RT-PCR法检测尿液标本中麻疹病毒核蛋白(N)基因的临床应用及意义

目的探讨逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)直接从临床麻疹患者的尿液中检测麻疹病毒特异性核蛋白(Measles vi-rus nucleoprotein,MV-N)基因诊断价值。方法选取2010-2011年安徽省蚌埠市散发的15例临床确诊为麻疹的患者,采集尿液,提取RNA,用RT-PCR方法扩增麻疹病毒核蛋白的515 bp核苷酸片段。同时采集同一患者血清,进行MV-IgM抗体检测,并比较两种方法的阳性率。结果尿液RT-PCR法检测MV-N基因,15例患者中有14例扩增出阳性产物,阳性率为93.3%,高于血清MV-IgM抗体检测的阳性率60.0%(χ2=9.60,P=0.002)。结论麻疹病人尿液标本的RT-PCR检测可用于麻疹病毒的早期快速辅助诊断,特别是对于出疹初期的患者。同时对血清MV-IgM抗体阴性的病例进行此法复检,可弥补漏检。     

慢性咽炎治疗体会

慢性咽炎是咽部常见的慢性疾病,属于中医“喉痹”范畴。慢性咽炎病程长,常因感冒、劳累、讲话多而反复发作,患者有咽部不适感,时轻时重,如异物感、梗阻感、附着感,干燥灼热,发痒,疼痛,伴有咳嗽咳痰,当漱口进食时易引起恶心。从2011年2月至2012年7月笔者对20例患者进行辨证分型治疗,取得了较满意效果,现报告如下。     

2010～2012年呼吸道嗜血杆菌的分离及耐药性监测

目的了解2010～2012年蚌埠医学院第一附属医院呼吸道嗜血杆菌（Haemophilus）分布和耐药性变迁,为临床合理用药提供依据。方法用哥伦比亚巧克力平板培养基分离嗜血杆菌,卫星试验初步鉴定,嗜血杆菌鉴定卡（NH卡）确认鉴定菌株,纸片琼脂扩散法（Kirby～Bauer）做药敏试验并检测β-内酰胺酶。结果2010～2012年共分离出394株嗜血杆菌,其中流感嗜血杆菌126株（31．2％）,副流感嗜血杆菌268株（68．8％）,嗜血杆菌β-内酰胺酶的产生率为40．8％;流感嗜血杆菌对头孢呋辛钠、环丙沙星、氨苄西林、复方新诺明的耐药率较高并有逐年升高趋势,副流感嗜血杆菌对头孢呋辛钠、环丙沙星、左氧氟沙星、氨苄西林、复方新诺明也有明显的高耐药率和逐年升高的趋势。两种细菌对三代四代头孢菌素、加酶抑制剂青霉素和碳青霉烯类药物的耐药率明显较低。结论呼吸道流感嗜血杆菌的检出率低于副流感嗜血杆菌的检出率,治疗这类细菌的感染可首选三代四代头孢菌素和加酶抑制剂青霉素。临床微生物室应加强对呼吸道嗜血杆菌常规分离培养及药敏试验,为临床医生合理使用抗生素提供依据,降低嗜血杆菌的耐药率。     

某医院2012-2013年242株肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶及整合子耐药基因检测

目的 了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法 回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷伯菌对16种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松和头孢他啶耐药率较高,分别为76.86%、65.70%、63.64%、62.40%和59.92%;亚胺培南、丁胺卡那、厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,分别为17.77%、18.88%、18.88%和23.55%。PCR结果显示,ESBLs基因阳性155株,占64.05%,主要为TEM型和SHV型,两者均存在的菌株有114株,占产ESBLs基因菌株的73.55%(114/155)。其次为KPC基因86株,占35.54%;此外AmpC基因43株,占17.77%,全部为DHA型。整合子基因128株,占52.89%,以整合子1(intI-1)为主,共检出120株,占49.59%。结论 我院肺炎克雷伯菌耐药情况严重,主要的耐药基因型为TEM型、SHV型、KPC和intI-1。     

安徽省蚌埠市麻疹野毒株核蛋白基因检测及序列分析

目的:通过检测麻疹野毒株的基因型,分析安徽省蚌埠市麻疹病毒流行株的基因特征,为麻疹监测和防治提供依据。方法:选取2010～2011年蚌埠市散发的15例临床确诊为麻疹的患者,收集患者急性传染期的尿液标本,提取病毒RNA,用RT-PCR方法扩增麻疹病毒核蛋白基因羧基末端的515 bp核苷酸片段,对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,构建基因亲缘关系树。结果:15份麻疹患者尿液标本中有14份分离到麻疹野毒株;将其中3株麻疹野毒株的核蛋白(N)羧基末端515 bp核苷酸与Genebank中麻疹病毒的8个参考株进行基因同源性关系比较,与Genebank中公布的H1、H2基因型参考株Hunan.CHN93-7、Beijing.CHN94-1所对应的核苷酸序列的遗传距离分别为0.020～0.026和0.064～0.075;而与H1a参考株China93-2的遗传距离最近,为0.009～0.015;3株麻疹野毒株N羧基末端515个核苷酸的同源性为97.8%～98.9%;与H1参考株Hunan.CHN93-7、H1a参考株China 93-2和H1b参考株China 94-7的核苷酸同源性分别为97.4%～98.0%、98.5%～99.1%和96.5%～97.1%。结论:蚌埠市麻疹野毒株的优势基因型为H1a基因亚型。     

鄂尔多斯高原地区儿童、青少年屈光不正的调查分析

目的调查鄂尔多斯高原地区屈光不正的患病率及相关因素,从而了解地区人群的患病特征,更好地制定防治措施。方法2003年3月。2009年9月对鄂尔多斯高原地区4～18岁的儿童、青少年进行抽样调查,对所有样本的视力、验光、眼位、裂隙灯、眼底检查、眼病筛查、学生的学习情况、学生父母屈光状态及其分布进行调查分析。结果共有52444人接受检查,其中4～6岁16298人,屈光不正患病率12．5％;7～12岁13600人,屈光不正患病率35．1％;13～15岁11809人,屈光不正患病率57．5％,16～18岁10737人,屈光不正患病率78．4％;4组比较有统计学意义（P〈0．05）。屈光不正与年龄明显相关;学生屈光不正与父母的屈光状态具有相关性,比较有特异性和敏感性意义。结论随年龄增大屈光不正的患病率逐渐升高,影响因素主要有长时间近距离作业、遗传、环境因素等。