neuB1失活空肠弯曲菌O∶19突变株感染致病力的初步研究

目的探讨neuB1失活空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)O∶19突变株的感染致病力。方法由CJ O∶19野生株构建neuB1灭活的突变株,检测其对正常人血清杀菌活性的敏感性、运动力和自身凝集(AAG)活性,并与野生株进行比较。结果突变株对10%正常成人血清(normal human serum,NHS)杀菌活性的敏感性高于同源的野生株(P<0.05),孵育15min和60min后突变株存活率分别为(20.6±7.4)%和(9.6±3.6)%,而野生株分别为(36.9±5.9)%和(15.5±4.3)%,但突变株的运动力和AAG活性与野生株比较却没有显著性差异(P>0.05)。结论neuB1失活CJ O∶19突变株仍具有较强的感染致病力,因而应考虑灭活后突变菌株疫苗的开发研究。     

结核性脊髓脊膜炎1例

患者女，62岁。因小便障碍9d，伴双下肢无力3d入院。否认结核病史及与结核患者接触史。患者9d前无明显诱因出现小便障碍，不能排出，3d前并出现双下肢无力，抬举下肢困难。不伴肢体疼痛、畏寒、发热、咳嗽、咯痰。内科查体无异常。神经系统查体：意识清楚，脑神经（-），双上肢正常。双下肢肌张力降低，肌力3级，左侧L1以下和右侧T12以下痛觉消失，深感觉正常，腱反射消失，病理征（-）。辅助检查：胸片和腹部超声正常。脊柱MRI：T8椎体平面以下蛛网膜下腔内稍长T1，稍长12异常信号，胸段脊髓稍增粗，信号不均匀。     

空肠弯曲菌致周围性自身免疫性周围神经病的实验研究

目的 建立发病率高、具有典型临床表现的空肠弯曲菌(CJ)相关的轴索性自身免疫性周围神经病的动物模型.方法 将Wistar大鼠随机分成三组:Ⅰ组以CJ脂多糖(CJ LPS)、Ⅱ组以CJ LPS和锁眼形嘁血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyain,KLH)、Ⅲ组以KLH免疫,进行临床表现观察和坐骨神经病理学检查.结果 Ⅰ组和Ⅲ组中没有动物临床发病.Ⅱ组中60%(6/10)的动物出现了肌肉无力表现.病理学检查Ⅰ组神经原纤维异常率14.3%(57/400),Ⅱ组神经原纤维率达17.3%(69/400).均明显高于Ⅲ组(X2=44.815,P<0.01;X2=58.394.P<0.01).Ⅰ组与Ⅱ组的病变主要表现为轴索变性,二者病变的发生率差异没有统计学意义.结论 以CJLPS+KLH免疫大鼠诱发出了发病率较高、具有典型临床表现的CJ相关的轴索性自身免疫性周围神经病的动物模型.     

DNA疫苗与脂质体

ＤＮＡ疫苗（ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅ）亦称是基因疫苗、核酸疫苗,是携带编码外源抗原的真核细胞重组表达质粒即质粒ＤＮＡ,用其接种动物能在宿主细胞表达外源抗原,可引起免疫反应（包括体液免疫和细胞免疫）而提供保护作用,是继灭活疫茵、减毒活疫苗、重组多肽亚单位疫苗之后的新一代疫苗。其化学结构为双链环状ＤＮＡ,与传统疫苗相比,ＤＮＡ疫苗具有生产简单、价格低廉、低毒、能以天然形式的抗原提供给免疫系统、免疫应答全面（包括细胞免疫和体液免疫）、操作性强等优点。它为疫苗的研制提供了一种新的方法,受到广泛的重视,ＨＩ…     

