PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用比较

目的 对PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用进行比较。方法 分别采用PCR-微流芯片、基因芯片法对15例临床考虑拉米呋定耐药的患者血清进行HBV多点变异检测，从中随机抽取8例患者标本采用PCR-微流芯片、基因测序法进行HBV基因型、HBVYMDD检测。结果 基因芯片法与PCR--微流芯片检测HBV多点变异9／15三项完全一致，3／15两项一致；8例患者双份标本两种方法检测HBV基因型结果完全一致均为IIBVC型；基因测序法8例患者中1例HBVYMDD阳性，PCR微流芯片法8倒患者中栓出2倒HBVYMDD。结论 PCR-微流芯片法与基因芯片法、基因测序法有较好的一致性．适用于临床和流行病学调查研究。     

慢性肝病患者肾功能损害与血清CL-IV的关系

探讨慢性肝病患者伴肾功能损害时与血清CL-IV的关系。选择肾功能异常(17例)和肾功能正常(28例)的慢性肝炎中度、重度及肝炎肝硬化患者为检测对象。结果慢性肝炎中度、重度及肝炎肝硬化的CL-V呈递增趋势,且均显著高于正常对照(P<0.05)肾功能异常组CL-V值高于肾功能正常组(P<0.05),SCR、BUN值亦如此(P<0.01)。提示血清CL-V变化与肾功能损害、疾病活动状态相关,可作为监测慢性肝病合并肾功能损害预后的辅助指标。     

江苏省南通地区丙型肝炎病毒的分子流行病学分析

目的 :调查南通地区丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的亚型分布特征。方法 :2012年5—9月间,在南通市第三人民医院收集到109例全血样本用以病毒的RNA提取,RT-PCR扩增和测序。所得的病毒序列与HCV参考序列构建系统发育树。结果:在收集到的109例HCV抗体(Anti-HCV Ig G)阳性样本中,有49例HCV RNA阳性,基于NS5B和C/E2片段构建的进化树显示,南通地区至少流行有1b、2a、3a、3b、6a 5个亚型病毒株。其中,1b是最主要流行的病毒株,占阳性样本中的63.3%;2a次之,占20.4%;3a、3b、6a 3个亚型分别占4.1%、8.2%和4.1%。相较于在普通人群中1b(68.9%)和2a(22.2%)为主要流行的病毒株,6a(50.0%)是静脉吸毒人群中最流行的亚型。结论:多个亚型的HCV病毒株共流行于南通地区,其中1b和2a是最主要流行的病毒株。     

HBV-DNA定量检测在乙型病毒性肝炎诊断中的临床价值

目的 :探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA在乙型病毒性肝炎诊断中的临床价值。方法 :乙型肝炎患者180例为观察组,另选体检健康者300例为对照组,两组均行血清HBV-DNA检测,同时将检测结果与酶联免疫吸附试验测定的乙肝血清标志物进行对比分析。结果:HBs Ag+HBe Ag+HBc Ab+阳性率最高达98.0%,其病毒拷贝数为6.25±1.72copies/m L,也显著高于其它组(P<0.01);急性乙肝HBV-DNA阳性为85.7%,显著高于其它组(P<0.01);病毒拷贝数为6.25±1.72copies/m L,均明显高于其他疾病(P<0.01)。结论:荧光定量PCR方法检测HBV-DNA可准确判断乙型肝炎病毒的复制能力和传染性,从而为临床治疗提供更多依据。     

慢性病毒性肝炎患者血清sICAM-1与肝组织病理变化的相关性研究

目的评价sICAM-1在慢性肝病诊治中的临床意义。方法对130例慢性肝炎患者血清sICAM-1、纤维化指标和肝活检病理改变等进行相关性研究。结果ICAM-1在慢性肝炎肝组织的表达与炎症活动度、肝纤维化程度均呈显著正相关。血清sICAM-1水平与肝组织ICAM-1表达呈显著正相关(r=0.64,P<0.01),并与慢性肝炎的临床及病理分度呈一致性改变。血清sICAM-1水平与HA、PCⅢ、CⅣ、LN亦有良好的相关性(P<0.01)。结论慢性肝炎患者肝组织及血清ICAM-1水平可一定程度反映肝脏炎症和纤维化程度。血清sICAM-1水平的监测可作为临床判断慢性肝炎病情严重程度和预后的重要免疫学指标之一。     

