白藜芦醇对低分化肝癌细胞Hep3B增殖凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)对低分化肝癌细胞Hep3B增殖凋亡的影响。方法:分别用不同浓度的Res(0、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)处理Hep3B细胞,利用CCK-8法、PI染色、Annexin V-FITC/PI染色实验分别检测不同浓度的Res对低分化肝癌细胞Hep3B增殖、周期、凋亡的影响。结果:不同浓度的Res处理低分化肝癌细胞Hep3B后,Hep3B细胞的增殖能力下降,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.01);低分化肝癌细胞Hep3B细胞周期被阻滞在G_2/M期,而细胞凋亡率显著增强(P<0.05)。结论:Res可抑制低分化肝癌细胞Hep3B的增殖并促进其凋亡,对细胞周期具有阻滞效应,为肝癌的临床治疗提供了新思路与新方向。。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠TLR4基因及其甲基化水平的相关性研究

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏中Toll样受体4（TLR4）基因的表达及其甲基化水平的 变化,并探讨两者在NASH发病中的相关性。方法 将20只大鼠采用随机数字表法分为正常组与模型组,每组10 只。正常组与模型组大鼠分别饲喂普通饲料和高脂高糖饲料,于24周后处死。测量大鼠体质量及肝质量,并取各组 大鼠血清及肝脏组织,于低温保存。通过病理染色观察肝细胞的形态变化、脂肪变性及炎性细胞浸润程度。采用酶 联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、三酰甘油（TG）及总胆固醇 （TC）水平;采用免疫组织化学染色法检测肝脏CD68蛋白的表达;采用蛋白免疫印迹法检测肝脏TLR4蛋白的表达; 实时荧光定量PCR检测肝脏TLR4基因mRNA的表达;亚硫酸氢测序PCR（BSP）检测肝脏TLR4基因甲基化水平。结 果 与正常组相比,模型组肝细胞体积增大,出现大量脂肪空泡,炎性细胞浸润明显;肝指数升高,血清中ALT、AST、 TC及TG明显升高（P＜0.01）;CD68蛋白的表达含量明显升高;TLR4蛋白、mRNA表达明显升高（P＜0.01）;甲基化水 平降低（P＜0.01）。TLR4的甲基化水平与其mRNA相对含量的表达呈负相关（P＜0.01）。结论 NASH模型大鼠肝 脏TLR4基因的表达与其甲基化水平呈负相关,TLR4基因甲基化水平的降低在NASH发病因素中发挥重要作用。     

唑尼沙胺对PS1/APP小鼠学习记忆功能和前额叶皮层中BDNF和TrkB的影响

目的探讨唑尼沙胺对PS1/APP小鼠学习记忆功能及前额叶皮层脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶受体(TrkB)影响。方法将21只小鼠分为三组,其中14只PS1/APP小鼠随机平均分为PS1/APP生理盐水(PS1/APP-veh)组和PS1/APP唑尼沙胺(PS1/APP-ZNS)组,7只野生C57/BL6J小鼠作为野生生理盐水(WT-veh)组;加药4 w后,对各组小鼠进行Morris水迷宫测试,检测学习记忆功能的变化,利用免疫组化、Western印迹检测前额叶皮层中BDNF和TrkB的表达情况。结果在Morris水迷宫测试中,在唑尼沙胺干预下,PS1/APP小鼠学习记忆功能得到改善;在免疫组化实验和Western印迹实验中,与WT-veh组相比,PS1/APP-veh组BDNF和TrkB表达减少(P<0.05),与PS1/APP-veh组相比,PS1/APP-ZNS组BDNF和TrkB的表达增加(P<0.05)。结论唑尼沙胺可以通过促进前额叶皮层内BNDF和TrkB的表达,改善PS1/APP小鼠中的学习和记忆功能。     

