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目的 了解上海地区汉族炎症性肠病(IBD)患者TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性,探讨其多态性与IBD的相关性,并与其他国家不同人群中该基因多态性分布进行比较.方法 采用PCR-RFLP法,对IBD组(n=84)和健康对照组(n=135)进行TLR4(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2的基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性检测,PCR产物进行核苷酸序列分析.结果 在IBD组和对照组中均未发现TLR4突变基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2突变基因(Arg677Trp、Arg753Gln).结论 TLR4基因(Asp299Gly、Thr399Ile)和TLR2基因(Arg677Trp、Arg753Gln)多态性与上海地区汉族人群IBD易感性无明显相关性;在其他国家不同人群中分布的多态性可能是由种族差异所造成的. 相似文献
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在2020 年新型冠状病毒病(以下简称新冠)疫情发生后,为响应"停课不停学"的重要部署,各地纷纷开展在线教学,本教研室也开展了生物化学技术实验课程的线上线下混合教学实践.生物化学技术是研究生物大分子基本、重要的技术之一,这是医学专业学生必备的理论知识及实验技能. 相似文献
3.
目的 对结核分枝杆菌的ESAT-6基因进行克隆、鉴定与表达,为结核病的诊断、重组疫苗的应用打下基础。方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)对ESAT-6基因进行扩增,将扩增的产物连接于测序载体pGEM-T上,经测序反应确定无误后,再将PCR产物与原核表达载体pET42b( )构建表达ESAT-6的重组质粒,将重组质粒先转化人大肠杆菌DH5a内并提取质粒,经酶切鉴定后,再转化入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内,对转化菌株进行诱导后,破菌,进行SDS-PAGE电泳。结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,其表达的蛋白质相对分子质量为9900。结论 目的基因克隆到菌株内,重组结核分枝杆菌ESAT-6的成功表达为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测等奠定了基础。 相似文献
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目的:探讨葡萄糖诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)内钙离子(Ca^2+)浓度的动态变化及其信号转导途径。方法:在葡萄糖诱导的HK-2细胞中加入不同浓度的蛋白激酶C抑制剂(Hypericin)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Apopain)、蛋白酪氨酸激酶抑制剂(Genistein)、一氧化氮合酶抑制剂(NAME),利用激光共聚焦显微镜(LSCM)观察HK-2细胞内[Ca^2+]动态变化。结果:LSCM下观察发现,150mmol/L葡萄糖可引起HK-2细胞内[Ca^2+]增高。150mmol/L葡萄糖诱导的HK-2细胞中加入10^-4mmol/LHypericin、10^-6mmol/LApopain、10^-7mmol/LGenistein、10^-2mmol/LNAME可抑制葡葡萄糖诱导的HK-2细胞内[Ca^2+]增高。结论:葡萄糖作用于HK-2细胞,可引起细胞内[Ca^2+]增高;蛋白激酶C、caspase-3、蛋白酪氨酸激酶、一氧化氮(NO)均参与了葡葡萄糖诱导的HK-2细胞内[Ca^2+]增高的信号传导过程。 相似文献
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目的:探讨我国上海地区汉族人群的对氧磷酶1(PON1)基因T-107C、PON2 Ser311Cys基因多态性与脑梗死发病乃至颈动脉硬化之间的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测134例脑梗死患者和103名健康对照者PON1 T-107C、PON2 Ser311Cys的多态性基因型,并研究其对脑梗死发病的影响。结果:多因素多元逐步Logistic回归分析显示,三酰甘油、总胆固醇是脑梗死的独立危险因素;同时,脑梗死组的PON1 T-107C、PON2 Ser311Cys基因型及等位基因频率分布与健康对照组间差异均有统计学意义(P 相似文献
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目的:探讨胃癌AGS细胞在无营养培养条件下发生内质网应激时的未折叠蛋白质反应(UPR)相关基因和蛋白质的表达。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白印迹,检测胃癌AGS细胞在无营养条件培养下发生UPR时相关基因和蛋白质的表达。结果:实时荧光聚合酶链反应检测胃癌AGS细胞在无营养条件下培养1h、3h、24h、48h的情况,发现其中ATF4、CHOP的mRNA表达均明显高于正常培养的胃癌AGS细胞(对照)(P<0.05):而培养1h、3h、24h时的ATF6、Bip、PERK的mRNA表达量明显高于对照(P 相似文献
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目的探讨脑梗死患者(CI)与脂联素基因-3971A/G多态性的关系。方法运用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对126名对照者和150例CI患者的脂联素基因启动子3971多态性进行检测。结果对照组和CI组的基因型频率分别为67.20%、26.40%、6.40%;82.00%、16.67%、1.33%,经分析发现两组间差异有统计学意义(P0.05)。两组的等位基因频率分别为80.40%、19.60%;90.33%、9.67%,经分析发现两组间差异有统计学意义(P0.05)。CI组的脂联素基因-3971位各型的TG、血糖、收缩压均明显高于对照组(P0.05),而TC、HDL-Cn、onHDL-C、LDL-C、舒张压在两组间无统计学意义(P0.05)。经过多元逐步Logistic回归分析显示TG的OR值为1.414,95%CI(1.059-1.888);血糖的OR值为1.034,95%CI(1.018-1.051);收缩压的OR值为1.339,95%CI(1.098-1.633);GG型的OR值为2.289,95%CI(1.243-4.215)。结论脂联素基因-3971A/G多态性的GG型可能是CI发病的一个独立危险因子。 相似文献
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目的:探讨混合型高脂血症与肝脂酶基因启动子250G/A多态性的关系。方法:运用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术,检测195名对照者和105例混合型高脂血症患者的肝脂酶(HL)基因启动子250G/A多态性,并研究其对血脂水平的影响。结果:混合型高脂血症组HL基因型和等位基因频率分布与对照组相比,均有显著差异(P<0.05);GAvs GG,0R=1.446,95%CI:0.829~2.524;AA vs GG,OR=4.076,95% CI:2.068~8.035;A vs G, OR=1.978,95%CI:1.408~2.777。在混合型高脂血症组中除患者年龄和AA型载脂蛋白Al(Apo Al)水平外,其他基因型的各项指标均与对照组相同基因型有显著差异(P<0.05)。混合型高脂血症组各基因型间的血脂指标均无差异(P>0.05);而对照组AA型的TG水平明显高于GG型、GA型(P<0.05),LDL-C水平则明显高于GG型(P<0.05)。结论:HL基因启动子250G/A多态性与混合型高脂血症的发生相关,并可影响血浆脂类代谢。 相似文献
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金黄色葡萄球菌肠毒素A基因克隆及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 对金黄色葡萄球菌肠毒素A基因(SEA)进行克隆、鉴定与表达,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究SEA的功能奠定基础。方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增SEA基因,将扩增的产物连接于测序载体pMD18-T上,经测序反应确定无误,酶切后将SEA基因与原核表达载体pET42b(+)构建表达SEA的重组质粒。将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5a内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达宿主大肠杆菌B121菌株内,对转化菌株进行诱导后,破菌,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。结果 构建了表达载体pET42b(+)-SEA,并获得高效表达,表达的蛋白质相对分子质量为27000,重组蛋白(rSEA)在37℃、25%经异丙基硫化-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导时均以包涵体形式存在。结论 SEA基因成功克隆到表达质粒内并表达,为制备单抗、诊断试剂及其致病机制研究奠定了基础。 相似文献