基因重组人源SOD对小鼠抗疲劳作用的实验研究

超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内超氧化物阴离子自由基的清除剂,能够增强机体内代谢废物的清除能力,从而消除疲劳.普通的SOD多由动植物中提取,但是由于其是非人源的,不可避免某些异源SOD的过敏反应,基因组人源SOD可以弥补这一缺点.     

骨髓间充质干细胞移植对豚鼠皮肤深Ⅱ度烧伤的治疗作用

目的探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)治疗皮肤深Ⅱ度烧伤的机制。方法体外培养扩增的MSCs悬液 ,以 2× 10 6/ml(A组 )和 2× 10 7/ml(B组 )两种细胞密度移植给皮肤深Ⅱ度烧的受体鼠创面 ,观察创面愈合速度 ,用免疫组织化学检测因子Ⅷ的表达。细胞移植后的第 15、3 0、5 0天 ,通过PCR方法检测创面皮肤组织中移植供体鼠的Y染色体基因表达。结果A、B组治疗侧的创面愈合速度均快于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。因子Ⅷ检测示第 15、3 0天时 ,A、B两组的微血管密度均多于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。PCR检测结果表明 ,第 15、3 0、5 0天时在部分受体鼠恢复的创面上有供体鼠Y染色体基因表达。结论骨髓MSCs对皮肤深Ⅱ度烧伤具有明显的疗效。     

锌对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨锌预处理对脊髓缺血再灌注损伤的预防作用,为锌预防脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：40只大鼠随机分为高锌组、低锌组、假手术组和模型组。锌处理组（高锌组,低锌组）每天腹腔注射硫酸锌（20和10 mg·kg^-1）1次,模型组和假手术组每天注射等量生理盐水1次,连续5 d。于第6天制备脊髓缺血再灌注损伤模型。缺血45 min再灌注24 h后进行神经功能评分以及HE和Fast blue 染色进行病理组织学观察。结果：模型组大鼠出现不同程度的下肢瘫痪。锌预处理组大鼠与模型组比较,后肢神经功能明显改善,神经功能评分比较显著增高（P<0.01）。病理组织学观察发现,模型组大鼠神经细胞固缩深染、形态异常,血管充血,并出现白质内髓鞘松散、脱失等病理改变;锌处理组大鼠病理组织学改变明显改善,细胞形态基本正常且高锌组优于低锌组。结论：一定剂量范围内的锌对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用。     

氯化镉对人癌细胞株的抑制作用及其对细胞增殖核抗原和金属硫蛋白表达的影响

目的:研究氯化镉(CdCl2)抗肿瘤作用及其对细胞增殖核抗原(PCNA)和金属硫蛋白(MT)表达的影响,为其作为抗肿瘤药的开发利用提供理论依据.方法:以1、5、10、50和100 μmol·L-1 CdCl2作用于5种人癌细胞株SMMC-7721、BEL-7402、Hela、A549和MCF7,24 h后应用MTT法检...     

人转化生长因子β3的构建

目的:获取人转化生长因子β₃的编码基因,开发抗衰老的皮肤药物。 方法：采用重叠PCR的方法,设计4对引物,进行4次PCR合成人转化生长因子β₃的编码基 因。 结果：4次PCR后,经2％的琼脂糖凝胶电泳可见一357 bp的条带,将电泳产物回收,连接入pMD-18T载体,经测序分析证实,所获得DNA片段为人转化生长因子β₃的编码基因。 结论：利用重叠PCR方法能够成功构建人转化生长因子β₃的编码基因。     

骨髓间充质干细胞对肾缺血再灌注损伤后肾功能及氧化应激水平的改善作用

目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）促肾缺血再灌注损伤修复的能力,为肾脏疾病治疗提供新的思路。 方法：健康3周龄C57BL/6J小鼠的骨髓细胞悬液进行BMSCs体外扩增培养。8周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、平行对照组和细胞移植组,每组16只小鼠。建立肾缺血-再灌注损伤模型,将BMSCs通过尾静脉注射到细胞移植组小鼠中,平行对照组注射生理盐水。检测肾功能指标血尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平变化、损伤肾组织自由基--羟自由基和超氧阴离子自由基变化和肾形态学变化。结果：①分离培养的BMSCs增殖旺盛,纯度较高,且均质性和稳定性好。②平行对照组小鼠整体状态差,肾功能指标、氧化应激指标明显升高,组织形态学出现肾小球崩解,肾小管结构消失,肾间质见大量炎性细胞浸润。而细胞移植组小鼠整体状态良好,肾功能指标和氧化应激指标得到明显改善（P<0.05）,组织形态学未出现明显病理性改变。结论：BMSCs在体外易分离培养,具有旺盛的增殖能力;移植BMSCs后,通过抑制氧自由基的生成来促进肾缺血-灌注损伤后小鼠的恢复。     

罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用及其机制

目的：探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤（AKI）小鼠肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用,并阐明其作用机制。方法：18只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+罗格列酮组,每组6只。LPS组和LPS+罗格列酮组小鼠均腹腔注射LPS (10 mg·kg-1);LPS+罗格列酮组小鼠在LPS注射前30 min尾静脉注射罗格列酮（0.5 mg·kg-1）;对照组小鼠注射与LPS组小鼠同体积的生理盐水。LPS注射24 h后处死小鼠,收集肾组织和血清。HE染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,分光光度法检测各组小鼠血清中肌酐（CRE）和血尿素氮（BUN）水平,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组小鼠肾组织中长链脂酰CoA合成酶4 (ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11 (SLC7A11)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1β (IL-1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α) mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾组织中GPX4、SLC7A11和ACSL4蛋白表达水平。结果：HE染色,与对照组比较,...     

MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响

目的观察MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响,探讨MSCs对辐射诱发肿瘤的预防和治疗作用。方法应用Kaplan经典方法制备C57BL/6幼年鼠胸腺瘤模型[1],经小鼠尾静脉输注同系鼠MSCs,6个月后取胸腺组织,将胸腺细胞制成单细胞,标记CD4、CD8、CD45,流式细胞术分析T细胞亚群。结果流式细胞术分析结果显示：照射后CD4-CD8-亚群比例由正常组的（5.11±5.10）%降低到（0.01±0.01）%（P〈0.05）,MSCs治疗（0.61±0.39）%后有所恢复;MSCs治疗组（91.49±4.47）%中CD4＋CD8＋亚群比例与正常组（82.44±6.06）%接近,单纯照射组（99.09±0.49）%显著高于正常组（P〈0.05）;照射后CD4＋CD8-亚群由（7.72±3.37）%下降到（0.87±0.49）%,CD4-CD8＋亚群由（4.74±2.59）%下降到（0.02±0.01）%,MSCs治疗后CD4＋CD8-和CD4-CD8＋都有不同程度上调。正常组、单纯照射组、MSCs治疗组中CD45＋在CD4＋CD8＋中的比例分别为（86.09±2.24）%、（0.16±0.03）%、（97.35±3.23）%,差异有统计学意义（P〈0.05）;单纯照射组CD4-CD8-、CD4-CD8＋和CD4＋CD8-中CD45＋均有不同程度的降低,MSCs治疗组有不同程度升高,且具有统计学意义（P〈0.05）。结论 MSCs可使辐射诱导胸腺瘤模型组小鼠胸腺中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例增高或恢复,提示MSCs具有防治辐射诱发胸腺瘤的作用,并对辐射造成的胸腺损伤具有修复作用。     

碲化镉量子点对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化潜能的影响

目的：探讨碲化镉量子点（CdTe QDs）对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖与成骨细胞分化潜能的影响,阐明CdTe QDs的体外毒性,并为CdTe QDs 作为BMSCs体外活细胞标记应用提供实验依据。 方法：荧光光谱法检测CdTe QDs 在DMEM/F-12培养液中的分散情况。大鼠原代培养BMSCs,经不同浓度CdTe QDs（0、0.195 3、0.390 6、0.781 3、1.562 5、3.125 0、6.250 0、12.500 0、25.000 0和50.000 0 nmol·L^-1）作用24 h后,MTT法检测CdTe QDs
对BMSCs增殖的影响。体外地塞米松、甘油磷酸钠和维生素C诱导BMSCs向成骨细胞分化茜素红染色显示钙结节。计算半数增殖抑制浓度（IP50）和成骨半数分化抑制浓度（ID50）。结果：荧光光谱法检测,CdTe QDs 在DMEM/F-12培养液中分散良好,未发生聚合。随着BMSCs暴露于CdTe QDs的时间延长,其细胞的生长逐渐减慢,暴露24、48和72 h的回归系数分别为－23.96,－29.61和－24.30（P<0.05）, IP50分别为7.25、1.63和0.67 nmol?L-1。随着CdTe QDs浓度的增加,BMSCs分化成的成骨细胞逐渐减少,暴露48 h的成骨分化回归系数为－56.15（P<0.05）, ID50为0.0412 nmol·L^-1,增殖分化抑制比（IP50/ ID50）= 39.56。结论：在一定浓度范围内（0.195 3、0.390 6、0.781 3、1.562 5、3.125 0、6.250 0、12.500 0、25.000 0和50.000 0 nmol?L-1）,CdTe QDs抑制BMSCs的增殖;在一定浓度范围内（0.012 2、0.024 4、0.048 8、0.097 6和0.195 3 nmol·L^-1,CdTe QDs抑制BMSCs向成骨细胞的分化。在使用CdTe QDs作为活细胞标记物时,需要考虑其对细胞增殖及分化的影响。     

啤酒花黄酮的纯化工艺及其工艺参数的优化

目的：通过乙醇浸提和大孔树脂吸附的方式对啤酒花黄酮进行分离纯化,并
根据黄酮的含量和收率优化工艺参数,建立适合规模化生产的啤酒花黄酮制备工艺。方法：在
乙醇浸提啤酒花黄酮的基础上,采用大孔树脂静态吸附和洗脱方法分离纯化啤酒花黄酮。
依据浸提效果、吸附率和洗脱率确定最佳工艺参数。结果：最佳工艺条件体积分数为40
%乙醇浸提,采用FL-3大孔树脂,以pH值为 4、20%乙醇条件下静态吸附,再以pH 值为7、60%乙醇溶液
洗脱。按此工艺制备的样品中黄酮的含量为70.6%,收率为70.2%。结论：乙醇浸提结合FL-3大
孔树脂静态吸附方法可分离纯化啤酒花黄酮;该工艺操作简便,样品处理量大,适合规模
化生产。
