丹参酮ⅡA对硫酸吲哚酚诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的研究丹参酮ⅡA对硫酸吲哚酚(IS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的抑制作用及其对慢性肾脏病心血管并发症的治疗作用及机制。方法体外培养HUVECs,实验分为正常组、IS组、IS+丹参酮ⅡA不同浓度组。倒置相差显微镜观察各组细胞形态学变化,检测各组细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)水平,DAPI法、Annexin/PI双染检测细胞凋亡情况。结果IS可引起内皮细胞变性、细胞皱缩,上清LDH释放量增多及细胞凋亡明显增多。丹参酮ⅡA呈浓度依赖性抑制IS诱导内皮细胞形态学改变,明显降低细胞上清LDH释放量(P0. 05),减少内皮细胞凋亡(P0. 05)。结论丹参酮ⅡA能够抑制IS诱导内皮细胞凋亡。     

活血降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠足细胞相关分子蛋白表达的影响

目的：探讨活血降糖胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞相关分子蛋白Nephrin、Podocin、CD2AP表达的影响。方法：应用单侧肾脏切除结合小剂量STZ单次腹腔注射方法建造DN大鼠模型,随机分为模型组（M组）、假手术正常对照组（N组）、活血降糖胶囊干预治疗组（H组）,每组6例。H组给予活血降糖胶囊的剂量折合生药2.5 g·kg^-1·d^-1灌胃,M组和N组给予等量纯化水灌胃。8周后检测各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血生化等指标,应用免疫组化技术检测肾组织Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达的情况。结果：8周后,与N组比较,M组出现24 h尿蛋白定量增多,内生肌酐清除率（Ccr）下降（P<0.05）,肾组织Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达水平均下调（P<0.05）;与M组比较,H组24 h尿蛋白定量降低（P<0.05）,Ccr升高（P<0.05）,肾组织Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达水平均上调（P<0.05）。采用直线相关分析后发现,24 h尿蛋白定量与肾组织Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达水平呈负相关;Ccr与肾组织Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达水平呈正相关。结论：DN时存在足细胞相关分子Nephrin、Podocin、CD2AP蛋白表达异常,活血降糖胶囊对DN大鼠肾脏的保护作用机制可能是通过增加足细胞相关分子nephrin、podocin、CD2AP蛋白表达,减少蛋白尿而实现的。     

吡格列酮对前脂肪细胞分化及GILZ蛋白表达的影响

目的:探讨吡格列酮在3T3-L1前脂肪细胞分化及糖皮质激素诱导亮氨酸拉链(GILZ)蛋白表达调节方面的作用。方法:形态观察3T3-L1细胞分化过程,不同浓度吡格列酮(1×10~(-4)mmol/L~1×10~(-2)mmol/L)处理细胞48 h,然后于分化的第2、4、6天用油红O染色测定细胞甘油三酯相对含量,实时荧光定量PCR法检测过氧化物增殖活化受体(PPAR)γ2和脂蛋白酶(LPL)的mRNA表达。不同浓度药物处理细胞48 h后,Western blot检测GILZ蛋白表达。结果:油红O法显示甘油三酯相对含量随药物处理浓度的增加而增加,与对照组比,1×10~(-3)mmol/L和1×10~(-2)mmol/L组甘油三酯含量显著性增加(P0.05)。实时荧光定量PCR检测显示PPARγ2、LPL的mRNA表达也是随着药物处理浓度的增加而增加。与对照组比,吡格列酮高于1×10~(-3)mmol/L浓度时,PPARγ2、LPL的mRNA表达显著性增加(P0.01)。Western blot显示GILZ蛋白表达随着药物处理浓度的增加而降低。结论:吡格列酮可下调GILZ表达,上调PPARγ2及下游LPL的表达。     

