登革病毒悬液芯片分型检测方法的建立

目的 建立一种基于悬液芯片的登革病毒(dengue virus,DV)检测方法,可对四种血清型登革病毒进行快速检测和鉴定.方法 依据GenBank上4种病毒的基因序列信息,设计并合成相关引物及探针序列.抽提病毒RNA,经反转录后对目的基因进行PCR扩增,产物与核酸探针微球组杂交后于Bio-PlexTM 200系统检测荧光信号值.结果 DV1的悬液芯片检测敏感性约9 DNA拷贝,DV2、DV3、DV4的悬液芯片检测敏感性约90 DNA拷贝.进而将本方法用于检测15份临床标本,其检测结果与分型荧光RT-PCR一致.结论 建立了可同时检测四种血清型登革病毒的悬液芯片检测方法,为快速筛查和鉴定登革病毒提供了新的手段.     

五种常用轮状病毒检测方法的评价及应用策略

目的比较胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量-反转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)5种常用的轮状病毒检测方法的准确性。方法取A组轮状病毒阳性标本,经1×101~1×10810倍系列稀释,采用上述5种方法平行检测,比较检测限;选择分别含有以下9种病原体且轮状病毒证实为阴性的粪便标本作为阴性对照:脊髓灰质炎病毒疫苗株Ⅰ~Ⅲ型、肠道病毒EV71、柯萨奇病毒A16、ECHO病毒6、诺如病毒Ⅰ型、诺如病毒Ⅱ型和星状病毒,采用上述5种方法平行检测,比较特异性;采用上述方法,分别对184例婴幼儿腹泻粪便标本进行检测,以PAGE检测结果作为参考标准,比较其余4种方法的灵敏度和特异性。结果上述5种方法检测A组轮状病毒的检测限相差5个数量级,分别为:real-time RT-PCR法10-6稀释度,胶体金法10-3稀释度,ELISA和PAGE方法均为10-2稀释度,RT-PCR法10-1稀释度;5种方法对9种对照病原体均无交叉反应;以PAGE方法检测结果作为标准,real-time RT-PCR、ELISA、胶体金和RT-PCR灵敏度分别为95.45%、96.97%、93.94%和62.12%,特异性分别为82.2%、86.44%、82.20%和94.07%。结论 PAGE作为检测轮状病毒的经典方法,具有高特异性,可用于确认实验;real-time RT-PCR方法检测A组轮状病毒的灵敏度优于其他4种方法,可用于轮状病毒的高通量检测;ELISA和胶体金方法具有良好的灵敏度与特异性,且胶体金方法成本低,可用于初筛检测;行业标准推荐的RT-PCR方法特异性较高,但灵敏度较低,有待改进。     

结核杆菌重组Rv3425蛋白的结核病血清学诊断价值的评价

[目的]评价结核分支杆菌重组Rv3425蛋白在结核病血清学诊断中的价值。[方法]以重组Rv3425作为抗原，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测151份确诊结核病人、143份健康人、38份卡介苗接种阳转者和42份非结核病人血清中的抗结核抗体水平，并与结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）、Ag85B蛋白及TB—DOT、TB-CHECK-1试剂盒的检测结果进行比较，以此来评价重组Rv3425蛋白在结核病诊断上的价值。[结果]Rv3425与PPD和Ag85B抗原一样能够诊断结核病人，但PPD不能有效区分结核病人和BCG接种者，Rv3425和Ag85B蛋白可以明确区分。[结论]虽然重组Rv3425蛋白对结核病的阳性率尚不能与试剂盒媲美，但由于其能够有效区分结核病人和BCG阳转者，在结核病诊断方面具有很大的应用价值，可以作为结核病诊断的备选抗原之一。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

7种结核分枝杆菌重组蛋白的纯化及血清学特性

目的分离纯化结核分枝杆菌重组蛋白38-kDa、16-kDa、Mtb81、ESAT-6、CFP10、Rv3425、Rv3391,并比较7种蛋白的免疫学特性,评价其在结核血清学诊断中的应用价值。方法利用间接酶联免疫吸附试验评价确诊结核病人、非结核病人、健康人血清中7种重组蛋白的抗原性。结果成功分离纯化了7种重组蛋白;酶联免疫吸附试验结果表明,7种抗原均能有效区分确诊结核病人、非结核病人和健康人,其中阳性率最高的是ESAT-6为47.3%,特异性最高的是Rv3391为98.3%。联合抗原中阳性率和特异性最高的是CFP10+ESAT-6+Rv3391抗原组合。结论单一抗原中ESAT-6具有较高的免疫原性,联合抗原中CFP10+ESAT-6+Rv3391抗原具有很高的阳性率和特异性,在结核诊断具有很高的诊断潜力。     

