胸腺肽α1对脓毒症小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞的干预效应

严重脓毒症和脓毒症休克,是危重患者最主要的死因[1],同时抗菌素滥用导致的负面影响日益严重[2-3].近年来发现免疫紊乱是脓毒症发病的重要机制,但对免疫调节治疗却充满争议[4].胸腺肽α1(thymosin-α1,Tα1)具有强大的免疫调节活性[5],已越来越多地应用于危重患者[6];调节性T细胞(以下简称Treg)与脓毒症免疫紊乱密切相关,其中最具代表性的是CD4+CD25+Foxp3+T细胞[7-8].     

铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(PA-MSHA)对脓毒症致急性肺损伤的影响及可能机制。方法以盲肠结扎穿孔法(CLP)复制大鼠脓毒症模型。按随机数字法将120只健康SD大鼠分为假手术对照组(SC组)、脓毒症组(CLP组)、术前治疗组(Pre T组)和术后治疗组(Pos T组),每组各30只。于制模后12、24、36 h分别采集外周血测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10及转化生长因子β(TGF-β)浓度并计算肺损伤病理评分。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)m RNA表达,并作肺组织TLR4 m RNA表达与病理学评分的Pearson相关性分析。结果 SC组各时间点血清细胞因子浓度无明显变化(F=0.04、0.09、1.25、1.77,P均0.05)。与CLP组和Pos T组相比,各时间点Pre T组的血清TNF-α、IL-6浓度明显较低,而IL-10、TGF-β浓度明显较高(P均0.05),而Pos T组仅在术后36 h的IL-10高于CLP组(P0.05)。四组大鼠间的肺组织TLR4 m RNA表达水平及四组间各时间点肺组织病理学评分比较,差异均有统计学意义(F=66.01、20.03、71.21、69.02,P均0.05),SC组及Pre T组明显优于CLP组和Pos T组(P均0.05)。同时,肺组织TLR4 m RNA表达与病理学评分存在明显的相关性(r=0.732,P0.05)。结论术前给予PA-MSHA可减轻脓毒症大鼠肺病理损伤,其机制可能与调节外周血单核细胞TLR4表达水平、调控细胞因子平衡、减轻炎症级联放大效应有关。     

急诊科1361例高血压急症临床分析

目的探讨高血压急症患者并发靶器官损害特点及其与预后的关系。方法回顾性分析1361例高血压急症患者临床资料,根据患者年龄分为老年组（年龄≥60岁）、中年组（40≤年龄〈60岁）及青年组（〈40岁）三组,分别对不同性别、年龄分组时靶器官损害的构成比及病死率进行统计分析。结果高血压急症患者占同期入院的高血压患者比例为13.31%,占同期急诊内科抢救患者总数的7.14%。高血压急症发生率最高的是中年高血压患者为16.12%（367/2276）,明显高于老年高血压患者（12.81%,932/7278）及青年高血压患者（9.28%,62/668）,三组间高血压急症发生率的差异均有统计学意义（χ2=26.62,P〈0.01）。各年龄组患者并发靶器官损害的构成比有显著差别,中、青年组颅内出血、主动脉夹层的构成比显著高于老年组（P均〈0.01）,而老年组在急性左心衰、不稳定型心绞痛构成比显著高于中、青年组（P〈0.01）。高血压急症患者并发靶器官损害中,发生率居前两位的分别是颅内出血（30.05%）和急性左心衰（25.94%）,其次是单纯性血压超高（12.93%）和不稳定型心绞痛（12.86%）。高血压急症患者中男女发病比例为1：1.01,但不同性别高血压急症靶器官损害因素的构成不同（χ2=41.08,P〈0.01）,男性患者合并颅内出血、急性心肌梗死的比率显著高于女性,而女性患者合并高血压脑病、急性左心衰、不稳定型心绞痛的比率显著高于男性（P均〈0.01）。高血压急诊患者合并颅内出血是高血压急症最主要的死亡原因。结论不同年龄层次、性别的高血压急症患者合并靶器官损害的特点不同,保护重要脏器功能仍是高血压急症治疗的核心部分。     

