中缅边境恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1,2基因多态性研究

目的对云南省及边境地区恶性疟原虫的裂殖子表面蛋白(merozoite surface protein,MSP)1,2基因进行分型研究,确定其等位基因的类型和分布特征,结合当地的恶性疟原虫株流行病学信息,为该地区疟疾的防治提供科学依据。方法从缅甸拉咱、那威和我国云南省西双版纳勐腊、德宏瑞丽、保山腾冲采集恶性疟患者血样。用巢式PCR(nest-PCR)扩增18S rRNA基因,确定感染疟原虫的种类。对检测为恶性疟原虫以及恶性疟原虫/间日疟原虫混合感染的样本,进行恶性疟原虫MSP-1、MSP-2基因的扩增并作测序、验证与序列分析。结果共采集89份恶性疟样本,经18S rRNA基因检测,确定间日疟9例,恶性疟78例和混合感染2例。在检测为恶性疟和混合感染的80份样本中,69例扩增出MSP-1基因片段,77例扩增出MSP-2基因片段。在MSP-1等位基因中,以MAD20型68.75%为主,RO33型23.75%和K1型20.00%次之。来源于勐腊的样本均未检出RO33型和K1型;MSP-2等位基因FC27型和3D7型的感染率均为91.25%,无明显的优势虫株;MSP-1和MSP-2基因多克隆样本所占百分比与多重性感染(multiplicity of infection,MOI)分别为22.50%、1.81和86.25%、3.51。MSP-1和MSP-2等位基因目的片段多样性与其原虫密度之间存在相关性(Spearman's r=0.496,P0.05;Spearman's r=0.240,P0.05)。MSP-1和MSP-2等位基因测序结果表明,在FC27型基因序列3′端发现1个新的APK序列,在3D7基因型序列中检测到1个新的PAT重复序列和其它19个新的序列。结论云南省及边境地区恶性疟原虫分离株MSP-1等位基因存在MAD20型、K1型和RO33型3种类型,以MAD20型为优势虫株,勐腊样本未发现K1型和RO33型;MSP-2等位基因存在FC27型和3D7型2种类型,其优势均不明显。     

基于WHO-NEQAS疟疾样本不同诊断方法的效果评价

目的 针对WHO-NEQAS提供的20份已知疟原虫血样在不同实验室应用不同PCR诊断方法的检测准确率数据进行统计分析和比较,并运用巢氏PCR对上述样本进行检测准确率的效果评价。方法 采用配对T检验的统计学方法比较不同实验室对已知性质和数量的疟原虫样本,在巢氏PCR、多重PCR和荧光定量PCR 3种方法检测准确率之间的差异性;运用巢氏PCR对20份样本进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。结果 在不考虑疟原虫种类时,巢氏PCR和多重PCR相对于荧光定量PCR的检测准确率较高且均存在显著差异(P=0.003 3,P=0.045 6);在原虫密度小于10³虫/ml血时,巢氏PCR和多重PCR相较于荧光定量PCR在检测准确率上均存在显著差异(P=0.001 4,P=0.012 5);在原虫密度为10⁴～10⁵虫/ml血以及大于10⁶虫/ml血时,3种方法之间并无显著差异(P>0.05)。结论 巢氏PCR用于鉴别部分疟原虫种诊断,特别是在原虫密度较低时,仍具有较高的检测准确率和灵敏度,结果更为可靠。     

疟原虫溯源技术研究进展

自我国印发消除疟疾行动计划以来,对疟原虫溯源技术的需求日益迫切,该技术同样可以应用于药物抗性虫株起源的追溯及传播路径的监测,因此,选择简单、特异性的分子标记物用于疟原虫的溯源显得尤为重要。本文从疟原虫染色体的单核苷酸多态性、疟原虫微卫星片段长度多态性、疟原虫线粒体及顶质体的单核苷酸多态性等三方面对近年来应用于疟原虫溯源的方法及选择的分子标记进行综述。     

西非及柬埔寨西部地区恶性疟原虫基因组拷贝数变异研究

目的 对非洲地区（马里）及柬埔寨西部（菩萨和拜林）地区恶性疟原虫基因组的拷贝数变异情况进行初步研究。方法 从疟原虫基因组数据库下载西非及柬埔寨西部地区20个恶性疟原虫样本的全基因组测序数据,预处理过滤后得到14个虫株样本测序数据纳入下一步研究（西非地区6个,柬埔寨西部地区8个）。用生物信息学软件检测拷贝数变异情况,并对发生拷贝数变异的基因进行功能注释和功能富集分析。结果 西非地区在14条染色体上共检测到112个拷贝数变异区域,包含230个基因;柬埔寨西部地区在14条染色体上共检测到111个拷贝数变异区域,包含179个基因。GO富集分析显示,西非地区拷贝数变异基因主要与恶性疟原虫微管运动活性过程有关;柬埔寨西部地区主要与恶性疟原虫天冬氨酸肽链内切酶活性及细胞内小泡等相关。对于恶性疟原虫药物抗性相关基因,在西非地区检测到pfmrp-1及pfmrp-2发生了拷贝数增加,柬埔寨西部地区检测到pfmdr-1、pfmrp-1、plasmepsin-2、 plasmepsin-发生拷贝数增加。结论 西非及柬埔寨西部地区恶性疟原虫基因组内存在较多拷贝数变异,且发生拷贝数变异的大部分基因与微管运动活性过程、天冬氨酸肽链内切酶活性及细胞内小泡相关。     

