不同抗病毒药物降低HBV相关肝细胞癌风险的作用

抗病毒治疗可降低慢性乙型肝炎患者肝细胞癌(HCC)发生的风险。在一线抗病毒药物中,更多的研究显示富马酸替诺福韦酯降低HCC风险的作用可能优于恩替卡韦,尤其在亚裔患者当中;极有限的研究表明富马酸丙酚替诺福韦酯降HCC风险的作用可能优于富马酸替诺福韦酯;IFN降HCC风险的效果优于单用核苷(酸)类似物。现有可及的药物中,IFN联合核苷(酸)类似物或是HCC高风险患者降低HCC风险的最佳选择。但上述不同药物降HCC风险作用的比较,循证证据级别偏弱,均有赖于随机对照研究进一步阐明。临床实践中,需根据患者实际情形、基础情况,权衡患者HCC发生风险、对药物的耐受性和经济的可承受性,制订个体化的抗病毒策略。     

Hsp90抑制剂新生霉素诱导HL-60细胞凋亡及其机制

目的研究Hsp90抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)诱导HL-60细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白(clientprotein)AKT和ERK2功能的影响。方法细胞用NB处理后,采用AO/EB染色后荧光显微镜观察凋亡形态,采用AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白水平。结果NB能明显抑制HL-60细胞增殖,IC50是0.3546mmol.L-1;NB能促进细胞色素C释放入胞质,激活Caspase-3/9的活性,触发HL-60细胞凋亡;NB能抑制AKT和ERK的功能,使细胞内p-AKT(Ser473)和p-ERK2的蛋白含量减少。结论NB可通过线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡,还可干扰Hsp90伴侣功能阻断增殖信号通路,抑制HL-60细胞生长。     

姜黄素对K562细胞增殖的影响及其与P210~(bcr/abl)激活的Ras信号途径的关系

目的　研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法　应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果　Cur对P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞抑制作用呈量效、时效关系 ,Cur 10mg·L-1作用 48h对K5 62细胞的抑制率高达 (81 9± 1 0 ) % ;相比之下 ,已知对P2 10 bcr/abl无影响的VP 16作为抗癌药对照 ,对K5 62细胞的抑制作用明显较弱。Cur和VP 16对K5 62细胞的不同作用提示Cur对K5 62细胞作用可能有特异性 ,而这个特异的作用靶点可能就是引起CML对多种化疗药物耐药的CML特征性的P2 10 bcr/abl蛋白。Westernblot的实验结果表明Cur使K5 62细胞P2 10 bcr/abl、MEK 1和c Jun蛋白含量明显减少 ,且呈量效关系 ,相比之下 ,VP 16对K5 62细胞P2 10 bcr/abl的蛋白含量无影响而仅轻微减少MEK 1和c Jun的蛋白含量 ,提示MEK 1和c Jun蛋白含量的减少是非特异性的 ,并且 ,在P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞 ,Cur除了非特异性地抑制细胞中MEK 1及c Jun的表达外 ,Cur还可能通过特异性地抑制K5 62细胞的特异性靶点P2 10 bcr/abl的表达 ,从而下调其下游的Ras信号途径中的其它信号分子。结论　Cur可特     

姜黄素衍生物Fm04抑制K562细胞增殖及其对P210^bcr/abl引信号通路的影响

目的研究姜黄素衍生物Fm04对K562细胞的增殖及对P210^bcr/abl信号通路的影响。方法应用MTT法检测姜黄素衍生物Fm04对K562细胞增殖的影响；应用Western blot法检测P210^bcr/abl及其下游通路蛋白表达的变化和线粒体细胞色素C的变化；比色法测定Caspase-3、Caspase-9活化程度。结果Fm04对K562细胞的抑制作用呈量效、时效关系，4 μmol／L Fm04作用24h。抑制率88．4％，半数抑制浓度1．45 μmol／L，强度约为姜黄素的7倍；Western blot表明Fm04可显著下调P210^bcr/abl及其下游信号通路蛋白，减少细胞线粒体内细胞色素C含量；Fm04处理组Caspase-3、Caspase-9浓度值增加。结论Fm04显著抑制K562细胞的增殖并减少P210的蛋白含量从而下词P210^bcr/abl下游多种信号分子表达，通过激活caspase的活化和线粒体内细胞色素C的释放，最终诱导K562细胞的凋亡。     

药学综合实践课程模块的设置

对传统药学综合实践存在的问题进行分析和探讨,按照现代社会对药学人才的要求,结合我国药学教育的实际情况,提出设置药品研发实践课程模块、药学服务实践课程模块、药事法规实践课程模块及药品营销实践课程模块的改革思路。     

姜黄素固体分散体对小鼠实验性慢性肝损伤的保护作用

目的:探讨姜黄素固体分散体对小鼠实验性慢性肝损伤的保护作用。方法:用四氯化碳(CCl4)诱导小鼠慢性肝损伤模型,造摸的同时给予姜黄素固体分散体悬浊液灌胃,观察小鼠血清谷丙氨酸转移酶(ALT)、谷草氨酸转移酶(AST)、肝脾体重比,肝组织形态学变化。结果:姜黄素固体分散体与秋水仙碱相似,可以降低小鼠慢性肝损伤中升高的ALT、AST,改善肝脾体重比,减轻肝组织病理学改变。结论:姜黄素固体分散体对CCl所致的小鼠慢性肝损伤有保护作用。     

海外学生药理创新技能训练的探索

以创新能力培养理念为指导,采取指导细读文献、培养独立实验能力、分析整理实验结果等循序渐进方式对海外学生药理创新技能进行训练,探索符合海外学生特点的创新能力培养方式,激发其创新思维和综合素质培养,适应药学发展的需要。     

慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响

目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响. 方法:构建含bcr/abl RNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562).Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照. 结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞, Real-time PCR及Western blotting证实B/A-K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调.bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1 vs 20.4、23.3 h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高.结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡.     

姜黄素诱导人慢粒白血病K562细胞凋亡与线粒体途径的关系

目的研究姜黄素（Cur）对慢性粒细胞白血病（CML）细胞株K562的作用,并且探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系。方法应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响,AO／EB荧光染色法、细胞光度术、DNA凝胶电泳等方法观察细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量。结果Cur对K562细胞抑制作用呈量效、时效关系;Cur对人正常骨髓单个核细胞与K562细胞之间有一定的选择性,对K562细胞的敏感性约为人正常骨髓单个核细胞的5倍,在对K562细胞抑制超过95％时,对人正常骨髓有核细胞几无毒性。Cur5．0,10．00g／mL作用24h,可诱导K562细胞凋亡,促进细胞色素C释放,激活caspase-3。结论Cur可通过线粒体途径诱导人慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡。