排序方式: 共有12条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观察垂体腺苷环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide,PACAP)对缺血再灌注脑神经元凋亡的防治作用。方法:利用四血管结扎法,建立老龄大鼠脑缺血再灌注模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧物酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,计数海马CA1区存活和凋亡神经元数目,电镜观察神经元的超微结构变化。结果:PACAP治疗后脑组织MDA含量为(1.35±0.39)nmol/mg,SOD和GSH-Px活性分别为(115±20)NU/mg、(10.3±2.0)U/mg,与缺血再灌注组有明显差异(P<0.05),海马CA1区存活和凋亡神经元数目为48.8±4.3,14.3±2.9,能促进神经元存活和减轻凋亡损伤(P<0.01),保护超微结构。结论:PACAP的保护作用可能与其降低脑组织氧自由基水平,提高抗氧化酶活性,防止神经元凋亡有关。 相似文献
2.
脑缺血迟发性神经元死亡的分子机制研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
随着神经科学的发展 ,人们对缺血性脑血管病的发生发展有了进一步认识。脑缺血的早期阶段 ,威胁神经元存活的主要因素有兴奋性神经毒性、自由基的损伤和反复胞膜去极化导致的能量衰竭[1,2 ] 。但在损伤的晚期 ,即迟发性神经元死亡 (Delayedneuronaldeath ,DND)时期 ,则可出现损伤的其他机制 ,其可能是起始阶段脑缺血启动了特异的基因序列引起 ,这些基因的表达一部分能加重缺血损伤 ,但另一部分则对晚期组织损伤有保护作用。近年 ,DND的发生机制日益受到国内外学者的关注 ,我们拟就脑缺血DND分子机制的一些进展… 相似文献
3.
4.
目的:在原代培养的大鼠海马神经元上观察不同浓度垂体腺苷环化酶激活肽-38对活性氧所致神经元氧化损伤的保护作用,为垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用提供依据。
方法:实验于2001-09/2002-03在解放军总医院老年医学研究所神经生物学研究室完成。取新生1-3d的SD大鼠海马进行神经元原代培养,将细胞随机分成5组:对照组,活性氧组,1&;#215;10^-8mol/L,1&;#215;10^10mol/L和1&;#215;10 mmol/L垂体腺苷环化酶激活肽-38组。分别用次黄嘌呤(mmol/L)/黄嘌呤氧化酶(U/L)1.0/200,1.5/150,2.0/200,2.0/300,3.0/300处理细胞诱导氧化损伤模型,选择次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L作为最终的活性氧浓度,进一步观察垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用。采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定神经元存活率,光学显微镜下照像,利用计算机图像分析软件分析神经元的形态改变,应用荧光素JC-1染色-激光流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,利用反转录-聚合酶链反应法半定量天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的mRNA水平。
结果:①细胞存活率分别为:对照组77.8%,次黄嘌呤1.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L活性氧组62.5%,次黄嘌呤1.5mmol/L/黄嘌呤氧化酶150U/L, 活性氧组50.1%,次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L活性氧组48.4%,次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶300U/L活性氧组25.3%,次黄嘌呤3.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶300U/L活性氧组28.9%。与对照组比较,神经元的存活率随着培养液中活性氧浓度的增加而呈显著下降趋势(P〈0.01)。②活性氧不仅能引起培养神经元的存活率下降(P〈0.01),还能导致神经元出现神经退行性变样的形态学损伤,包括细胞皱缩,突起脱落、突起数减少[对照组(2.6&;#177;0.6)个,活性氧组(0.5&;#177;0.2)个,P〈0.011,多极神经元百分率下降(对照组为32.6%,活性氧组为10.1%,P〈0.01),同时,也能引起神经细胞的线粒体膜电位显著下降(对照组为40,活性氧组为12.3,P〈0.01)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 mRNA水平增加(对照组为0.13%,活性氧组为3%,P〈0.01)。⑧预先给予1&;#215;10^-8mol/L,1&;#215;10^-10mol/L和1&;#215;10^-2mol/L的垂体腺苷环化酶激活肽-38能显著改善活性氧引起的神经退行性损伤和线粒体膜电位下降(P〈0.05或P〈0.01),抑制天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的表达(P〈0.01),其中,1&;#215;10^-7mol/L垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用最强(P〈0.01)。
结论:活性氧可直接损伤培养的神经元,导致神经元出现形态学退行性改变和神经元存活率下降,形态学改变和死亡率增高与线粒体功能下降和神经细胞核内凋亡基因表达均有关。垂体腺苷环化酶激活肽-38具有明显的抗氧化损伤和神经保护作用,并且这种保护作用具有浓度依赖性. 相似文献
5.
