人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究

目的：探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞（HKC）的同步化方法。方法：将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组，分别采用胎牛血清浓度为0、1、2、3、4、5和100mL／L的DMEM培养液培养24h。根据流式细胞术结果选择的最佳同步化HKC的胎牛血清浓度。将HKC的同步化处理时间分别延长为24h、48h和72h，选择最佳同步化时间。用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响。采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果。结果：选择无血清（0mL／L）和1mL／L为HKC最佳同步化的胎牛血清浓度，选择48h为HKC同步化最佳时间。细胞生长曲线表明采用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h后恢复正常培养的HKC细胞，其生长曲线更接近于正常培养的细胞。Brdu进一步证明，用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h可以使90％以上的HKC细胞处于G0／G1期。结论：用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h可获得90％以上的G0／G1期HKC。     

乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBx、MHBs^t mRNA的表达及其意义

目的: 检测乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中乙型肝炎病毒X基因(HBx)及截短型乙型肝炎病毒表面抗原(MHBst)mRNA的表达, 探讨HBx、 MHBst在HBVGN发生中的意义.方法: 采用原位杂交的方法对40例HBVGN患者的肾组织进行HBx、 MHBst mRNA检测.结果: HBVGN患者肾组织中存在HBx、 MHBst mRNA, HBx、 MHBst mRNA主要分布于肾小管上皮细胞的胞质内, 少数肾小球上皮、内皮、系膜细胞的胞质内也有分布; 肾小管上皮细胞内HBx、 MHBst mRNA阳性率分别为82.5%(33/40)、 80%(32/40), 肾小球内HBx、 MHBst mRNA阳性率分别为30%(12/40)、 22.5%(9/40), HBx、 MHBst mRNA在肾小管上皮细胞的表达明显高于肾小球(P＜0.01).结论: 在HBVGN肾组织, 特别是在肾小管上皮细胞的胞质存在HBx、 MHBst mRNA的表达, 提示HBV感染及其基因整合可能在HBVGN发生中有一定意义.     

RIFLE标准在术后急性肾损伤患者选择中的作用

目的探讨RIFLE标准在外科术后急性肾损伤（AKI）患者选择肾替代治疗时机选择中的作用及与预后的关系。方法回顾性分析2001年1月至2006年12月第四军医大学第一附属医院行肾脏替代治疗的外科术后AKI患者368例,按治疗方式分为两组：（1）连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH）组,316例,每日置换总量48—96L;（2）非CVVH组,52例,其中间断性血液透析（IHD）29例,每日或隔日治疗4．5h;腹膜透析（PD）23例,每日腹透液总量8～12L。应用RIFLE标准对AKI进行分期,对比分析各组患者在不同AK1分期的医院死亡率、APACHEⅡ评分、器官衰竭数,以及CVVH组存活者的CWH治疗时间、尿量恢复时间和ICU逗留时间等指标的区别。结果（1）AKIⅢ期患者医院死亡率高于AKIⅠ期和Ⅱ期患者（P〈0．05）。（2）CVVH患者治疗前APACHEⅡ评分在AKI的3个分期中均高于IHD／PD患者（P〈0．05）。（3）CVVH存活者的CVVH治疗时间、尿量恢复时间和ICU逗留时间随AK1分期的加重而延长。结论RILFE标准对外科术后AKI早期诊断和判断预后有指导意义。必须强调肾脏替代时机的选择,早期行肾替代治疗（AKIⅠ期和Ⅱ期）可以明显改善预后,而CVVH比IHD和PD更有优势。     

骨髓间充质干细胞对缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的 探讨外源性骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对缺血再灌注损伤(I/R)后肾小管上皮细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达的影响.方法 将雄性SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体雌性SD大鼠体内.30只受体大鼠随机分为3组(n=10):假手术对照组(C组)、MSCs+I/R组(M组)、DMEM-F12+I/R组(D组).7d后观察肾功能,肾脏病理改变,采用原位末端标记法检测细胞凋亡指数,免疫组化法检测Bcl-2和Bax的表达,并观察DAPI标记的MSCs在受体大鼠肾脏的分布情况.结果 M组在肾功能、肾脏病理改变上,均明显好于D组;M组Bcl-2蛋白表达高于D组,Bax/Bcl-2比值和凋亡指数均低于D组.I/R后7 d内未发现MSCs定位于肾组织中.结论 外源性MSCs可以减少I/R损伤后肾小管上皮细胞的凋亡,促进Bcl-2表达,从而有利于肾小管损伤的早期恢复.     

连续性血液净化防治心脏术后患者多器官功能障碍综合征效果的评价

目的 :探讨连续性静脉静脉血液滤过 (CVVH)在心脏术后多器官功能障碍综合征 (MODS)患者防治中的疗效 ,并根据CVVH治疗的时机探讨与预后的关系。　 方法 :4 3例心脏术后重症急性肾衰竭 (ARF)伴MODS的患者 ,按尿量出现 <0 5ml/ (kg·h)至CVVH开始的时间间隔分为两组 :A组 <18h(2 1例 )和B组 >18h(2 2例 ) ,A组和B组中存活者分为A1组 (16例 )和B1组 (8例 )。对全部患者治疗前和治疗 12h后的MODS评分、APACHEⅢ评分、平均动脉压 (MAP)、氧合指数、血尿素氮 (BUN)和血肌酐 (SCr) ,以及存活者CVVH治疗时间、CVVH开始后尿量恢复时间 [>1ml/ (kg·h) ]和机械通气时间等指标进行比较。　 结果 :①B组的死亡率明显高于A组 (6 3 6 %vs 2 3 8% ,P =0 0 0 9) ;②CVVH治疗 12h后 ,A组及B组的MAP、氧合指数、BUN和SCr均明显改善 ,仅A组的APACHEⅢ评分和MODS评分显著降低 (P <0 0 5 ) ;③B1组机械通气时间、CVVH治疗时间和尿量恢复时间明显高于A1组 (P <0 0 1) ;④存活患者的CVVH距尿量 <0 5ml/ (kg·h)时间与尿量恢复时间 (r =0 76 2 ,P <0 0 0 1)、CVVH治疗时间 (r =0 6 15 ,P =0 0 0 2 )明显相关。　 结论 :CVVH是防治心脏术后MODS合并重症ARF患者的有效手段 ,但必须强调早期ARF诊断和及时CVVH治疗。尽早行C     

