老年患者慢性阻塞性肺疾病的防治

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是呼吸系统疾病中的常见疾病和多发病,其病死率居所有死因的第4位,且有逐年增加之势。在我国COPD位居主要致死原因的第3～4位,发病率呈逐年上升势态。老年患者占了慢性阻塞性肺疾病患者的很大比例,治疗难度大,死亡率高。早期发现、早期预防、规范化治疗可减少COPD急性加重频率。     

277例弥漫性实质性肺疾病住院患者死亡危险因素分析

目的 探讨277例弥漫性实质性肺疾病住院患者死亡的影响因素.方法 本院呼吸内科弥漫性实质性肺疾病(DPLD)的病例依据病因分为结缔组织疾病相关DPLD组(CTD-IP)、其他已知病因DPLD组和特发性间质性肺炎(IIPS)组,每组按预后情况分又为非死亡组和死亡组两个亚组,采用病例对照的研究方法进行风险因素回顾性分析.结果 IIPS组死亡亚组年龄平均、基础疾病患病率及CRP、ALT、AST指标高于非死亡组,CTD-IP组死亡亚组的CRP、WBC、AST指标高于非死亡组,其他病因组两亚组的病因构成提示有统计学差异,其死亡亚组CRP、PT、APTT、ALT、AST高于非死亡组.将上述各组指标进行曲线分析,AUC大于0.7指标作为死亡风险预测指标,并计算出其截断点作为最佳诊断阈值纳入多因素logistics回归分析.结果显示IIPS组中CRP ＞40(mg/L)和年龄＞70(岁)、CTD-IP中CRP ＞40(mg/L)、其他组中CRP＞ 50(mg/L)为独立死亡危险因素.结论 CRP升高、高龄及药物继发性DPLD是弥漫性实质性肺疾病患者住院死亡的危险因素,其中前者是DPLD患者的共同危险因素,而后两者分别是IIPS组和其他病因组的独立危险因素.上述因素在用于预测不同类型DPLD患者死亡风险中需区别分析.     

硝普钠对内毒素诱导的U937细胞TLR4表达的影响

目的:研究一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937表达TLR4的影响,明确其抗炎机制.方法:佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为四组,即对照组(空白对照)、LPS组(10 ng/ml LPS+100 ng/ml rhLBP)、低剂量SNP组(LPS+rhLBP+50 μmol/L SNP)和高剂量SNP组(LPS+rhLBP+500 μmol/L SNP).用RT-PCR和Western blot测定TLR4 mRNA和蛋白表达.ELISA法测定细胞上清中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果:低、高剂量SNP组TLR4 mRNA的OD值较LPS组(0.308±0.050、0.138±0.004 4 vs 0.342±0.098,P<0.05、P<0.01)低,较对照组高(0.030±0.012,均P<0.01).低、高剂量SNP组TLR4 蛋白的OD值较LPS组(4.42±1.01、3.06±0.07 vs 6.02±1.19,均P<0.01)低,较对照组(2.01±0.09,均P<0.01)高.低、高剂量SNP组TNF-α较LPS组显著降低(105.5±2.56、71.5±7.75 vs 128.67±39.67,均P<0.05),较正常组(60±17.2,P<0.05、P>0.05)高.结论:SNP可能通过抑制TLR4介导的LPS信号跨膜转导,降低其引起的炎症反应,提示SNP对急性肺损伤或脓毒血症可能具有预防和早期治疗的作用.     