从“脾为生痰之源”探析非酒精性脂肪肝的基本病机

非酒精性脂肪肝已成为全球性疾病。其发生多由过食肥甘厚味、劳逸失度、情志失调、素体痰湿过重等原因,进而影响脾胃的正常功能。脾为生痰之源,而痰湿是非酒精性脂肪肝的重要病理表现。从脾为生痰之源理论探讨非酒精性脂肪肝的发病机制,并通过总结临床运用健脾化痰的方法治疗非酒精性脂肪肝的经验,阐明脾失健运,痰湿内阻为非酒精性脂肪肝的关键病机,为临床运用健脾化痰的方法治疗非酒精性脂肪肝提供理论依据。     

多种思维导图模型在病理学教学中的应用

病理学是医学院校中西医相关专业的基础必修课,是连接基础医学与临床医学的桥梁学科。其课程具有核心概念多、覆盖面广、逻辑推理性强、临床病理联系复杂等特征。为加强学生对病理过程的理解和应用,培养高素质创新人才,文章在课堂教学前、中、后3个环节,融入了几种不同的思维导图模型：通过“九宫分析法模型”提出教学问题,“六顶思考帽模型”活跃课堂教学,并通过“金字塔原理模型”回温教学内容帮助学生建立思考力闭环,以知识点之间的内在联系为指导思想,创新学生思维,注重课堂教学深度与广度,以更好理解与接受的可视化方式为学生展现教学内容。教师利用思维导图模型探索与创新病理学教学模式,提高教学质量,实现真正意义上的教学相长。     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证模型的建立

目的采用高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节的方法,建立符合中医证候特点的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝郁脾虚证大鼠模型。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、NASH模型组(NASH组)、肝郁脾虚证模型组(GYPX组)和NASH肝郁脾虚证病证模型组(N+G组)。正常对照组予以基础饲料常规喂养,NASH组给予高糖高脂饲料喂养,GYPX组予以基础饲料喂养并采用慢性情志刺激+饮食不节进行造模,N+G组采用高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节进行造模。造模14周后,观察各组大鼠行为学改变情况,肝组织内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC),血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),海马组织去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量,尿D-木糖排泄率及肝脏HE染色变化和非酒精性脂肪性肝病活动度积分(NAS)情况。结果GYPX组和N+G组大鼠的症状和体征均符合中医肝郁脾虚证的证候表现,NASH组仅有毛发不泽的表现。与正常对照组比较,GYPX组和N+G组大鼠海马组织5-HT和NE含量、尿D-木糖排泄率显著降低(P0.05,P0.01);NASH组和N+G组大鼠血清ALT和肝组织TG、TC含量明显增高(P0.05,P0.01)。NASH组和N+G组大鼠肝脏分别呈大泡性中、重度脂肪性肝炎改变,N+G组可见肝细胞点状坏死及明显炎细胞浸润。GYPX组可见部分肝细胞水肿,未见明显脂变和炎性浸润。与正常对照组比较,NASH组和N+G组大鼠NAS评分显著升高(P0.01)。结论高糖高脂饲料结合慢性情志刺激+饮食不节的方法所建立的大鼠NASH肝郁脾虚证病证模型符合人类NASH病理特点和中医肝郁脾虚证证候特点,是较为理想的NASH肝郁脾虚证模型。     

多元评价体系在急性家兔肺水肿实验课堂中的应用

急性家兔肺水肿实验是高等本科院校病理生理学课程中一节基础实践课。该实验主要培养学生的实验逻辑思维能力、动手操作能力及理论联系实际能力。为加强学生对急性家兔肺水肿实验过程的理解和应用,提高实验素养,培养高素质创新人才,文章将多元评价体系应用于急性家兔肺水肿实验课堂教学前、中、后各个环节中,通过诊断性评价进行课前理论知识与实验认知的学情调查;使用形成性评价,实时评估课中学生对实验模型复制各操作步骤的掌握与理解;运用总结性评价巩固学生对于急性家兔肺水肿实验的目的、流程、结果、意义的认知程度;以评促教,以教促学,提升学生实验思维,提高课堂教学质量,为后续将要开展的机能类实验实训课积累经验与技巧。     