贝科能对心肺复苏后大鼠心肌低氧诱导因子-1_α表达的影响

目的 研究贝科能(复合辅酶)对心肺复苏后大鼠心肌细胞低氧诱导因子1_α(hypoxia-inducible factor 1_α,HIF-1_α)蛋白表达影响及其对心脏损伤的保护作用.方法 实验在第二军医大学附属长征医院急救科实验室完成.SD大鼠72只,随机(随机数字法)分为3组:空白对照组、常规复苏组(包括0.5,2,4,6 h组)和贝科能治疗组(0.5,2,4,6 h组).采用窒息合并冰氯化钾(0.5 mol/L)停跳液致大鼠心跳骤停5 min后开始心肺复苏的动物模型,贝科能治疗组于心跳恢复时给予贝科能(按1支/10 kg)生理盐水稀释至0.3 mL后腹腔注入.采用Western blotting法测定各组大鼠心肌细胞低氧诱导因子1_α蛋白的表达;采用比色法测定心肌丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、Na~+-K~+-ATP酶活力.所得数据以均数±标准差(~(-)x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用q检验.结果 与对照组相比,常规复苏组各时间点HIF-1_α蛋白的表达均有增强(P＜0.05),2 h最高(空白对照组0.15±0.02,常规复苏组组0.57±0.06),MDA含量显著升高(P＜0.05),而SOD及Na~+-K~+-ATPase活力显著降低(P＜0.05).与常规复苏组相比,贝科能组各时间点心肌细胞HIF-1_α蛋白表达均减少(P＜0.05),其中2 h组差异最为显著[贝科能组(0.29±0.03),常规复苏组(0.57±0.06)];心肌MDA含量明显降低(P＜0.05),SOD及Na~+-K~+-ATP酶活力明显升高(P＜0.05).结论 HIF-1_α蛋白在心肺复苏后大鼠心肌细胞的表达增强;贝科能在提高Na~+-K~+-ATP酶活性的同时,下调HIF-1_α蛋白在心肌细胞的表达.贝科能可能是通过减轻缺血-再灌注损伤,对CPR后大鼠心肌细胞起到保护作用的.     

新型冠状病毒肺炎疫情时期急诊科临床教学的思考与实践

针对新冠病毒肺炎疫情防控的需要,当前开展急诊科临床教学时,有必要充分认识线上教学的重要性,采用“线上+线下”混合式教学的方式,调整急诊临床教学内容,探索新的教学方法,充分发挥5G技术,加强理论知识与临床技能学习,不断提高人文关怀素养。笔者介绍了特殊时期海军军医大学第二附属医院急诊医学教学实践,以期为疫情防控时期的临床教学方式提供借鉴。     

脓毒症小鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+T细胞变化及其意义

目的观察脓毒症小鼠血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的变化特点,探讨它与脓毒症病程发展间的关系。方法选择清洁级KM雄性小鼠,用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作脓毒症小鼠模型(CLP组),分别于2h、6h、12h、24h、48h、72h采血处死12只,并留取远端回肠HE染色光镜检查;流式细胞仪检测血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞计数及其占CD4+T细胞的百分比,ELISA法测定细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平,全自动生化分析仪检测AST、ALT、BUN、Cr等肝肾功能生化指标。以假手术组(Control组)作为对照,标本采集时间点、检测方法同CLP组。结果 CLP组血CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞百分比持续增高,12h后即高于假手术组,随病程进展增高更为显著(P<0.01)。CLP2h后TNF-α水平升高即超过假手术组(P<0.01),12h到达顶峰,随后开始下降,但至CLP后72h仍高于假手术组;IL-6水平于CLP后6h出现快速升高,12h达到峰值,与假手术组相比增幅有统计学差异(P<0.01),随后下降,72h与假手术组比较无统计学差异(P>0.05);CLP2h后IL-10水平即已高于假手术组(P<0.01),12h出现快速上升改变,并持续攀升,至72h未见下降拐点。CLP后ALT、AST升高早于BUN、Cr,前者术后24h明显升高,增幅大于假手术组(P<0.01),而后者术后48h明显升高,增幅大于假手术组(P<0.01),随着时间的延长,ALT、AST、BUN、Cr均进一步升高,假手术组指标则回落到基线水平。结论 CLP小鼠模型CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例增加与脓毒症严重程度成正比,这种变化可能是机体逃避过度的炎症反应引发严重的组织器官损伤的自身调节反应,但有一定限度,调控Treg或将为脓毒症免疫调节治疗提供新的思路。     

现代心肺复苏动物模型研究进展

回顾不同种类动物模型心肺复苏各自的优缺点，简述常用诱导动物心搏骤停的实验方法以及不同实验方法所导致的病理生理改变和心搏骤停造模流程，以及造模成功后各器官功能的改变。为临床不同发病病因所致的心搏骤停以及心搏骤停后人体器官功能改变、组织病理学、生化指标、生物标记物等的变化提供实验依据。