活血通脉片对颈动脉易损斑块的干预作用

目的:探讨活血通脉片对颈动脉易损斑块硬化斑块厚度、稳定性的影响,并从抗血小板活化和抗炎反应方面探讨其作用机制。方法:将150例患者随机按数字表法分为对照组和观察组。对照组口服拜阿司匹林肠溶片,100 mg/次,1次/d;阿托伐他汀钙片,10 mg/次,1次/d。观察组在对照组治疗的基础上加服活血通脉片,5片/次,3次/d。两组疗程均为4个月。采用彩色多普勒超声测量治疗前后颈动脉内膜中层厚度(IMT),采用Crouse斑块积分法计算双侧颈动脉斑块积分、测量颈总动脉收缩期最大血流速度(Vmax),舒张期最小血流速度(Vmin),阻力指数(RI)和搏动指数(PI);检测治疗前后甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;检测治疗前后血小板表面活性标志蛋白CD62 p,CD63和糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体复合物水平;检测治疗前后高敏C-反应蛋白(hs-CRP),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;进行两组患者治疗前后血瘀证评分和安全性评价。结果:治疗后观察组IMT厚度低于对照组,斑块个数少于对照组,Crouse评分低于对照组(P0.01);观察组Vmax,Vmin快于对照组,PI低于对照组(P0.01);观察组TG,TC,LDL-C水平均低于对照组,HDL-C高于对照组(P0.01);观察组CD62p,CD63和GPⅡb/Ⅲa受体复合物均低于对照组(P0.01);观察组血瘀证评分低于对照组(P0.01);观察组患者血清hs-CRP,IL-6,TNF-α和MMP-9水平均低于对照组(P0.01)。结论:加服活血通脉片干预颈动脉易损斑块,能缩小斑块,使斑块厚度变薄,改善颈动脉血流,降低血小板活化程度和抗炎症反应,起到稳定斑块的作用,还能调节脂代谢,降低血瘀证积分,这些都有利于防止动脉粥样硬化性心血管疾病的发生。     

孔洞脑7例临床分析

目的:研究孔洞脑发病机制、临床表现及预后因素.方法:回顾性随访分析我院神经科、儿科5年来收集7例孔洞脑病例,均经CT或MRI证实,了解其围产期情况及生产史、发病年龄、临床表现、神经心理学测定、病理表现.结果:5例患者在围产期或婴幼儿时期有感染或外伤,2例其父母已经去世无法求证;发病年龄主要在8～78岁,主要症状为智力发育迟滞、癫痫发作、头昏;孔洞位于大脑半球者6例,小脑者1例,都为单病灶;语言测定正常者6例,视空间检查正常者4例,韦氏智商测定80分以上6例,1例78分;1例患者开颅手术引流,取组织病检腔壁为结缔组织.结论:孔洞脑可发生在各部位,与围产期或婴幼儿时期有感染或外伤有关,成年后与脑出血、大面积脑梗死有关,神经症状可早或晚出现,症状、预后与部位及其大小有关.     

病毒性肝炎肝硬化病人血清锌值与白蛋白的相关性探讨

[目的]探讨病毒性肝炎肝硬化病人血清锌值与白蛋白之间的关系,为临床采用补锌治疗改善病毒性肝硬化病人预后的方法提供依据。[方法]收集2004年9月～2006年4月,介于22～75岁间,病毒性乙型或丙型性肝炎肝硬化病人共38例,其中慢性乙型31位,慢性丙型肝炎7例。采用生化分析仪AU2700和BH5100吸收光谱仪分别测定患者肝功能血脂和血清锌值。记录其结果,统计分析锌与各检验值间关系。[结果]生化检验总蛋白(72.5±1.8)g/L,白蛋白(32.4±0.57)g/L,总胆红素(15.7±1.4)μmol/L,胆固醇(4.9±2.1)mmol/L,甘油三酯(1.8±0.9)mmol/L。血清锌值为(7.1±1.2)μmol/l;随着白蛋白下降,血清锌值与其呈显著的关系性(r=0.635,P=0.043),与其他检验值皆无相关性。[结论]虽然多数病毒性肝硬化病人营养状态尚可,但血清锌值降低,且与白蛋白呈现显著的相关性。尤其白蛋白低于35.0g/L时,血清锌值有55.2%患者小于7.0μmol/L。适量的补充锌,可改善肝硬化病人肌肉痉挛(占38例中的31.5%)、味觉迟钝(占38例中的56.3%)等症状,促进恢复肝性脑病变。     