RNA干扰her2／neu基因表达抑制肺癌A549细胞增殖的研究

目的:HER2/neu表达对肺癌细胞生物学的影响尚不明了,文中运用RNA干扰技术抑制HER2/neu表达,并观察对肺癌A549 细胞体外增殖的影响.方法:构建针对her2/neu基因的RNA干扰真核表达载体,运用脂质体介导转染A549 细胞并用G418筛选出阳性克隆株;半定量RT-PCR和Western检测转染后HER2/neu mRNA及蛋白的表达水平;FCM检测细胞周期分布; MTT法绘制细胞生长曲线观察体外细胞的增值能力.结果:成功构建针对her2/neu基因的RNA干扰真核表达载体(命名为psilence 3.1-HER2),转染后使A549 细胞HER2/neu mRNA和蛋白的表达较未转染组和阴性对照质粒转染组均显著下调;细胞G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;细胞生长曲线右移、增殖速度明显减慢.结论:psilence 3.1-HER2能够稳定、高效、特异地抑制肺癌A549内her2/neu基因的表达,可显著抑制细胞增殖.针对her2/neu基因的RNAi策略有望成为肺癌的基因治疗的新选择.     

衍生性聚偏二氟乙烯膜用于蛋白质及肽的固相序列测定

目的：研究衍生聚偏二氟乙烯（ＰＶＤＦ）膜用于蛋白质及肽的固相序列测定的可行性。方法：在ＰＶＤＦ膜上引入对苯二异硫氰酸基（ＤＩＴＣ）制成能与蛋白质及肽共价偶联的膜载体。用这种膜载体与蛋白质或肽样品偶联后,进行Ｅｄｍａｎ降解及氨基酸顺序分析。体化学性能稳定,偶联操作简单,结果准确,与蛋白质及肽的偶联率为７８．１９％,Ｅｄｍａｎ降解的重复回收率为９０．２７％,所测氨基酸序列与已序列安全相同。结论：衍生     

COPD急性加重时影响病死率危险因素的回顾性病例对照研究

目的 探讨影响慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)病死率的危险因素.方法 选择我科2004年1月至2008年6月因慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)病死的33例患者,及同期缓解出院的40例AECOPD患者为对照进行回顾性分析,研究影响其预后的危险因素.结果 死亡组和对照组的一般情况大致相似,而且2组在氧合指数、发生酸碱失衡的病例数等方面也没有显著差异.在住院期间的最高PaCO2的水平以及使用机械通气、发生肺性脑病、消化道出血、肾功能衰竭、多器官功能不全的病例数等方面则有显著差异.经多重Logistic回归分析,消化道出血(OR值13.09,95%CI 1.06～162.18)、无创(OR值9.19,95%CI 2.15～39.42)和有创机械通气(OR值11.055;95%CI 1.91～63.94)是预计AECOPD病死率的独立危险因素.由于对照组没有并发肾功能衰竭、多器官功能不全、弥漫性血管内凝血的病例,所以没进行多重回归分析.结论 AECOPD时的低氧血症、酸碱失衡不是影响其病死率的重要危险因素.而合并多器官功能不全、肾功能衰竭、消化道出血等并发症以及需要机械通气治疗则是提示预后不良的重要指标.     

LBP抑制肽对内毒素诱导的脓毒血症小鼠的保护作用

目的 研究脂多糖结合蛋白抑制肽(P12)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的脓毒血症小鼠TLR4、CD14及肿瘤坏死因子a(TNFa)表达和小鼠生存率的影响.方法 40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只.腹腔内注射LPS复制脓毒血症模型,尾静脉注射P12,蛋白定量方法 (Western blot)检测TLR4和CD14蛋白的表达,ELISA法检测小鼠血清中TNF-a的含量.结果 抑制肽组TLR4和CD14蛋白的OD值较LPS组低,较正常组高.脓毒血症组小鼠血清中TNF-a的含量显著高于对照组[(180.17±39.14)pg/mL比(24.88±5.82)pg/mL,P<0.01];低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组血清中TNF-a的含量分别为(112.69±19.78)、(86.34±9.25)和(70.48±8.48)pg/mL,均明显低于脓毒血症组(均P<0.05).结论 脂多糖结合蛋白抑制肽通过抑制由TLR4和CD14介导的LPS跨膜信号转导,降LSP诱导的TNFa的释放,提高了脓毒血症小鼠的生存率.表明脂多糖结合蛋白抑制肽对急性肺损伤或脓毒血症可能具有潜在的预防和早期治疗作用.     