免疫学方法诊断结核病的研究进展

结核病是当今世界由单一致病菌引起的病死率最高的疾病.我国有130万人感染结核,其中有约11.2万人为耐多药,仅次于印度的患病和耐多药人数[1].目前临床上对结核病的诊断主要以接触史、症状体征、结核菌素皮试、影像学、分泌物培养、抗酸染色等作为临床确诊或排除的标准,存在漏检率高、与其他疾病难于区分等问题.因此,利用可靠、快捷、简便的免疫学检测方法来加强结核病的诊断和防控,已经成为共识.本文就临床上常用的结核免疫检测试剂的原理、应用效果和研究进展进行了比较和阐述,并对免疫学检测的影响因素进行分析.     

河北省2009至2014年出入境人员传染性肺结核检出情况及流行病学分析

目的：分析河北省2009至2014年出入境人员传染性肺结核检出情况及流行病学资料，为早期发现肺结核患者及肺结核的监测防控提供参考依据。方法对2009年1月至2014年12月在河北国际旅行卫生保健中心体检的110573名出入境人员进行结核病筛查，所有人员均进行 X 线胸片检查；若胸片所见疑似结核或有疑似结核的体征和症状的，转交地方传染病防治医院进行确诊。然后以检出率为指标，按照职业类别、年龄构成进行流行病学分析。结果河北省出入境人员传染性肺结核监测整体数量相对较为稳定，传染病检出率存在一定波动。结论目前河北省出境人员传染性肺结核监测工作应以出国劳务、留学人员及海员为主，入境人员以非洲来源地为主，重点监测年龄段应为21~50岁青壮年人群。     

国际旅行卫生保健中心引入ISO/IEC17020和ISO/IEC17025质量管理体系运行关键点分析

目的探讨国际标准ISO/IEC17020和ISO/IEC17025管理体系在国际旅行卫生保健中心应用的适宜性、必要性以及运行的关键点。方法比较分析ISO/IEC17020和ISO/IEC17025管理体系条款的异同。结果两个体系既协调统一,相互关联,又各有侧重,相互补充。结论ISO/IEC17020和ISO/IEC17025管理体系同时运行,确保国际旅行卫生保健中心的各个工作环节都处于受控状态,有力促进了管理的科学化、正规化。     

结核分枝杆菌重组蛋白和融合蛋白血清学特性比较

目的：比较结核分枝杆菌重组蛋白38 KD、16 KD、EAST6、CFP10和融合蛋白 CFP10-EAST6、38KD-16KD、CFP10-EAST6-38 KD、CFP10-EAST6-16 kD 在结核病血清学诊断中的应用价值。方法利用间接酶联免疫附试验评价确诊结核患者、非结核患者、健康人血清中这4种重组蛋白和4种融合蛋白的抗原性。结果酶联免疫吸附试验结果表明,在确诊结核患者中重组蛋白阳性率最高的是 EAST6为47.3％,特异性最高的是 CFP10和38KD 均为96.6％。融合抗原中阳性率和特异性最高的是 CFP10-EAST6-38 kD 抗原。结论融合抗原 CFP10-EAST6-38 kD 具有很高的阳性率和特异性,可以作为结核病血清学诊断的备选抗原之一。     

有晶状体眼后房型人工晶状体植入术后拱高的预测研究

目的:探讨影响有晶状体眼后房型人工晶状体植入术后1个月拱高的因素,建立并验证预测拱高公式。方法:（1）回顾性系列病例研究,纳入2019年8月1日至12月30日于苏州大学附属理想眼科医院行有晶状体眼后房型人工晶状体植入术83例（83只眼）患者,年龄（27±5）岁。所有患者术前行完整术前检查,包括眼轴长度、前房深度、综合验...