干扰素序贯或联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效的基因诊断指标

我们采用PCR-微流芯片技术检测HBV基因型、HBVYMDD、HBVDNA含量来判断抗病毒的疗效。报道如下。     

HCV感染基因型病毒复制程度与肝病关系的研究

采用限制性内切酶Ｓａｕ３Ａｌ和ＨａｅⅢ对５４例ＲＴ－ＰＣＲ法ＨＣＶＲＮＡ阳性的５＇ＮＣ区扩增产物进行酶切分型；ＰＣＲ滴定法半定量分析ＨＣＶＲＮＡ含量。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶⅠ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ、Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅠ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４），ＨＣＶⅡ型感染阳性率在ＡＨ、ＣＡＨ、ＬＣ三组间无显著差异（     

结肠癌患者放疗和化疗前后血小板参数的变化及意义

目的探讨结肠癌患者放疗和化疗前后血小板参数的变化及其临床意义。方法采用XE-2100型血细胞分析仪检测38例结肠癌患者治疗前后以及30例健康人的血小板参数,包括血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)和血小板压积(PCT),并对结果进行对比分析。结果结肠癌患者与健康对照组血小板参数间相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结肠癌患者放疗和化疗后3dPLT、MPV、PCT、P-LCR、PDW明显低于放化疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌患者放疗和化疗后10d,MPV、PDW上升明显,与放疗和化疗后3d比较,差异有统计学意义(P<0.05);PLT、MPV、PCT、P-LCR虽有所升高,但与放化疗后3d比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血小板参数测定可作为结肠癌患者放疗和化疗前后评价骨髓造血功能较好的指标,其中MPV、PDW为更灵敏的指标。     

慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血特异性CD8~+T淋巴细胞检测的临床意义

目的研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血特异性CD8+T淋巴细胞(CTL)频率的变化及临床价值。方法采用乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)18-27表位肽-人类白细胞抗原(HLA)-A*0201五聚体及CD8单克隆抗体,设计流式细胞技术检测HLA-A2+6例、HLA-A2-12例非HBV感染者、HLA-A2+49例和HLAA2-42例HBV感染者外周血中针对该肽段的特异性CTL数量,占总计数CD8+细胞数百分比表示。结果 HLA-A2-HBV感染未抗病毒治疗者特异性CTL(0.30%～14.40%,中位数1.13%,n=20)与HLA-A2-非HBV感染者(0.33%～3.90%,中位数1.04%,n=12),差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于HLA-A2-抗病毒治疗者(0.25%～20.30%,中位数2.11%,n=22,P<0.05);HLA-A2-抗病毒治疗者特异性CTL和HLA-A2+未抗病毒治疗者特异性CTL(0.20%～29.90%,中位数2.22%,n=20)均显著高于HLA-A2-非HBV感染者(P<0.01);HLA-A2+抗病毒治疗者特异性CTL(0.14%～39.22%,中位数1.33%,n=29)显著高于HLA-A2-非HBV感染者(P<0.05)。HLA-A2+未抗病毒组中血清HBV DNA<103 copy/mL、丙氨酸氨基转移酶小于40U/L者特异性CTL频率增高(P<0.05、0.01)。结论 HBV抗原肽-HLA-A*0201五聚体流式细胞技术能在体外直接检测外周血HBV特异性CTL频率的变化,其水平一定程度反映不同临床感染状态慢性HBV感染患者T淋巴细胞对特异性抗原表位免疫应答的差异。     

失代偿性肝硬化患者血清VEGF、TGF-β_1、TNF-α检测及临床意义

目的:检测失代偿性肝硬化(DLC)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,探讨血清VEGF、TGF-β1、TNF-α对DLC预后判断的意义。方法:选择DLC患者86例,同步测定血清VEGF、TGF-β1、TNF-α,分析三者水平变化与肝脏损伤程度的关系。结果:DLC患者血清VEGF、TGF-β1、TNF-α均明显高于健康组,随着肝硬化、肝癌发展,TGF-β1、TNF-α水平逐渐下降(P<0.05,P<0.01);发生慢加亚急性肝衰竭(SACLF)患者VEGF、TNF-α水平高于慢性肝衰竭(CLF)患者(P<0.05);中晚期SACLF患者VEGF、TNF-α高于早期,早中期患者TGF-β1水平低于晚期(P<0.05);死亡患者血清VEGF、TGF-β1水平明显高于病情好转者(P<0.01),TNF-α低于病情好转者(P<0.05)。结论:DLC患者血清VEGF、TGF-β1、TNF-α的水平与疾病的严重程度及预后密切相关,它们在DLC发生发展过程中可能起重要作用。