羟基红花黄色素A对缺血损伤脑组织蛋白质硝基化修饰的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对缺血损伤脑组织蛋白质硝基化修饰的影响。方法模拟体内蛋白质硝基化的2条主要途径,体外以BSA为底物,分为对照组及低、中、高干预组(以HSYA 0.01、0.1和1mmol/L干预),Western blot法检测HSYA对BSA硝基化水平的影响。另选SD大鼠45只,随机分为假手术组、模型组和治疗组(HSYA 10mg/kg),每组15只。后2组大鼠制作大脑中动脉闭塞再灌注模型,采用Western blot法、免疫组织化学法观察脑组织蛋白质硝基化水平及HSYA对硝基化修饰的影响;TTC染色观察脑梗死体积的改变。结果与对照组比较,低、中、高干预组蛋白质硝基化水平呈剂量依赖性地降低,以高干预组的抑制作用最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组脑组织中3-硝基酪氨酸仅有少量表达,与假手术组比较,模型组表达明显增加,而治疗组表达较模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组脑梗死体积较模型组减少48.86%(P<0.01)。结论 HSYA对缺血损伤脑组织蛋白质硝基化具有抑制作用,这可能是其脑缺血再灌注损伤保护作用的分子机制之一。     

羟基红花黄色素A对谷氨酸诱导损伤神经元过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)拮抗谷氨酸诱导神经元损伤的保护机制。方法采集经体外原代培养第7天的Sprague Dawley胎鼠皮质神经元,通过形态学观察、噻唑蓝法、Westernblotting法分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和磷酸化PPARγ(pPPARγ,即PPARγ的失活形式)表达水平,以探讨HSYA抗谷氨酸诱导神经元损伤的保护机制。结果经谷氨酸处理后神经元发生肿胀、部分崩解、死亡。与正常对照组相比,谷氨酸不同剂量组(1.00、5.00和10.00mmol/L组)的神经元存活率(66.60%、33.40%和21.60%)和PPARγ蛋白表达水平显著降低,对照组灰度值:1.06±0.18,谷氨酸5.00和10.00mmol/L组灰度值分别为:0.32±0.09、0.28±0.07(均P=0.000),pPPARγ蛋白表达水平明显升高,灰度值分别为:0.37±0.05、1.83±0.17和1.75±0.21(均P=0.000)。HSYA与谷氨酸共同处理后神经元形态明显改善、细胞相对存活率提高,谷氨酸5.00mmol/L,HSYA0.01、0.10和1.00mmol/L组分别为33.40%、35.30%、51.00%和72.50%(P=0.742、0.033、0.002),PPARγ蛋白表达水平呈现逐渐升高趋势,对照组,谷氨酸5.00mmol/L,HSYA0.01、0.10和1.00mmol/L组灰度值分别为:1.20±0.16、0.25±0.06、0.39±0.10、0.41±0.12、0.37±0.08,但差异未达到统计学意义(均P>0.05),pPPARγ蛋白表达水平降低,对照组,谷氨酸5.00mmol/L,HSYA0.01、0.10和1.00mmol/L组灰度值分别为:0.51±0.14、1.91±0.25、1.70±0.26、1.25±0.23、0.85±0.19,(P=0.022、0.004、0.000)。结论 HSYA对由谷氨酸诱导的神经元损伤具有保护作用,其机制与抑制PPARγ蛋白磷酸化即抑制PPARγ活性有关。     

2014—2018年天津市儿童医院化脓性脑膜炎病原菌分布及耐药性分析

目的 分析2014—2018年天津市儿童医院化脓性脑膜炎病原菌的分布和耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法 收集2014年1月—2018年12月在天津市儿童医院住院,经脑脊液或血液培养细菌阳性的化脓性脑膜炎患儿121例,统计并分析化脓性脑膜炎病原菌的分布和耐药性。结果 化脓性脑膜炎患儿的年龄分布主要为<28 d和28 d～1岁,构成比分别为26.5%、41.3%。共分离出121株病原菌,其中革兰阳性菌85株,占70.2%,主要为肺炎链球菌、表皮葡萄球菌和无乳链球菌;革兰阴性菌36株,占29.8%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。不同年龄段化脓性脑膜炎患儿感染的病原菌不同。肺炎链球菌、表皮葡萄球菌和无乳链球菌均对利奈唑胺和万古霉素完全敏感。肺炎链球菌对左氧氟沙星和莫西沙星也完全敏感,对克林霉素和红霉素的耐药率均高达95.6%;表皮葡萄球菌对苄青霉素、苯唑西林和红霉素的耐药率较高;无乳链球菌对克林霉素和红霉素耐药率较高,对其他抗菌药物均完全敏感。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌均对阿米卡星完全敏感。大肠埃希菌对呋喃妥因也完全敏感,对氨苄西林、哌拉西林的耐药率高达80%;肺炎克雷伯菌对妥布霉素和环丙沙星也完全敏感,对氨苄西林的耐药率高达80.0%;铜绿假单胞菌对头孢他啶、庆大霉素和妥布霉素也完全敏感,对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、头孢替坦、头孢曲松、复方新诺明和呋喃妥因的耐药率均高达100.0%,对其他抗菌药物的耐药率均为25.0%。结论 不同年龄段化脓性脑膜炎患儿感染病原菌不同,临床经验用药时应根据患儿发病年龄和耐药性情况选择不同的抗菌药物,提高治疗的针对性。     

羟基红花黄色素A抑制脑组织蛋白质硝基化的体外研究

目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对体外亚铁血红素/亚硝酸钠/过氧化氢(heme/NaNO2/H2O2)途径引起脑组织蛋白质硝基化的抑制作用.方法 模拟体内heme/NaNO2/H2O2硝基化途径,分别以牛血清白蛋白和脑组织蛋白为硝基化底物,分为对照组及药物干预组,HSYA的终浓度依次为0.01mmol/L、0.1mmol/L、1mmol/L.以Western blotting法检测蛋白质酪氨酸硝基化水平.结果 Heme/NaNO2/H2O2途径可引起牛血清白蛋白和脑组织蛋白显著的硝基化修饰,加入不同浓度HSYA后,蛋白质硝基化水平均呈剂量依赖性地降低,其中以1 mmol/L HSYA的抑制作用最明显,与对照组相比,差异具有统计学意义(P均＜0.05).结论 HSYA可剂量依赖性地抑制heme/NaNO2/H2O2途径在体外对脑组织蛋白的硝基化修饰;提示HSYA抑制蛋白质硝基化反应可能是其对抗脑血管疾病与神经系统变性疾病的分子机制之一.