老年大鼠全脑缺血再灌注所致神经元凋亡及氧化损伤的机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察老年大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的规律 ,并探讨氧化损伤的机制。方法 利用四血管结扎法 ,建立老年大鼠全脑缺血再灌注模型 ,分别于缺血再灌注后 6h、1、3、5、7d计数海马锥体神经元存活数 ,原位末端标记法计数凋亡神经元数 ,电镜观察超微结构变化 ,并测定脑组织丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活性。结果 老年大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡损伤在再灌注后第 3天损伤最重 ,存活神经元数显著减少 ,电镜显示有凋亡改变。脑组织SOD和GSH Px活性降低 ,MDA含量升高 ,再灌注后 3d最为明显。结论 全脑缺血再灌注神经元凋亡损伤与氧自由基水平升高 ,抗氧化酶活性降低有关。 相似文献
6.
PACAP对老年大鼠脑缺血再灌注神经元损伤及M受体的影响 总被引:9,自引:1,他引:9
目的 观察垂体腺苷环化酶激活肽 (PACAP)对老年大鼠全脑缺血再灌注模型神经元损伤和M受体 (mAChR)的影响。方法 利用四血管结扎法 (4 VO)建立老年大鼠全脑缺血再灌注复合伤模型 ,侧脑室注射PACAP38(5 0nmol·kg-1 ) ,用HE染色和TUNEL标记法计数皮层和海马CA1区正常神经元和凋亡神经元数目 ,采用放射性配体结合实验和饱和结合实验检测皮层和海马mAChR的3 H QNB特异结合量和结合参数。结果 脑缺血再灌注d 3后 ,皮层和海马CA1区正常神经元数显著减少、凋亡神经元数显著增加 (P<0 0 1 ) ,海马 (P <0 0 1 )和皮层 (P <0 0 5 ) 3 H QNB的特异结合量减低 ,最大结合容量 (Bmax)显著下降 (P <0 0 1 ) ,但亲和力 (Kd)不变。PACAP组皮层和海马CA1区缺血损伤神经元和凋亡神经元数目均比模型组明显降低 (P <0 0 5 ) ,3 H QNB的特异结合量和Bmax提高 (P <0 0 5 ) ,Kd 值不变。结论 脑缺血再灌注所致神经元损伤、凋亡和缺失可能是导致mAChR活性降低、密度下降的主要原因。PACAP具有抗脑缺血所致神经元损伤、保护中枢胆碱能系统的作用 ,在缺血性脑血管病防治中有潜在应用价值 相似文献
7.
垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用 总被引:8,自引:3,他引:8
目的:观察垂体腺苷环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)对缺血再灌注脑神经元凋亡的防治作用。方法:利用四血管结扎法,建立老龄大鼠脑缺血再灌注模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧物酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,计数海马CA1区存活和凋亡神经元数目,电镜观察神经元的超微结构变化。结果:PACAP治疗后脑组织MDA含量为(1.35&;#177;0.39)nmol/mg,SOD和GSH-Px活性分别为(115&;#177;20)NU/mg、(10.3&;#177;2.0)U/mg,与缺血再灌注组有明显差异(P<0.05),海马CA1区存活和凋亡神经元数目为48.8&;#177;4.3,14.3&;#177;2.9,能促进神经元存活和减轻凋亡损伤(P<0.01),保护超微结构。结论:PACAP的保护作用可能与其降低脑组织氧自由基水平,提高抗氧化酶活性,防止神经元凋亡有关。 相似文献
8.
