终点法荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床应用

目的运用终点法荧光定量PCR检测HBV-DNA,探讨其临床应用价值。方法运用本研究组制备的引物和荧光探针分别将HBV-DNA质粒及临床标本进行普通PCR和实时荧光定量PCR反应,再将普通PCR产物在荧光测定仪上测定荧光强度,与实时荧光定量PCR结果相比较,观察其符合程度。另外,运用相同方法比对本研究制备的PCR体系与市售荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的符合程度。结果终点法荧光定量PCR与实时荧光定量PCR检测HBV-DNA质粒及临床标本结果一致(P>0.05),与市售荧光定量PCR试剂比较,其符合程度较高(P>0.05)。结论终点法荧光定量PCR检测临床HBV-DNA标本稳定可靠,可作为荧光定量PCR的应用方法之一在基层医院推广应用。     

脱落细胞学联合4项肿瘤标志物检测诊断恶性浆膜腔积液的价值

目的探讨脱落细胞学联合癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）、糖链抗原（carbohydrate antigen,CA）125、CA15-3、CA19—9检测对恶性浆膜腔积液的诊断价值。方法比较68例良性浆膜腔积液患者（良性组）和50例恶性浆膜腔积液患者（恶性组）CEA、CA125、CA15-3、CA19—9水平,分析脱落细胞学联合血清肿瘤标志物诊断恶性浆膜腔积液的敏感性、特异性和准确性。结果恶性组脱落细胞学诊断为恶性45例,漏诊5例;良性组脱落细胞学阳性1例,误诊为恶性积液;恶性组CEA、CA125、CA15—3、CA19—9水平均高于良性组（P〈O．01）;脱落细胞学联合4项血清肿瘤标志物诊断恶性浆膜腔积液的敏感性为98％,特异性为98．5％,准确性为98．3％。结论肿瘤标志物联合脱落细胞学检测在浆膜腔积液的良、恶性质判断中有重要价值。     

环孢霉素A的免疫抑制作用及血管内皮细胞氧化应激反应和毒性作用的分子生物学机制

免疫抑制药物环孢霉素A通过与胞浆内的环孢霉素A受体及钙调磷酸酶形成三元复合物，进而阻断T细胞活化，达到免疫抑制的目的。但同时可以诱导细胞内活性氧簇和活性氮簇等氧化应激物质产生，从而对细胞形成毒性作用。另外，环孢霉素A结合线粒体膜间腔的环孢霉素受体D后，可引起迟发的溶酶体损伤，激活组织蛋白酶D，导致DNA操作和细胞坏死。环孢霉素A的不良反应可以通过调整其用药剂量及与其他药物配合使用来降低甚至消除。     

角质细胞生长因子受体转基因对急性肺损伤时肺泡上皮细胞钠离子通道的影响

目的 观察角质细胞生长因子受体(KGFR)腺病毒表达载体在大鼠急性肺损伤前后对肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达的促进作用,从而验证基因治疗急性肺损伤的效果.方法 将雄性SD大鼠40只分成4组:正常对照组(n=8),致伤对照组(n=10),正常转基因组(n=10),致伤转基因组(n=12).用脂多糖(LPS)造成急性肺损伤模型,以肺组织明显肿大病变为制模成功标准.正常转基因组和致伤转基因组均通过大鼠尾静脉注射KGFR基因的腺病毒表达载体应用液1 mL,72 h后致伤转基因组和致伤对照组分别通过大鼠尾静脉以5 mg/kg注射LPS,正常转基因组和正常对照组则注射等量的生理盐水.过48 h后,断头处死所有实验组大鼠,取肺组织进行实验.通过免疫组化和免疫电镜检测各组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道的表达情况.数据采用完全随机区组设计的方差分析,行LSD-t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达水平(免疫组化)由高到低依次为:正常对照组(PU值=47.7±3.33),正常转基因组(PU值=46.9±5.21),致伤转基因组(PU值=29.19±4.11)和致伤对照组(PU值=5.1±2.3);致伤转基因组的钠离子通道表达水平低于正常转基因组(t=9.134,P<0.001)和正常对照组(t=10.601,P<0.001),但明显高于致伤对照组(t=16.466,P<0.001).结论 KGFR腺病毒表达载体转基因效果明显,能够在LPS致伤情况下有效促进钠离子通道的表达,缓解肺泡腔内钠水潴留,达到转基因治疗肺损伤的效果.     

血小板源性生长因子的纯化及其生物活性的研究

本文采用超滤膜抽滤,直接从血小板中提取血小板源性生长因子(PDGF),对提取的PDGF用经典的3′H-TdR渗入法、MTT法培养细胞及动物生物学实验来验证其功能。结果表明,本文提取的PDGF同国外购置的PDGF具有同样的生物活性,即促进细胞增生、毛细血管增生、修复创伤组织的功能。本文为直接从血小板中提取PDGF建立了一种简便可靠手段,并为该因子临床应用,即促进难愈性伤口愈合,提供了实验依据。     

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶Ⅰ孙月庭，刘斌剑，曲菁华（中国人民解放军第一六一中心医院，武汉４３００１０）现已证实心肌梗塞的早期在胸痛发作８～１２ｈ后，血清中ＬＤ１浓度开始升高，２４～４８ｈ达到高峰，其敏感性达１００％，特异性达９５％以上。测定Ｌ...     

对氨基苯甲酸甘氨酸结合代谢率定量检测试验对白兔肝功能的研究

目的 评估急性肝坏死兔甘氨酸结合对氨基苯甲酸（PABA）转变成马尿酸的代谢能力。方法 30只雄性大耳白兔随机分组成实验组（20只）用D－氨基半乳糖致大耳白兔急性肝坏死,对照组（10只）注射生理盐水。采用高效液相色谱法测定血清中不同时间的对乙酰氨基马尿酸（PAAHA）、对氨基马尿酸（PAHA）和对乙酰氨基苯甲酸（PAABA）的含量。结果 实验组与对照组比较,马尿酸的形成明显减少。在不同时间分析马尿酸的代谢率,显示与肝损伤的程度相关,而PABA的乙酰化程度与肝损伤程度无明显相关,在严重急性肝损伤时PAHA的浓度为零。结论 甘氨酸结合PABA的代谢率的测定可作为肝功能定量试验和急性肝坏死的灵敏指标。