临床活体部分小肠移植术移植肠的处理

目的 报告我国首例活体小肠移植术的移植肠处理体会。方法 为１例１８岁男性超短肠综合征患放行了活体部分小肠移植术,供肠来自患的父亲（４４岁）,切取供体回肠１５０ｃｍ,ＵＷ液灌洗血管,将移植肠动、静脉车受体腹主动及及下腔静脉而吻合,移植肠近端与受体空肠近端行端端吻合,远端与受体空肠远端行侧端吻合,末端造口,术后给子抗排斥,抗感染,抗凝及营养支持等治疗。结果 术后管出现贫血,单纯疱疹病感染和急性排斥     

乳腺癌组织中bag-1、ER和PR的表达及意义

目的检测bag-1,ER和PR在乳腺癌组织中的表达与分布情况,探讨bag-1、ER和PR的表达水平在乳腺癌发病、早期诊断方面的价值。方法采用免疫组化SABC法观察了100例乳腺癌与35例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1,ER和PR的表达与分布情况。结果bag-1在乳腺癌组织中,乳腺良性肿瘤中,正常乳腺组织中阳性表达率分别为85.0%,11.5%,10.0%,差异明显(P<0.05)。ER在乳腺癌组织中,乳腺良性肿瘤中,正常乳腺组织中阳性表达率分别为61.0%,28.6%,30.0%,差异明显(P<0.05)。PR在乳腺癌组织中,乳腺良性肿瘤中,正常乳腺组织中阳性表达率分别为64.0%,31.5%,30.0%,差异明显(P<0.05)。结论在乳腺癌发病过程中,bag-1,ER和PR可能起着重要的作用,同时检测bag-1、ER和PR的表达与分布情况,在乳腺癌的早期诊断方面有一定价值。     

VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)在乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中的表达,探讨VEGF-C与乳腺癌淋巴结转移及预后的关系。方法选用10例正常乳腺组织、30例乳腺良性肿瘤及60例乳腺恶性肿瘤标本,以免疫组织化学及半定量反转录PCR(RT-PCR)检测VEGF-C的表达。结果在乳腺恶性肿瘤组织中,VEGF-C阳性表达率为46.7%,明显高于正常乳腺(10.0%)和乳腺良性肿瘤组织(13.3%)(P<0.01);乳腺癌中VEGF-C的阳性表达率为48.2%,明显高于乳腺叶状囊肉瘤(25.0%)(P<0.01);在伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中,VEGF-C的阳性表达率(55.0%)明显高于没有淋巴结转移的乳腺癌组织(30.0%)(P<0.01)。结论VEGF-C在乳腺癌组织中表达明显增高,并与乳腺癌的淋巴结转移显著相关,可作为乳腺癌转移、复发的预测指标之一。     

乳腺癌组织中E-cadherin的表达与外周血微转移的相关性及临床意义

目的检测乳腺癌组织中E-cadherin的表达及患者外周血微转移的发生,探讨二者的相互关系及临床意义.方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测15例乳腺良性肿瘤患者及60例乳腺癌患者外周血CK-20及乳腺组织中E-cadherin mRNA的表达.结果 15例乳腺良性肿瘤组织中,均有E-cadherin阳性表达（100%）,而60例乳腺癌组织中,E-cadherin阳性表达23例（38.3%）,二者差异显著（P〈0.01）;CK-20在乳腺良性肿瘤患者外周血中未见表达.在60例乳腺癌患者外周血中,检出CK-20阳性表达28例（46.7%）,E-cadherin在相应癌组织中的阳性表达率为14.3% （4/28）,32例外周血CK-20阴性的乳腺癌病例中,E-cadherin的阳性表达率为59.3%（19/32）,二者差异显著（P〈0.01）.结论乳腺癌组织中E-cadherin的低表达与外周血高转移率显著相关,提示E-cadherin的表达缺失或低表达可能是导致乳腺癌高转移的因素之一,可作为临床判断预后的参考指标.     

人胰腺核糖核酸酶的基因克隆、蛋白表达与活性测定

目的：构建人胰腺核糖核酸酶（hpRNase）原核表达载体、获得纯化hpRNase蛋白,为构建乳腺癌单链免疫毒素奠定基础。方法：针对编码hpRNase成熟蛋白基因的cDNA序列设计相应的引物,通过反转录PCR技术,从一例胰腺切除患者的组织标本中,扩增出编码hpRNase成熟蛋白的cDNA序列,亚克隆入表达载体pPROEX—HTb;在大肠杆菌BL21中经1PTG诱导融合蛋白表达,并用镍离子交换树脂进行蛋白纯化;通过RNA水解实验验证hpRNase重组蛋白的活性。结果：经PCR、酶切、测序等方法鉴定,hpRNase cDNA正确克隆人pPROEX—HTb表达载体;IPTG可诱导载体表达分子量约20kD的蛋白产物,经Westerm blot验证可与抗hpRNase抗体发生特异性反应;经镍离子交换树脂纯化后的重组蛋白可有效降解RNA。结论：成功构建hpRNase原核表达载体,并获得有RNA降解活性的hpRNase重组蛋白,为进一步构建乳腺癌单链免疫毒素奠定了基础。     

