绞股蓝总苷抑制血管平滑肌细胞去分化作用的miRNA研究

目的 研究绞股蓝总苷（GP）抑制血管平滑肌细胞（VSMC）去分化过程中微小核糖核酸（miRNA）表达谱的变化以及目标miRNA。方法 miRNA芯片检测胆固醇（CH）诱导的去分化VSMC以及GP作用后细胞miRNA的表达差异,Real-time PCR验证芯片结果。转染目标miR-150模拟物以及抑制剂,Real-Time PCR检测转染效率,Western bolt检测miR-150转染对GP抑制去分化过程中细胞表型变化的影响。结果 CH诱导细胞去分化以及GP干预过程中miRNA表达差异都有显著变化。与对照组相比,CH组上调22个、下调7个miRNA。与CH组相比,GP组上调6个、下调13个miRNA。GP干预CH诱导细胞去分化过程中,转染miR-150 mimic后细胞分化型标志蛋白SM-actin的表达降低,去分化标志蛋白Epiregulin表达增高;而miR-150 inhibitor转染组蛋白表达变化与之相反。提示GP抑制VSMC去分化作用在过表达miR-150后被降低,干扰miR-150表达后被加强。结论 CH诱导VSMC去分化以及GP干预后细胞miRNA差异表达明显,GP...     

射频消融在脾脏疾病中的应用现状

射频消融（radiofrequency ablation,RFA）是一种良好的消融、凝血工具,较早应用于肝外科疾病手术,其作用已经从单纯消融肝脏肿瘤扩展到无血肝切除。然而RFA在脾脏疾病中应用相对局限,其临床价值似乎被低估。本文总结RFA在脾脏各种疾病中的应用,以期为临床拓展思路,为RFA在脾脏疾病的应用提供参考。     

佛波酯对LPS／IFN-γ诱导的巨噬细胞活性氧产生的影响

目的研究佛波酯（PMA）对脂多糖／γ-干扰素（LPS／IFN-γ）诱导的巨噬细胞RAW264．7活性氧产生的影响。方法于实验前0、3、6、9、12、18h,用1μg／mL的LPS和100U／mL IFN-γ诱导处于对数生长期的RAW264．7细胞,采用蛋白质印迹技术检测细胞中一氧化氮合酶（iNOS）的表达;对经LPs／IFN-γ诱导12h的RAW264．7细胞加入终浓度为200ng／mL的PMA,应用激光共聚焦显微技术观察RAW264．7细胞中活性氧的产生。结果LPS／IFN-γ可使RAW264．7细胞的诱导型iNOS表达增加,同时PMA可刺激经LPS／IFN-γ诱导后的RAW264．7细胞产生呼吸爆发,细胞的荧光强度较未刺激组增强（P〈0．01）。结论PMA可促使经LPS／IFN-γ诱导的RAW264．7细胞产生大量活性氧。     

金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:研究金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞(hU-VEC)生长的影响及机制。方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度金雀异黄素(0·1、1、10和50μmol)对hUVEC作用24h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其对hUVEC生长的影响,流式细胞术检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2的表达,探讨金雀异黄素诱导hU-VEC增殖的可能机制。结果:金雀异黄素能诱导hUVEC的增殖(P<0·05或P<0·01),其效应随浓度的增加而增强;细胞周期显示S期细胞明显增加;金雀异黄素促进Bcl-2的表达,抑制Fas的表达。结论:金雀异黄素能诱导hUVEC增殖,其机制可能与上调Bcl-2及下调Fas的表达有关。     

大豆异黄酮对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的机制尚未阐明,可能与活性氧(ROS)生成、细胞因子参与、肝细胞内钙离子超载、细胞凋亡等有关[1].大豆异黄酮(SI)是人们公认的抗氧化剂及抗炎药物.研究结果表明,其对心肌、脑等器官缺血再灌注损伤具有保护作用[2-3].但对HIRI是否具有保护效应,鲜见报道.本研究通过动物实验观察了SI对HIRI的保护作用.     

氧化型低密度脂蛋白对平滑肌细胞核因子-kB激活的影响

目的：观察氧化型低密度脂蛋白对人平滑肌细胞核因子-kB激活的影响，探讨氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化机制。方法：以体外培养的人脐动脉平滑肌细胞为对象，采用免疫细胞化学法测定氧化型低密度脂蛋白与核因子-kB亚单位p65核移位的时间效应与浓度效应关系。结果：在氧化型低密度脂蛋白刺激下，平滑肌细胞中0．5h即出现核因子-kB核移位，2h达高峰，4h仍持续可见。不同浓度(12．5，25，50及100mg/L)氧化型低密度脂蛋白均可诱导平滑肌细胞中核因子-kB核移位，在一定剂量范围内，氧化型低密度脂蛋白的浓度越大，核因子-kB核移位越明显，尤以50mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用最明显。结论：氧化型低密度脂蛋白可刺激平滑肌细胞中核因子-kB的激活，进一步提示氧化型低密度脂蛋白／核因子-kB信号途径在促进动脉粥样硬化发病机制中起重要作用。     

单核细胞趋化蛋白-1诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡

目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(hUVEC)凋亡的影响.方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度MCP-1(0.1,1.0,10,100μg/L)对其作用24,48h;Annexin V/PI双染细胞,流式细胞仪观察内皮细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测细胞染色体"DNA ladder"的形成.结果:MCP-1能诱导hUVEC的凋亡,其效应随浓度和时间的增加而增强(P＜0.01);Annexin V/PI显示凋亡细胞明显增加;细胞DNA呈明显的"DNAladder".结论:MCP-1能诱导hUVEC凋亡.