连续性肾脏替代治疗在心内直视术后急性肾功能衰竭的应用

目的总结连续性肾脏替代疗法（CRRT）治疗心内直视术后急性肾功能衰竭（ARF）的经验。方法1999年1月至2005年5月共发生51例心内直视术后急性肾功能衰竭患者,均采用CRRT进行治疗。结果存活的30例患者在CRRT治疗12 h后血气和电解质明显改善,18288 h进入多尿期,肾功能逐渐恢复正常。死亡的21例患者中早期5例治疗偏晚,肾功能未恢复,最终肾衰死亡,另16例CRRT治疗1周后肾功能均恢复,但因低心排、感染及呼吸循环衰竭等非肾性因素死亡。结论CRRT是救治心内直视术后并发ARF的有效手段。     

缺血后处理对缺血/再灌注损伤大鼠肾脏Fas,Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨缺血后处理对缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠肾脏Fas,Bax和Bcl-2表达的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为假手术(S)组、I/R组和缺血后处理(IPO)组,每组8只,分别建立动物模型.各组分别采用免疫组化和免疫印迹法检测肾脏Fas,Bcl-2和Bax蛋白的表达变化.结果:IPO组较I/R组Fas阳性染色指数和表达显著降低,分别为[(31.17±4.81)% vs (36.26±5.32)%.P<0.05)]和[(0.98±0.11)vs(1.28±0.19),P<0.05)];IPO组和I/R组Bcl-2阳性染色指数和表达分别为[(32.34±5.12)%vs(31.33±4.55)%.P0.05)]和[(1.03±0.17)vs(0.75±0.11),P<0.05)],Bax阳性染色指数和表达分别为[(25.60±3.79)%vs(29.67±4.34)%,P<0.05)]和[(0.59±0.08)vs(0.91±0.16),P<0.05)].结论:IPO可使Fas和Bax的表达减少,同时可使Bcl-2的表达增加,从而减少缺血再灌注损伤大鼠肾脏细胞的凋亡.     

重视肾脏临床病理讨论提高专科医师培养质量

通过加强肾脏临床病理讨论，培养进修医师的临床思维、分析能力和专科能力，使之尽快达到肾脏专科医师的标准，提高专科医师的培养质量。     

RIFLE标准在心脏术后急性肾损伤病人中的评价

目的 探讨RIFLE标准在心脏术后急性肾损伤(AKI)病人肾替代治疗时机选择中的作用及与预后的关系.方法 回顾分析145例心脏术后AKI病例,分为连续性静脉一静脉血液滤过(CVVH)组(98例)和非CVVH组(47例).应用RIFLE标准对AKI进行分期,对比分析各组病人的临床资料、疗效和预后.结果 AKI Ⅰ期和Ⅲ期中CVVH组与非CVVH组的医院病死率差异无统计学意义;Ⅱ期中非CVVH组的医院病死率高于CVVH组(58.8%对26.1%,P<0.0).CVVH组生存者中,CVVH治疗、尿量恢复、机械通气、ICU滞留和术后医院滞留时间随AKI分期的加重而延长.结论 RIFLE标准对心脏术后AKI早期诊断和判断预后有指导意义.必须强调肾脏替代时机的选择,在AKI Ⅱ期即行肾替代治疗可以明显改善预后,而CVVH比间断血液透析和腹膜透析更有优势.     

以血浆作透析液的血液透析联合高容量血液滤过治疗高胆红素血症的机制研究

目的 前瞻性观察以人体新鲜冰冻血浆作透析液行血液透析（HD-PBD）后继续进行高容量血液滤过（HVHF）,评价其对高胆红素血症患者血清胆红素的清除机制.方法 选择第四军医大学第一附属医院15例肝衰竭患者行HD-PBD治疗6h后,应用同一滤器（AV600）继续行HVHF治疗24h.全部患者分别在HD-PBD治疗初始（0h）及开始后2h、4h和6h取滤器动脉端和静脉端血液、流入端和流出端透析液,HVHF治疗0h、6h、12h和24h取滤器前及滤器后血液,同时留取滤液.观察治疗前后胆红素水平的变化.结果 ①HD-PBD对胆红素的清除较HVHF明显（P＜0.05）.②HD-PBD治疗初始的TB溶质清除率（Kd）为（23.0±3.4）ml/min,滤器使用4～6h后弥散作用下降.③HD-PBD治疗初始通过弥散和吸附的体外清除量分别为（15.6±5.6）mmol/min和（10.3±3.2）mmol/min,滤器使用4～6 h后作用下降.④HVHF以吸附清除为主,其中治疗初始吸附清除量最大,12h以后吸附清除量而滤过清除量相对恒定.⑤HD-PBD治疗初始的体外清除总量高于HVHF[（25.9±8.2）mmol/min vs（7.17±3.34）mmol/min,P＜0.05.结论 HD-PBD联合HVHF治疗对血清胆红素有明显降低作用,其清除机制主要为弥散和吸附,对流作用较小.