不同剂量等比重氯普鲁卡因腰麻行剖宫产的临床分析

目的探讨不同剂量等比重氯普鲁卡因用于剖宫产腰麻的效果与安全性。方法将150例行剖宫产的产妇随机分为A、B、C 3组,每组50例,分别向蛛网膜下腔注入1.25%的等比重氯普鲁卡因(由2.5%的氯普鲁卡因加等量的自身脑脊液配置而成)20、25、30mg。观察并记录麻醉起效时间、最高阻滞平面及时间、切口疼痛时间、麻醉效果,记录麻醉前和麻醉后1、3、5min、切皮时、胎儿娩出后的SBP、DBP、HR、SPO2。结果 3组麻醉起效时间、麻醉效果差异无统计学意义;A组最高阻滞平面低于B、C组(P<0.05),达到最高阻滞平面时间要慢于B、C组(P<0.05):麻醉后3、7min时,B、C组SBP、DBP下降程度大于A组,伴有HR的增快(P<0.05);麻醉后低血压、恶心、呕吐发生率B、C组明显高于A组(P<0.05)。结论 3种剂量的等比重氯普鲁卡因用于剖宫产腰麻均可产生满意的麻醉效果,但20mg组对血流动力学影响最小,临床应用最为合适。     

基于逆转录-酶促重组等温扩增原理的西尼罗病毒基因检测方法的建立

目的 建立一种可用于检测西尼罗病毒特异性基因片段的逆转录-酶促重组等温扩增(RT-ERA)方法。方法 以西尼罗病毒NS5基因的高度保守序列作为靶序列，根据ERA反应原理设计、合成引物及荧光探针，建立荧光RT-ERA反应体系。分别以不同拷贝数(10~4、10~3、10~2、10、1拷贝/μl)的含120 bp靶基因片段的重组质粒及不同浓度(10、1、10^-1、10^-2、10^-3 ng/μl)西尼罗病毒RNA为模板进行荧光RT-ERA法扩增，评价该方法的敏感度；分别以森林脑炎病毒、基孔肯雅病毒、Ⅰ型登革病毒、西尼罗病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒和甲型流感病毒H2N1的RNA为模板进行荧光RT-ERA法检测，评价该方法的特异性。结果 建立的荧光RT-ERA法可在39℃、20 min内特异性扩增西尼罗病毒RNA。敏感度检测结果显示，以重组质粒为模板，荧光RT-ERA法最低可检出的质粒拷贝数为1拷贝/μl；以RNA为模板，荧光RT-ERA法最低可检测浓度为10^-3 ng/μl。特异性检测结果显示，以森林脑炎病毒...     

混合式教学在医学寄生虫学实验课教学中的效果评价

混合式教学是一种结合传统教学与网络化教学优势的新型教学模式,既能充分发挥教师的主导作用,又能体现学生作为学习过程主体的主动性、积极性与创造性.为提高医学寄生虫学课程的教学质量,在实验课中尝试采用混合式教学的方法,包括合理的教学设计、线上教学及课堂教学,并进行了问卷调查对教学效果进行评价.结果显示,与传统的教学方式相比,...     

转基因技术在疟原虫药物抗性机制研究中的应用

疟疾是世界上危害人类健康最严重的感染性疾病之一.随着抗疟药物的广泛使用,疟原虫抗药性问题日趋严重.开展疟原虫药物抗性机制的研究,有助于开发新的药物以及制定用药策略.采用疟原虫转基因的方法能够从分子水平证实抗性基因与药物敏感的相关性以及基因突变在药物抗性产生中所起的作用.该文综述了疟原虫转基因技术在氯喹和磺胺多辛-乙胺嘧啶药物抗性机制研究中的应用.     

塔黄的化学成分研究

目的对塔黄的化学成分进行研究。方法通过各种柱色谱对其成分进行分离纯化,通过波谱解析进行结构鉴定。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为:大黄素(1),大黄酚(2),大黄素甲醚(3),1,8-二羟基-2,3-甲氧基-6-甲基蒽醌(4),大黄酚葡萄糖苷(5),大黄素葡萄糖苷(6),β-谷甾醇(7),胡萝卜素(8)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

和植物说话

居住在都市里的人,大都要在阳台养几盆花的。可是除了观赏和净化空气之外,很少有人会和植物说话。常言道:“人非草木,孰能无情。”为了张显人性,只好说草木是无情的了。借用庄子的模式推断:你不是草木,又怎知草木的心情?