非霍奇金淋巴瘤病人外周血T细胞TCR Vβ谱系的选择性利用和克隆性增殖分析

为了解B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B－NHL）和T细胞性非霍奇金淋巴瘤（T－NHL）病人TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性的情况，利用RT－PCR分别扩增4例B－NHL和2例T－NHL病人外周血单个核细胞的TCR Vβ24个亚家族基因的CDR3，了解病人各Vβ亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度，以了解T细胞克隆性。结果显示，6例NHL病人外周血T细胞仅选择性表达6－12个Vβ亚家族，全部病人均选择了表达Vβ，Vβ8，Vβ13和Vβ19，5例病人表达Vβ2和Vβ16，而全部病人均未能检测到Vβ4－6，Vβ10－12，Vβ15，Vβ17－18，Vβ20，Vβ22－23。基因扫描发现2例B－NHL和1例T－NHL病人的1－3个Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖。结论提示，B－NHL和T－NHL病人外周血T细胞具有相似的Vβ亚家族选择性利用的特点，部分病人存在与肿瘤细胞抗原相关的克隆性增殖的T细胞。     

T细胞中TCR Vα40与TCR Dδ3,Jδ1和ψJα重排的特点

利用巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞、4例分选的外周血CD3^ 细胞和7例心胸外科手术的非免疫性疾病和非肿瘤病人的正常胸腺细胞DNA的TCR Vα40基因与Jδ1，Dδ3和ψJα重排的情况，从对不同含量DNA的PCR分析，了解其重排分布频率。结果显示，TCR Vα40分别与Jδ1，Dδ3和ψJα重排均可见于多6数外周血T细胞和胸腺细胞中，对不同含量DNA的PCR分析显示TCR Vα40重排的分布频率在外周血和胸腺细胞有所不同。研究结果提示，TCR Vα40-ψJα的重排最常见于成熟和未成熟T细胞中，而TCR Vα40-Dδ3则在未成熟T细胞中发生频率更高。     

轻链型Lambda阳性淋巴浆细胞样淋巴瘤1例

患者,男,53岁,因反复胸痛5个月,加重10 d于2015年4月18日入院.患者5个月前无明显诱因出现活动后胸痛,休息5 min可缓解.近10 d休息时亦觉胸痛,拟急性冠脉综合征收入心血管科.入院后全血细胞减少,肝脾肿大,右侧腹股沟淋巴结肿大,遂转入血液科.既往高血压病、2型糖尿病病史10余年,规律服用药物,血压、血糖控制可.体格检查:体温36.5℃,脉搏110次/min,呼吸20次/min,血压124/79 mmHg;全身皮肤、黏膜苍白,中度贫血貌,下颌及右侧腹股沟触及多个肿大的淋巴结,最大约2 cm×1.5 cm.腹饱满,腹软,肝肋下4 cm,脾肋下4 cm.双下肢轻度水肿.辅助检查,血常规:血红蛋白 69.00 g/L、血小板计数 53.00×109·L-1、网织红细胞计数百分比1.95%;白细胞计数2.42×109·L-1;β2-MG 4.30 mg/L;免疫球蛋白:κ-轻链0.656 g/L、λ-轻链0.896 g/L、κ/λ 0.732;IgA 0.50 g/L、IgG 2.82 g/L、IgM 0.15 g/L;血免疫固定电泳λ-轻链(+);尿免疫固定电泳阳性;尿本周蛋白:阳性.余项无异常.腹部B超:胰头旁低回声光团,考虑肿大淋巴结.     

AMLM2a型细胞诱导自体及异体优势增殖TCR Vβ亚家族T细胞的研究

目的：研究急性髓细胞性白血病M2a亚型（AML-M2a）患者外周血白血病细胞反应性T细胞受体V区β链(TCR Vβ)亚家族T细胞体内外优势表达情况及其体外细胞毒性分析。方法：采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养法(MLTC)将AML-M2a细胞与自体或正常人外周血T细胞体外混合培养和扩增,用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)分析MLTC前后患者和正常人T细胞TCR 24个Vβ亚家族的表达情况,同时用四甲基偶氮唑盐(MTT)法对其进行细胞毒性分析。结果：AML-M2a患者和正常人T细胞在MLTC培养后均出现了TCR Vβ亚家族优势表达情况,与淋巴因子激活杀伤细胞(LAK细胞)相比具较高特异性的细胞毒性(P<0.01)。结论：AML-M2a细胞可以诱导自体与异体特异性细胞毒性T细胞(CTL),且其主要为一些优势的TCR Vβ亚家族T细胞。     

