冠状血管损伤。心包内积血量平均 40ml左右 ,总失血量在 70 0ml~ 2 5 0 0ml之间。本组 8例全部先积极抗休克 ,胸… 相似文献
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周新刚陈佳敏高海丽李慢杨坤马志园王鹏 《中华普通外科杂志》2018,(5):420-424
目的探讨肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)和张力蛋白同源基因蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten, PTEN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达及其与患者预后的关系。方法免疫组化检测115例HCC患者肿瘤组织中LKB1和PTEN蛋白的表达,分析两种蛋白表达与临床病理因素的关系,应用COX比例风险模型进行多因素预后分析。结果115例肿瘤中LKB1阳性表达率仅为10.4%(12/115),PTEN阳性表达率为28.7%(33/115):两种蛋白共表达与缺失的比例分别为5.2%(6/115)和66.1%(76/115)。LKB1与PTEN蛋白双缺失更多出现在≥50岁年龄组(χ^2=7.968,P=0.001)、中-低分化HCC(χ^2=11.297,P=0.025)以及合并脉管癌栓的HCC(χ^2=6.797,P=0.011)中。LKB1、PTEN蛋白共表达与共缺失患者的5年生存率分别为100%和36.5%(χ^2=10.969,P=0.004)。多因素COX比例风险模型分析显示,脉管癌栓、PTEN缺失和LKB1/PTEN双缺失是影响HCC预后的独立危险因素。结论LKB1/PTEN蛋白双缺失是影响HCC患者生存时间的独立危险因素。 相似文献
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目的 通过比较慢性HBV感染免疫耐受期和免疫清除期的患者肝组织中程序性死亡分子-1及其配体的表达情况,探讨其与机体免疫功能状态的关系.方法 收集肝组织活体检查标本并分为免疫清除期组25例、免疫耐受期组19例,用免疫组织化学方法检测标本汇管区中T淋巴细胞程序性死亡分子-1及其配体的表达情况,通过半定量评分系统计算其占CD3阳性细胞的百分数,用t检验比较两组病例间程序性死亡分子-1及其配体表达的差异.结果 免疫耐受期组肝组织汇管区T淋巴细胞中程序性死亡分子-1所占CD3阳性细胞比率为63.79%±6.94%,高于免疫清除期的54.36%±10.08%,两组比较,t=3.492,P<0.01,差异有统计学意义;程序性死亡分子配体-1于T淋巴细胞中的表达在免疫耐受期组(66.47%±8.40%)中高于免疫清除期组(52.64%±6.20%),两组比较,t=6.288,P<0.01,差异有统计学意义.程序性死亡分子配体-1在枯否细胞中的表达强度及范围在两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 慢性HBV感染者肝组织中的程序性死亡分子-1及其配体表达水平的差异反映了免疫耐受期和免疫清除期的不同免疫功能状态. 相似文献
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1病史张某,男,40岁,因“发现艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)抗体阳性10年余,大、小便失禁7小时”,门诊以“艾滋病”收入院。患者10年前体检时发现HIV抗体阳性, 相似文献
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目的 细化慢性肝炎肝纤维化分期标准,并检测其在药物疗效判定中的有效性和敏感性. 方法 严格参照指南推荐标准,制定细化的分期标准并绘制模式图;分别按照指南推荐标准和细化标准对396例肝穿刺活组织标本进行纤维化分期判读.按照指南推荐标准药物治疗前后病例分布差异用x2检验进行分析;按照细化标准得到的治疗前后纤维化分期的差异进行赋值后,采用配对t检验进行比对,采用SPSS软件完成. 结果 参照指南推荐标准,治疗前后纤维化分期的改变不具有统计学意义,x2=3.144,P=0.534;按照细化标准,治疗前后纤维化分期的改变具有统计学意义,6.55±2.93对比6.19±2.945,P<0.01.结论 细化标准在药物疗效评定中有效,且较指南推荐标准对于药物疗效的评定具有更好的敏感性. 相似文献
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脊柱外周性原始神经外胚层肿瘤的影像学表现与病理学对照分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 分析脊柱外周性原始神经外胚层肿瘤(pPNET)CT及MR表现与病理学特征。 方法 对16例经病理证实的脊柱pPNET患者进行CT平扫(n=16)及CT平扫+增强扫描(n=12)、MR平扫(n=14)及MR平扫+增强扫描(n=9),分析其CT、MRI及病理学特点。 结果 病变位于颈段7例,颈胸段1例,胸段1例,腰骶段6例,多发1例;其中累及椎体1例,椎体及附件10例,椎管内2例,椎旁3例。病灶均呈浸润性生长;5例椎体出现病理性压缩骨折,5例肿瘤内见钙化,无椎间盘受累、骨膜反应及瘤骨形成;CT表现为成骨性、溶骨性及混合性骨质破坏(以溶骨性破坏为主)伴周围较大实体软组织肿块样改变;MR平扫表现为混杂T1WI、T2WI信号,增强扫描中病变不均匀强化,软组织内有囊变坏死区,血供丰富。免疫组化结果提示pPNET均出现CD99特征性膜表达以及不同程度的神经性标记物NSE、Syn、CgA表达。 结论 脊柱pPNET影像表现具有一定特点。CT及MR能显示肿瘤大小、内部结构、范围毗邻,有助于鉴别诊断;最终诊断依赖于病理学检查。 相似文献
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目的评价SEPTIC(sensing of phage-triggered ion cascade)技术在结核分枝杆菌快速检测中的应用价值。方法制备纳米阱微芯片,用于检测噬菌体感染细菌时导致细胞内离子释放发生的微范围内的电位变化。调整大肠杆菌、结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌及其相应噬菌体的浓度。将细菌和噬菌体等体积混合,37℃孵育1 min,取5μl混合液滴于探针上,30 s后开始采集数据,每2 min采集一个数据文件,共采集10 min,计算机分析采集结果。结果当结核分枝杆菌与分枝杆菌噬菌体D29混合反应时,在0~8 min内显示了非常明确的1/f功率谱特征,而且功率谱强度明显高于阴性反应的功率谱,并出现了明确的电压超出±4σ范围的波形,持续约0.2 s的时间,可认为发生了一次细菌被噬菌体感染的事件,表明探针明确地捕获了细菌被噬菌体感染的事件。结论SEPTIC技术能在较短时间内检测、鉴定出活菌的存在,有可能为结核分枝杆菌的检测提供一种简便、快捷的方法。 相似文献