糖尿病视网膜病变血栓形成相关因子的研究进展

糖尿病视网膜病变( diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常见而严重的微血管并发症,在Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病中发病率都很高,是糖尿病患者视力丧失的主要原因,已成为四大主要致盲眼病之一.DR的病理特征为视网膜微血管瘤破裂出血和视网膜新生血管形成,这也是早期诊断的可靠体征.     

人源化Fab段噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台。方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行富集筛选。结果:最终构建的抗体库库容约为8.4×107,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率是70%,DNA测序分析证实抗体重链属IgG亚类,轻链为λ链。用IL-2和地高辛进行三轮筛选,抗体库均得到了不同程度的富集。结论:成功构建了一个天然的人源化噬菌体抗体库,可用于下一步胰淀素人源化抗体的筛选、纯化和表达。     

老年2型糖尿病患者基础-餐时胰岛素治疗剂量

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)患者的基础-餐时胰岛素剂量。方法对169例住院老年T2DM患者,随机分每日多次皮下注射(MDI)组89例和持续皮下胰岛素输注(CSII)组80例,比较两组胰岛素量、基础量-餐前量及比例。结果血糖稳定达标后,MDI组胰岛素另为(35.88±9.54)U/d、(0.57±0.17)U·kg-1·d-1,基础量和餐前量分别占(49.70±8.69)%和(50.30±8.69)%,低血糖发生率6.47%。CSII组胰岛素量为(32.23±9.71)U/d、(0.51±0.19)U·kg-1·d-1,基础量和餐前量分别占(68.30±7.75)%和(31.70±7.75)%,低血糖发生率1.25%。两组差异显著(P<0.05)。结论老年T2DM患者CSII组比MDI组基础量显著增加,胰岛素总量减少,达到控制血糖和减少低血糖的目的。     

人源Fab噬菌体抗体库的构建与抗精氨酸加压素抗体的筛选

目的:构建人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗精氨酸加压素特异性抗体并进行初步鉴定。方法:从18位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA。利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,将其克隆至噬菌粒载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab噬菌体抗体库。以固相化的精氨酸加压素为靶抗原对抗体库进行五轮筛选后,随机挑取50个单克隆进行phage-ELISA检测,阳性克隆行DNA测序分析。结果:成功构建库容为2.4×108的噬菌体抗体库,从中筛选到6株阳性克隆能够与精氨酸加压素特异性结合,其中阳性值最高的C4克隆行DNA测序分析证实其重链属IgG亚类,轻链为λ链。结论:构建大容量人源天然Fab抗体库,从中获得了特异性抗精氨酸加压素人源Fab抗体片段,有望为临床上精氨酸加压素的快速检测技术的建立奠定基础。     

人源Fab段噬菌体抗体库的构建及抗IL-4抗体的初步筛选

[摘要] 目的： 构建大容量人源Fab噬菌体抗体库及筛选特异性抗体 方法：采集18位成人外周血,分离淋巴细胞,细胞室培养淋巴细胞。提取总RNA,反转录成cDNA,用PCR扩增Fab段抗体基因,用试剂盒回收纯化抗体基因,插入载体pComb3XSS内,构建人源Fab噬菌体抗体库,用限制性内切酶鉴定基因的插入。用抗原IL-4对抗体库进行筛选。五轮筛选后,随机挑取30个单克隆用Phage ELISA和酶切进行检测。并且对阳性克隆DNA的序列进行测定。结果：构建的人源Fab噬菌体抗体库库容为2.4×108 ,酶切鉴定插入基因片段大小正确,ELISA鉴定阳性克隆有抗原结合活性。测序结果证实为为人免疫球蛋白可变区基因。结论：构建了大容量人源Fab噬菌体抗体库,从中筛选出抗IL-4人源Fab抗体,有望为获得其他抗体提供源泉,为疾病的诊断与治疗打下基础     

桥本甲状腺炎甲状腺功能减退患者血清中TRAb、TSAb和TSBAb的表达及其意义

目的 探讨桥本甲状腺炎甲状腺功能减退(HT甲减)患者血清中促甲状腺素受体抗体(TRAb)、甲状腺刺激性抗体(TSAb)和甲状腺刺激阻断性抗体(TSBAb)表达的变化及其意义。方法 收集133例HT甲减患者(HT甲减组)和125例健康体检者(对照组)的临床资料,检测研究对象血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)和TRAb的水平并进行比较。检测HT甲减TRAb阳性组(B组)、HT甲减TRAb阴性组(C组)和健康阴性组(A组)血清中TSAb和TSBAb的水平并进行比较。Pearson相关分析分析HT甲减患者血清中TSAb、TSBAb表达水平与血清中FT3、FT4、TSH、TRAb水平的关系。结果 与对照组相比,HT甲减组血清中TRAb表达水平升高(Z=-5.434,P<0.05)。与A组相比,B组血清中TRAb、TSBAb表达水平和TSBAb阳性表达率升高(Z=6.228,F=17.985,t=7.767,χ²=15.273,P<0.05);与C组相比较,B组血清中TRAb、TSBAb表达水平和TSAb、TSBAb...