低氧条件下共培养体系中肺动脉内皮细胞经Notch1/Jagged1信号通路调控肺动脉平滑肌细胞的增殖

目的探讨低氧条件下细胞共培养体系中肺动脉内皮细胞经由Notch1/Jagged1信号通路调控肺动脉平滑肌细胞的增殖。方法建立Transwell共培养体系,将肺动脉内皮细胞(PAEC)和平滑肌细胞(PASMC)分别接种于下室和上室,PAEC经DAPT(Notch信号阻断剂)或(和)S iR-NA-Jagged1预处理后,与PASMC共同置入自动常压缺氧孵箱进行低氧处理。根据PAEC是否行DAPT、Jagged1小RNA干扰预处理进行实验分组:常氧时PAEC与PASMC共培养对照组(N)、低氧时PAEC与PASMC共培养组(H1)、低氧时DAPT(终浓度10μmol/L)预处理PAEC与PASMC共培养组(H2)、低氧时S iRNA-Jagged1预处理PAEC与PASMC共培养组(H3)、低氧时DAPT加S iRNA-Jagged1预处理PAEC与PASMC共培养组(H4)。用3H-TdR掺入法检测PAEC和PASMC增殖情况,RT-PCR检测PAEC中Notch1、Jagged1 mRNA表达水平。结果低氧时各组PAEC和PASMC的3H-TdR掺入量明显高于常氧共培养对照组(均P<0.01);与H1组比较,...     

老年肺损伤的机械通气治疗

急性肺损伤（acutelunginjury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS）多发生于原心肺功能正常的患者,是由于心源性以外的各种肺内、肺外致病因素引起的以肺泡一毛细血管炎症损伤为主的急性I型呼吸衰竭,为临床上常见的危重症之一。     

转录激活因子3对绿脓杆菌致急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液炎症因子的影响

目的 探讨转录激活因子3(ATF3)对绿脓杆菌致急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡灌洗液炎症因子的影响。方法 以荧光标记的绿脓杆菌(PA)(1.5×108CFU/ml,50μl)经鼻滴入C57BL/6野生型和ATF3敲基因小鼠气管构建急性肺损伤模型;ELISA检测WT小鼠和ATF3-KO小鼠肺泡灌洗液中前炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。结果 经鼻滴入绿脓杆菌6 h后小鼠肺组织病理检测表现为:中性粒细胞大量浸润、肺泡结构破坏、肺泡出血以及肺间质水肿,证实成功构建了经鼻滴入绿脓杆菌(PA)诱导的急性肺损伤模型。野生型小鼠在绿脓杆菌滴入后肺泡灌洗液中IL-1β的浓度于3、6、12和24 h时分别为(198.36±20.85)pg/ml,(131.93±8.23)pg/ml,(130.10±15.65)pg/ml,(67.04±2.77)pg/ml;肺泡灌洗液中IL-6的浓度于3、6、12和24 h时分别为(1 657.59±77.13)pg/ml,(1 232.78±31.85)pg/ml,(103.33±1.75)pg/ml,(24.44±5.79)pg/ml;肺泡灌洗液中TNF-α的浓度于3 h,6 h,12 h和24 h时分别为(542.12±49.12)pg/ml,(347.89±34.38)pg/ml,(42.23±9.63)pg/ml,(19.45±3.23)pg/ml。野生型小鼠急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α浓度均于3 h表达最高,故选择3 h时相点对敲基因小鼠进行检测,ATF3敲基因小鼠在绿脓杆菌滴入后3 h时肺泡灌洗液中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度分别为(321.25±7.81)pg/ml、(2 479.69±127.4)pg/ml、(840.75±22.97)pg/ml,表达明显高于野生型小鼠急性肺损伤组及对照组,均存在显著差异(P0.05)。结论 ATF3对绿脓杆菌致急性肺损伤小鼠的炎症反应有抑制作用。