目的:在原代培养的大鼠海马神经元上观察不同浓度垂体腺苷环化酶激活肽-38对活性氧所致神经元氧化损伤的保护作用,为垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用提供依据。方法:实验于2001-09/2002-03在解放军总医院老年医学研究所神经生物学研究室完成。取新生1~3d的SD大鼠海马进行神经元原代培养,将细胞随机分成5组:对照组,活性氧组,1×10-8mol/L,1×10-10mol/L和1×10-12mol/L垂体腺苷环化酶激活肽-38组。分别用次黄嘌呤(mmol/L)/黄嘌呤氧化酶(U/L)1.0/200,1.5/150,2.0/200,2.0/300,3.0/300处理细胞诱导氧化损伤模型,选择次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L作为最终的活性氧浓度,进一步观察垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用。采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定神经元存活率,光学显微镜下照像,利用计算机图像分析软件分析神经元的形态改变,应用荧光素JC-1染色-激光流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,利用反转录-聚合酶链反应法半定量天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的mRNA水平。结果:①细胞存活率分别为:对照组77.8%,次黄嘌呤1.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L活性氧组62.5%,次黄嘌呤1.5mmol/L/黄嘌呤氧化酶150U/L活性氧组50.1%,次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶200U/L活性氧组48.4%,次黄嘌呤2.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶300U/L活性氧组25.3%,次黄嘌呤3.0mmol/L/黄嘌呤氧化酶300U/L活性氧组28.9%。与对照组比较,神经元的存活率随着培养液中活性氧浓度的增加而呈显著下降趋势(P<0.01)。②活性氧不仅能引起培养神经元的存活率下降(P<0.01),还能导致神经元出现神经退行性变样的形态学损伤,包括细胞皱缩,突起脱落、突起数减少[对照组(2.6±0.6)个,活性氧组(0.5±0.2)个,P<0.01],多极神经元百分率下降(对照组为32.6%,活性氧组为10.1%,P<0.01),同时,也能引起神经细胞的线粒体膜电位显著下降(对照组为40,活性氧组为12.3,P<0.01)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3mRNA水平增加(对照组为0.13%,活性氧组为3%,P<0.01)。③预先给予1×10-8mol/L,1×10-10mol/L和1×10-12mol/L的垂体腺苷环化酶激活肽-38能显著改善活性氧引起的神经退行性损伤和线粒体膜电位下降(P<0.05或P<0.01),抑制天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的表达(P<0.01),其中,1×10-8mol/L垂体腺苷环化酶激活肽-38的神经保护作用最强(P<0.01)。结论:活性氧可直接损伤培养的神经元,导致神经元出现形态学退行性改变和神经元存活率下降,形态学改变和死亡率增高与线粒体功能下降和神经细胞核内凋亡基因表达均有关。垂体腺苷环化酶激活肽-38具有明显的抗氧化损伤和神经保护作用,并且这种保护作用具有浓度依赖性。 相似文献
9.
目的为了对我们发现的中国人家族性阿尔茨海默病早老素-1(presenilin1,PS1)基因新的点突变进行蛋白功能研究,分别构建野生型和突变型PS1(G289T)与绿色荧光蛋白(EGFP)共表达载体,并检测其在SHSY5Y细胞内的表达。方法利用含人全长PS1cDNA的pcDNA3·1(zeo ),采用定点突变技术,构建PS1(G289T)-pcDNA3·1(zeo )载体。采用基因重组技术构建野生型和突变型PS1与绿色荧光蛋白共表达载体。应用脂质体将携带野生型和突变型PS1的质粒转染至SH-SY5Y细胞,检测报告基因表达,RT-PCR检测PS1mRNA表达。结果经限制性内切酶酶切图谱分析及DNA测序证实融合蛋白表达载体构建成功;RT-PCR产物经测序显示突变型PS1mRNA在SH-SY5Y中有表达。结论成功构建了人野生型和突变型PS1与EGFP共表达载体并成功转染至SH-SY5Y细胞,为进一步的研究工作奠定了基础。 相似文献
10.
1 资料患者,男,6 8岁,因眼睑下垂15年入院。1987年2月左视时出现双影,住院发现右眼内收、向外下方活动受限,入院后2周双眼外展、4个半月后右眼内下方活动亦受限,9月相继出现右上睑和左上睑下垂。11月时双眼球各方向活动均受限。入院后查血CPK(1987年9月18日) 6 36U/L,约1个月后降至32 2U/L。住院期间,曾给予大剂量激素和青霉素治疗,无明显疗效,甚至还有加重的现象。1989年10月给予肌生和辅酶Q1 0 治疗,无好转。其后病情程度有反复,总趋势为双睑下垂逐渐加重,1996年曾在眼科行“眼睑上提整形术”。近3个月感觉眼球活动稍好转,但双眼睑下… 相似文献