米糠甾醇对大鼠免疫功能的影响

目的探讨米糠甾醇(rice bran sterol,RBS)对大鼠免疫功能的调节作用。方法健康SD大鼠160只分为正常对照组(CN,灌胃生理盐水)和RBS低、中、高剂量(RBS-L,RBS-M,RBS-H,分别灌胃RBS乳化液30、75和150 mg/(kg·bw·d)组,15d后,测定免疫器官指数、碳廓清指数、血清溶血素、淋巴细胞增殖能力和腹腔巨噬细胞功能等免疫指标。结果与CN组比较,RBS-L和RBS-H组可提高脾脏指数(P0.05或P0.01),但RBS-M组差异不显著(P0.05);RBS各剂量组对大鼠胸腺指数无明显影响(P0.05);RBS-L和RBS-M组能提高大鼠碳廓清指数(P0.05);RBS-M组能促进血清溶血素的释放(P0.05);RBS各剂量组能显著提高大鼠淋巴细胞的增殖能力(P0.05或P0.01)和巨噬细胞的吞噬百分率(P0.05或P0.01)与吞噬指数(P0.01)。结论 RBS可增强大鼠的免疫功能。     

三种结核分枝杆菌分泌蛋白的抗体制备及其在抗原检测中的应用

目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63-MPT70重组蛋白抗体，探讨其在检测结核抗原中的应用价值。方法应用重组蛋白CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63-MPT70免疫血清，制备包被抗体和标记抗体，建立检测3种蛋白的双抗体夹心法，并将其用于17种分枝杆菌培养上清液和341份临床血清标本的检测。结果CFP10-ESAT-6的最低检出浓度为25ng／mL，MPT64和MPT63-MPT70均为50ng／mL。CFP10-ESAT-6检测17种分枝杆菌培养上清液，只有结核分枝杆菌为阳性；而MPT64和MPT63-MPT70检测除结核分枝杆菌阳性外，还各有5种非结核分枝杆菌培养上清液为阳性结果。CFP10-ESAT6、MPT64和MPT63-MPT70检测165例临床诊断的肺结核患者血清标本阳性率分别为33．9％、41．2％和47．9％；检测112例非结核患者血清标本的假阳性率分别为1．8％、7．1％和10．7％；检测64例健康对照的假阳性率分别为0、3．1％和7．8％。结论CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63-MPT70重组蛋白制备的抗体检测血清标本结核抗原的阳性率均不高，但特异性较好。     

结核分枝杆菌分泌蛋白MPT53基因的克隆、表达和纯化

目的构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因，产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化，酶切鉴定，克隆到pET32a原核表达载体，测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21，诱导表达MPT53融合蛋白，亲和层析纯化后，进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果成功构建PET32a-MPT53重组质粒，转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36ku的MPT53蛋白，与理论值相符。结论成功表达结核分枝杆菌MPT53蛋白，为其应用打下了基础。     

复方黄连注射剂血清药理学研究

目的 通过血清药理学方法,探讨复方黄连注射剂的体内药效学.方法 以大白兔为实验动物,采用肌内注射复方黄连注射剂.给药后取不同时间的血液分离含药血清.采用反相高效液相色谱法测定含药血清中小檗碱含量,用微量稀释法和药敏纸片法测定复方黄连注射剂含药血清的抑菌能力.结果 复方黄连注射剂含药血清对耐药性金葡菌具有明显的抑制作用.结论 复方黄连注射剂具有体内抗菌作用.     

β-内酰胺类药物及与复方黄连注射液联合使用对金黄色葡萄球菌MSW的影响

目的测定β-内酰胺类药物单用及与复方黄连注射液联合使用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC和MPC,探讨β-内酰胺类与复方黄连注射液联合使用对耐药突变选择窗(MSW)的影响,为临床优化抗菌药物给药方案,限制耐药突变体选择性扩增提供一条新思路。方法采用MH琼脂二倍稀释法测定阿莫西林和头孢噻呋、复方黄连注射液单独用药和联合用药的最低抑菌浓度(MIC)、抑制99%接种细菌生长的最低抑菌浓度(MIC99)、防突变浓度(MPC)。结果阿莫西林单独使用时的SI(MPC/MIC99)值为15.2,与16MIC的复方黄连注射液联合使用后,SI降低至5.1,为其单独用药的1/3;头孢噻呋单独使用时其SI值为16.1,与16MIC的复方黄连注射液联合使用后,SI降低至4.2,为单独用药的1/4。结论β-内酰胺类药物和复方黄连注射液联合用药可以明显缩小MSW。