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弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体构建及在Vero细胞中的表达 总被引:3,自引:1,他引:2
目的构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体,并在Vero细胞中表达。方法设计1对引物,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因,构建pVAXl—SAG2真核表达重组质粒。以限制性内切酶Kpn Ⅰ和EcoR Ⅰ进行双酶切、PCR鉴定,纯化后进行测序鉴定。脂质体介导法瞬时转染Vero细胞,同时以pVAX1为对照,48h后收集细胞,Western—blot鉴定。结果从弓形虫RH株DNA中扩增出了577bp的SAG2基因,构建了真核表达载体pVAX1—SAG2,在质脂体介导下转染Vero细胞,质粒DNA成功的转染到细胞中。通过Westen-blot分析,细胞裂解液样品有1条可被弓形虫免疫血清所识别的约17ku大小的条带,与预计大小一致。结论真核表达载体pVAX1—SAG2在Vero细胞中有一定表达,且有一定的活性。 相似文献
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目的 探讨冷极射频治疗肺癌的护理.方法 原发及转移性肺部恶性肿瘤46例,51个病灶实行CT引导下经皮穿刺冷极射频消融治疗术进行护理配合.结果 所有病例均顺利完成治疗,术中及术后咯血11例,气胸5例,术中疼痛8例,术后发热23例,均经处理后消失.结论 CORFA疗效确切,创伤小,并发症少,安全性高,积极配合与护理有助于增加患者的依从性、手术的顺利完成、及早发现并有效处理并发症. 相似文献
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目的 构建弓形虫表面抗原SAG2的DNA疫苗载体 ,并在Vero细胞中表达。 方法 设计 1对引物 ,从弓形虫RH株速殖子基因组DNA中扩增SAG2全长编码基因 ,构建 pVAX1 SAG2真核表达重组质粒。以限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行双酶切、PCR鉴定 ,纯化后进行测序鉴定。脂质体介导法瞬时转染Vero细胞 ,同时以 pVAX1为对照 ,48h后收集细胞 ,Western blot鉴定。 结果 从弓形虫RH株DNA中扩增出了 5 77bp的SAG2基因 ,构建了真核表达载体 pVAX1 SAG2 ,在质脂体介导下转染Vero细胞 ,质粒DNA成功的转染到细胞中。通过Westen blot分析 ,细胞裂解液样品有 1条可被弓形虫免疫血清所识别的约 17ku大小的条带 ,与预计大小一致。 结论 真核表达载体pVAX1 SAG2在Vero细胞中有一定表达 ,且有一定的活性。 相似文献
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建立良好而有效的静脉通道是抢救病人成功的关键之一,中心静脉置管具有方便、快捷、创伤小及输液快等特点,可通过导管监测CVP,及时了解液体平衡及心功能状态,是危急重症抢救过程中实用而可靠的治疗及监测手段.随着中心静脉穿刺技术的逐步成熟,使用范围也愈来越广泛. 相似文献
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