T—ALL中两种新的TCRδ基因重排δRec151051—Jδ1和δRec151298—Jδ1

目的 分析T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞中TCRδ基因新的重排形式及其在正常人外周血和胸腺细胞中的分布情况。方法 利用半巢式PCR扩增2例T-ALL、10例正常人外周血和7例正常人胸腺细胞DNA的TCRδ基因组片段,了解其重排情况,克隆性PCR产物进一步进行苷酸序列分析确定重排位置,并进一步经PT-PCR检测其重排基因的表达情况。结果 在2例T-ALL病人白血病细胞发现两种新的TCR δRec-Jδ1基因重排方式,称为δRec151051-Jδ1和δRec151298^-Jδ1,该新的TCR δRec基因重排同时见于大多数正常人外周血和胸腺。RT-PCR显示该两种TCR δRec-Jδ1基因重排的产物可见于2例T-ALL中,而正常人为阴性。结论 本研究发现两种新的TCR δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1 基因重排。该重排基因表达于T-ALL中,而正常人不表达该重排基因,提示该重排形式可能与T细胞白血病的形成有一定的关系。     

几种免疫抑制剂联合方案治疗重型再生障碍性贫血的疗效比较

重型再生障碍性贫血(ＳＡＡ)进展迅速,预后凶险,免疫功能紊乱在其发病机制中起重要作用[1]。近年发现联合运用免疫抑制剂(ＩＳ)可提高疗效,但组合方案及疗效报道不一[2,3]。我科以含抗胸腺细胞球蛋自(ＡＴＧ)、环胞霉素(ＣｓＡ)及大剂量甲基强的松龙(ＨＤＭＰ)方案,并用大剂量免疫球蛋白(ＨＤＩＶＩｇＧ)或重组人粒细胞集落刺激因子(ＧＣＳＦ)联合康力龙或达那唑治疗,比较不同联合方案的合理应用。现将结果报道如下。对象与方法1.对象:1995年12月～2000年1月住院的14例初诊患者,重型再生障碍性贫血Ⅰ型(ｓＡＡⅠ)5例,重型再生障碍性贫血Ⅱ型…     

造血干细胞移植后检出人类多瘤病毒尿的临床分析

 目的 研究造血干细胞移植后潜伏于体内的人类多瘤病毒（HuPV）-BK病毒（BKV）和JC病毒（JCV）的激活情况。方法 连续采集41例患者造血干细胞移植前后及10例正常对照的尿样本，用实时定量PCR检测病毒，半巢式PCR鉴定BKV和JCV病毒株。结果 造血干细胞移植后病毒尿阳性的患者共33例（80％），其中出现BKV尿者15人（45％）、JCV尿者3人（9％），在相同或不同时段尿样本中检出两株病毒者11人（33％），另外4人（12％）未能鉴定出病毒株；比较24例病人移植前、后病毒尿发生率，分别为19％、77％，存在显著性差异（P〈0．0001）；正常对照组没有检测到病毒（P〈0．0001）。结论 造血干细胞移植后HuPV病毒尿的发生率明显升高，但影响因素仍不明确，可能是多因素综合作用的结果，其临床意义还有待进一步探讨。     

造血干细胞移植后出血性膀胱炎患者尿中检出人类多瘤病毒

目的检测造血干细胞移植后并发迟发性出血性膀胱炎患者尿中的人类多瘤病毒-＋BK病毒和JC病毒。方法收集造血干细胞移植后并发出血性膀胱炎患者的中段尿，运用实时定量PCR及半巢式PCR分别定量检测及定性鉴别人类多瘤病毒。结果3例造血干细胞移植后的患者，分别于第21，34，41天发生了迟发性出血性膀胱炎并各维持41，8，18d，尿中均能检测到较高浓度的BK病毒，未发现JC病毒，病毒尿维持时间大于50d。结论在造血干细胞移植的患者中，被激活的人类多瘤病毒可能参与迟发性出血性膀胱炎的发病过程。     

急性髓系白血病患儿对称性溶骨病变1例

患者,男,9岁,因外周血造血干细胞移植后18个月呼吸困难于2011年10月2日入院。该患者起初因双髋关节疼痛伴发热3周于2009年10月12日首次入院。体格检查:T 37.1℃,HR75次/min,R 20次/min,BP 99/61 mm-Hg,发育正常,轻度贫血貌,皮肤黏膜未见出血点,浅表淋巴结未及,胸骨无压痛,肝肋下未及,脾肋下可及,关节无红肿畸形。血象:WBC 5.41×109.L-1,N 50.5%,L 27.2%,M 9%,Hb 105 g/L,Plt 29×109.L-1;骨髓穿刺干抽,外周血细胞形态学诊断为急性髓系白血病,FAB分型M5;腹部B超:脾脏肋下     

CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化

在我们前期研究发现慢性髓系白血病（CML）病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病个外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR Green I实时荧光定量RT—PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和（链的表达水平,以132微球蛋白基因（132MG）作为内参照,采用相对定量公式：2^-△Ct×100％,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明：CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2．344％,0．515％和3．516％（中位数）,与健康对照组比较（3．093％,0．853％和2．302％）并没有显著性差异（P=0．072,P=0．190,P=0．615）,而CML中CD3ζ链基因的表达水平（0．395％）则明显低于健康对照组（1．538％）（P〈0．001）。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε〉CD3γ〉CD3δ〉CD3ζ,而对照组中则为CD3γ〉CD3ε〉CD3δ〉CD36ζ结论：本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。