体质量指数与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性分析

目的:分析体质量指数（body mass index,BMI）与甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）临床病理特征的相关性。方法:回顾性分析2017年1月至2018年6月于西京医院甲乳血管外科行手术的829例PTC患者临床资料,并将入组患者根据BMI的不同分为四组:较轻组（BMI＜18.5 kg/m2）、正常组（18.5≤BMI＜25 kg/m2）、超重组（25≤BMI＜30 kg/m2）及肥胖组（BMI≥30 kg/m2）。通过单因素分析及多元逻辑回归分析BMI与PTC临床病理特征相关性。结果:不同BMI组PTC患者的年龄、性别以及高血压病史之间具有统计学差异（P<0.001）。超重组患者与其他组相比平均年龄较大,肥胖组患者男性居多。单因素分析显示,BMI与肿瘤多灶性、BRAF V600E基因突变以及TNM分期显著相关（P<0.05）,而与病灶大小、病灶分布、是否侵犯包膜以及淋巴结转移数目和位置无关（P>0.05）。BMI正常组患者的肿瘤发生灶多为单灶（60.3%）,而非正常组患者多灶的发生率显著增加（P=0.040）。随着BMI的增长,BRAF V600E基因突变率显著提高（P=0.001）。经多元逻辑回归分析的校正,PTC患者的TNM分期与BMI无统计学差异（P>0.05）,肿瘤多灶性以及BRAF V600E基因突变仍与BMI显著相关。结论:在PTC患者中,非正常BMI组患者肿瘤多灶的发生率较正常BMI组显著增加,且BRAF V600E基因突变率与BMI呈正比,而除多灶性以外的侵袭性病理特征与BMI之间未发现相关性。     

miR-34c-3p与M2型肿瘤相关巨噬细胞在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的:检测miR-34c-3p与M2型肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophage,TAM)在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中的表达,并探讨其在乳腺癌发病中的意义。方法:选择2017年2月至2018年1月于西京医院就诊的68例TNBC患者作为实验组(A组),以同期就诊的70例乳腺纤维腺瘤患者作为对照组(B组)。采用Real-time RT-PCR 检测组织标本中miR-34c-3p的表达;流式细胞检测M2型TAM的表达;ELISA法检测血清中IL-10的表达。并进一步分析miR-34c-3p的表达与乳腺癌M2型TAM及血清IL-10水平的相关性。结果:A、B组miR-34c-3p的相对表达量分别为0.84±0.08、1.29±0.71,A组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A组M2型TAM(CD68+CD163+)细胞比例显著升高(P<0.05)。A组血清IL-10的表达［(19.69±4.93) pg/ml］较B组［(17.26±3.51) pg/ml］显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。TNBC组织中miR-34c-3p的表达与M2型TAM比例及血清IL-10表达均呈显著负相关(r=-0.508,r=-0.656,P<0.05)。结论:TNBC组织中miR-34c-3p的表达下调,M2型TAM比例及血清IL-10表达均显著升高,促进TNBC进展。     

USP41促进MCF7乳腺癌细胞恶性表型的作用及机制

目的 探索USP41在乳腺癌组织样本及MCF7乳腺癌细胞中的表达情况,及其与恶性表型的相关性和潜在作用机制。方法 采用Western blot法、qPCR法检测USP41在MCF7细胞株及临床组织样本中的表达情况。随后通过CCK-8、克隆形成实验、Transwell、Western blot以及CoIP-MS等细胞生物学方法评价USP41对MCF7的作用及机制。结果 USP41在乳腺癌样本及MCF7细胞株的表达显著高于癌旁组织。干扰USP41可以显著地抑制细胞的增殖、克隆形成及迁移能力,促进细胞凋亡。CoIP结果显示,USP41可以与活化蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,RACK1)直接相互作用,且RACK1在癌组织的表达显著高于癌旁。干扰RACK1可抑制MCF7细胞增殖、克隆形成及迁移能力。结论 USP41在MCF7中高表达,且通过上调RACK1促进MCF7乳腺癌细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡。     

VP22融合型显性负性突变体抑制乙肝病毒复制

目的: 了解VP22融合型显性负性(DN)突变体对抑制乙肝病毒(HBV)复制的作用. 方法: 将VP22全长及其不同区段融合于HBV核心蛋白(HBc)的C端,克隆入pcDNA3.1(-)构成DN突变体真核表达质粒. 转染HepG2.2.15细胞后,免疫荧光鉴定DN突变体在细胞内的表达,并以培养上清HBV表面抗原(HBsAg)的浓度为指标,观察DN突变体对HBV病毒复制的抑制效应. 同时以MTT比色法观察转基因的表达对宿主细胞生长状态的影响. 结果: VP22及其不同区段构建的DN突变体可在HepG2.2.15细胞中进行表达,且对宿主细胞无毒性. VP22融合型DN突变体可有效地抑制HBV的复制,具有蛋白转导特性的DN突变体比无转导特性的DN突变体具有更强的抗病毒能力. 其中VP22全长构成的DN突变体具有最强的抑制效应,可使上清HBsAg浓度下降81.94%. 结论: VP22融合型DN突变体可以增强DN突变体对HBV复制的抑制.     

活体小肠移植术后饮食管理及肠吸收功能的恢复

目的:国内首例长期生存的活体小肠移植获得成功,而活体小肠移植术后的肠吸收功能、患营养状况及饮食管理需要做长期、动态、连续的观察分析和评价.方法:从1999-05-20/2004-05-20对国内首例活体小肠移植术后患饮食实行科学化管理、通过对消化道症状及营养指标的观察,移植肠吸收功能的监测、免疫抑制剂FK506全血质量浓度测定,全面观察移植肠的吸收功能的恢复.结果:至今患健康生存5年余,自由进食,并参加工作,排成形便,每日一两次,体质量维持在56～58kg,血色素在120 g/L以上,血清总蛋白、白蛋白正常.D-木糖吸收试验,尿中排出率在28%,FK506血药浓度维持在5.0～6.0 ng/L,吸收功能稳定.全消化道钡餐检查,肠蠕动良好,无狭窄性改变.结论:活体部分小肠移植是治疗短肠综合征的一种理想方法.移植肠功能恢复可使患获得良好的生活质量.