肾上腺脑白质营养不良16例临床分析

目的 分析肾上腺脑白质营养不良（ALD）的临床特征.方法 对2003年1月-2012年12月收治的16例ALD患者的临床资料进行回顾性分析.结果 16例ALD患者均为男性,发病年龄2～12岁,缓慢起病,有阳性家族史4例,首发症状：反应迟钝、记忆力下降6例,视力下降2例,听力下降2例,步态不稳1例,皮肤发黑4例,抽搐1例.6例患者血、尿皮质醇下降,ACTH升高.3例患者血浆饱和极长链脂肪酸（VLCFA）不同程度增高.16例头颅MR显示双侧脑室三角区周围白质对称分布的蝶形病灶.VEP异常2例,BAEP异常1例.脑电图检查11例,背景活动出现慢波7例.结论 ALD临床特点为进行性智力及肢体肌力下降,视力及听力降低,特征性的头颅影像学改变,肾上腺皮质功能减低及血浆VLCFA水平增高.     

neuB1失活空肠弯曲菌突变株灭活全菌苗经鼻免疫小鼠的实验研究

[目的]探讨neuB1失活空肠弯曲菌0:19突变株灭活全菌苗的免疫原性及其对抗野生株攻击的免疫保护性.[方法]以neuB1失活空肠弯曲菌0:19突变株灭活菌体,经鼻途径以不同剂量免疫Balb/C小鼠,ELISA法检测小鼠肠腔灌洗液和血液中的抗体滴度;并以5×109 cfu野生株进行攻击,计算疾病指数.[结果]免疫后7 d肠腔灌洗液中的抗CJ特异性slgA和21 d血清中特异性IgG及IgA滴度均显著增高;免疫组的疾病指数分别由0.90降至0.30～0.34,保护率为62%～67%.[结论]neuB1失活CJ 0:19突变株灭活全菌苗经鼻免疫,能诱导动物产生有效的体液免疫应答,具有显著的免疫原性;能有效保护免疫小鼠免受野生株的攻击,基于该突变株良好的免疫活性且无分子模拟所致的神经毒性,有望成为理想的全菌候选疫苗.     

neuB1基因失活空肠弯曲菌突变株的构建及其临床意义

目的构建唾液酸合成酶基因1（neuBl）失活、脂多糖（LPS）中唾液酸（SA）缺失的空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni，Cj）O：19突变株，以确认Cj LPS中，含SA基团的终端GM1样结构在Cj相关格林．巴利综合征（GBS）发病机理中的关键作用。方法从已有neuB1基因失活的Cj肠炎相关菌株O：2 DNA中，将含卡那霉素抗性基因（Km^R cassette）的neuB1突变片段——neuB1：：Km^R克隆到pGEM-T载体，形成突变载体pGEM-neuB1：：Km^R，进一步转化到与GBS相关的Cj O：19野生株，获得Cj O：19突变株，行PCR和RT-PCR鉴定。SDS-PAGE分析Cj LPS，过碘酸-间苯二酚和酸性茚三酮反应法分别检测Cj LPS中SA。霍乱毒素B亚单位（CTB）结合反应检测Cj菌体裂解物及LPS中神经节苷脂GM1模拟结构。最后以突变株及其同源野生株LPS为抗原分别免疫豚鼠，第5周取坐骨神经原纤维分离。结果neuB1基因突变片段——neuB1：：Km^R成功克隆到pGEM-T载体中，进而构建得neuB1基因失活的Cj突变株。后者LPS已丧失SA基团且不能与CTB结合，表明其菌体裂解物和LPS中已不存在GM1模拟结构。野生株LPS免疫组中，17．3％的坐骨神经原纤维发生免疫性损伤，明显高于PBS对照组（1．6％）和突变株LPS免疫组（2．4％）；而突变株LPS免疫组与PBS对照组间差异无统计学意义。结论成功构建neuB1基因失活的Cj O：19突变株，其LPS已缺失野生株所具有的SA基团及与GM1的分子模拟特性，且不能再诱导活体动物的周围神经免疫性损伤，有力证实了关于Cj LPS诱发GBS的分子模拟推论，SA是该交叉免疫反应中抗原的重要成分。