下调TMEM97对卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡的影响及其相关机制探讨

目的　观察下调跨膜蛋白97（TMEM97）对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法　将卵巢癌细胞SKOV3分为转染组（si-TMEM97组）、阴性对照组（siNC组）和空白对照组（Control组）。采用实时荧光定量PCR（qPCR）及Western blot法分别在mRNA和蛋白表达水平评估转染siRNA-TMEM97后TMEM97的沉默效果;分别在转染后采用CCK-8法、PI染色法、Annexin V-FITC/PI染色法和流式细胞术检测下调TMEM97对细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,并检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白质（Bax）及P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 MAPK）通路相关蛋白（P38/MAPK、p-P38/MAPK）的表达变化。结果　si-TMEM97组细胞的增殖能力相比Control组和siNC组降低,而早期凋亡率增高（均P＜0.01）。si-TMEM97组细胞Bcl-2的蛋白相对表达量较Control组和siNC组降低,而Bax、p-P38/MAPK的蛋白相对表达量较Control组和siNC组增高（均P＜0.05）。结论　下调TMEM97的表达使卵巢癌细胞SKOV3增殖减少,凋亡增加,这可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达及P38/MAPK信号通路的激活有关。     

细胞质动力蛋白轻链Tctex-1的研究进展

细胞质动力蛋白轻链Tctex-1是由两个α螺旋和4个β链组成的二聚体。Tctex-1可以和Lfc、CD155、Doc2、VDAC1、REIC/Dkk-3和Fyn等相互作用,促进神经突和轴突的形成,介导逆行囊泡运输,还可以参与直接的物质运输。研究发现Tctex-1在神经、免疫及肿瘤等领域发挥着重要的作用,因此对于Tctex-1的深入研究必将给多种疾病的治疗带来希望。本文旨在阐述细胞质动力蛋白轻链Tctex-1的结构和功能,并对其在肿瘤和免疫等领域的作用进行综述。     

逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证大鼠TLR-4/TRIF信号转导通路的影响

目的:观察逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝郁脾虚证大鼠肝细胞Toll样受体-4(TLR-4)/β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)信号转导通路活性的影响。方法:选取32只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、逍遥散治疗组和甘氨酸治疗组(n=8)。除正常组大鼠给与基础饲料常规饲养外,其余实验组均按"高糖高脂饲料+饥饱失常+慢性束缚应激"法饲养14周以建立NASH肝郁脾虚证大鼠模型,并分别给与生理盐水2 mL·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,1 g·mL~(~(-1))逍遥散溶液按3.24 mL·kg~(-1)·d~(-1)剂量灌胃,2.5 g·mL~(~(-1))甘氨酸溶液按2 mL·kg~(-1)·d~(-1)剂量灌胃,给药4周后处死。大鼠处死前均计算其肝郁脾虚证证侯积分和检测尿D-木糖排泄率,无菌低温条件下提取肝脏及脑组织。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠脑组织内去甲肾上腺素(NE),5羟色胺(5-HT)的含量,苏木素-伊红(HE)染色检测肝细胞脂肪变性及炎细胞浸润程度,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测大鼠肝组织TLR-4,TRIF蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型大鼠肝郁脾虚证证侯积分明显升高,而尿D-木糖排泄率和脑组织内5-HT,NE含量明显降低,肝组织HE染色可见肝细胞胞质内出现大量脂肪空泡及肝小叶内可见散在的点状坏死和炎细胞浸润,TLR-4和TRIF mRNA表达以及TLR-4和TRIF蛋白表达量明显升高(P0.05);与模型组比较,逍遥散治疗组和甘氨酸治疗组明显降低大鼠肝郁脾虚证证侯积分,明显升高尿D-木糖排泄率和脑组织内5-HT,NE的含量,明显减轻肝细胞脂肪变性程度及炎细胞浸润程度,明显降低TLR-4和TRIF mRNA表达以及TLR-4和TRIF蛋白表达量(P0.05)。结论:逍遥散可通过调节TLR-4/TRIF信号转导通路的活性以发挥"疏肝健脾"之功效,从而参与NASH肝郁脾虚证的治疗。