滋肾活血法对糖尿病肾病大鼠肾组织Ⅳ-C及MMPs/TIMPs系统的影响

目的 观察活血降糖胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)蛋白表达及MMPs/TIMPs系统作用的影响.方法 将SD雄性大鼠复制为DN动物模型,筛选DN成模大鼠,随机分成模型(DNM)组、中药(HX)组、西药(IR)组,并随机设正常对照(NC)组,分别予中西药物干预;8周后处死大鼠取肾组织,以免疫组织化学方法测定IV-C、MMP-9、MMP-2及TIMP-1、TIMP-2的蛋白表达,计算积分光密度及面密度比值.结果 HX组和IR组的Ⅳ-C免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组降低,MMP-9、MMP-2免疫组织化学染色面密度及积分光密度较DNM组升高,DNM组TIMP-1、TIMP-2与HX组和IR组比较呈强阳性表达,HX组和IR组染色面积及积分光密度均较DNM组降低,差异有统计学意义(P＜0.01);MMPs/TIMPs比值与Ⅳ-C免疫组织化学染色面积呈负相关(r1=-0.929,r2=-0.908,P＜0.01).结论 滋肾活血中药——活血降糖胶囊可能通过调节肾组织MMPs/TIMPs系统蛋白表达,改善Ⅳ-C代谢,延缓DN肾小球硬化进程,对DN肾脏发挥保护作用.     

亮氨酸拉链蛋白对前脂肪细胞增殖、分化及相关基因表达的影响

目的:探讨亮氨酸拉链蛋白(GILZ)对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的作用及对脂肪细胞分化相关标志基因PPARγ2、C/EBPa、LPL和FAS mRNA的表达。方法:采用MTT法检测GILZ稳定表达3T3-L1细胞从D1到D11细胞的增殖情况。油红O染色观察GILZ过表达对脂肪细胞分化和甘油三酯相对含量的影响。实时荧光定量PCR法检测脂肪细胞分化相关标志基因PPARγ2、C/EBPa、LPL和FAS的mRNA表达。结果:与转染Pc DNA3空载体的对照组相比,GILZ过表达组的细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05)。经MID诱导后,与对照组相比,GILZ过表达组的桔红色细胞显著减少。脂肪细胞内甘油三酯相对含量也显著降低(0.365±0.012 vs 0.181±0.014,P<0.001)。分化过程中GILZ过表达的3T3-L1细胞内脂肪细胞分化基因PPARγ2、C/EBPa、LPL和FAS的mRNA表达显著降低(分化第9天时的相对表达分别为11.447±0.831 vs 1.173±0.290,17.700±0.915 vs 1.557±0.384,67.057±5.288 vs 9.467±3.406,40.946±3.968 vs 4.967±1.091,P<0.001)。结论:GILZ对前脂肪细胞的增殖没有明显的影响。GILZ过表达可显著性抑制PPARγ2,C/EBPa,LPL和FAS的mRNA表达,表明GILZ可能通过下调脂肪细胞分化转录因子PPARγ2,C/EBPa的表达而抑制脂肪细胞特异性基因LPL和FAS的表达,进而抑制脂肪细胞的分化。     

价值医疗理念下某三级甲等医院预住院模式实践探索

分析了价值医疗理念下预住院模式的特点,介绍了某三甲医院预住院模式的开展现状,总结了预住院价值目标的实现路径。同时,分析了预住院模式的运行成效,发现当前预住院开展规模和手术情况符合三级医院功能定位,预住院患者的平均住院日和平均住院费用低于普通入院患者,住院模式未增加患者经济负担。从质量控制、成本效益、功能延伸上提出了改进预住院模式的思考和建议。     

糖皮质激素对慢性阻塞性肺部疾病患者甲状腺激素水平影响

目的研究糖皮质激素治疗对慢性阻塞性肺部疾病(COPD)患者下丘脑-垂体-甲状腺轴激素水平的影响。方法采用放射免疫法分别测定65例使用糖皮质激素治疗的COPD患者(COPD组)急性期和缓解期TT3、FT3、TT4、FT4、TSH水平,采用同样方法测定63例未使用糖皮质激素的其他肺部疾病患者(对照组)的血清TT3、FT3、TT4、FT4、TSH水平。结果 COPD组与对照组急性期比较,血清TT3(1.18±0.42)nmol/Lvs(1.29±0.45)nmol/L、FT3(3.68±0.76)pmol/Lvs(4.00±0.72)pmol/L、TT4(104.07±34.47)nmol/Lvs(109.30±33.73)nmol/L、FT4(13.71±3.12)pmol/Lvs(13.58±3.53)pmol/L及TSH(1.29±1.13mIU/L)vs(1.36±1.34mIU/L)水平差异均无显著性。两组患者急性期TT3、FT3均低于各自缓解期水平,差异有显著性(P<0.05),TT4、FT4及TSH急性期与缓解期相比,差异无显著性。结论 COPD急性期患者使用糖皮质激素治疗未进一步影响下丘脑-垂体-甲状腺轴功能。