儿童周围血单个核细胞端粒酶活性的检测在诊断急性淋巴细胞白血病中的临床意义

目的：寻求一种利用周围血来检测微量的白血病细胞的方法。方法：采用TRAP－ELISA法检测周围血单个核细胞（MNC）端粒酶活性。结果：急性淋巴细胞白血病（ALL）病例组周围血MNC端粒酶活性表达阳性率为92.11%，正常对照组为2.63%。结论：TRAP－ELISA法检测周围血MNC端粒酶活性可作为诊断ALL一种简单、敏感的方法。     

巨噬细胞在血吸虫病肝纤维化过程中的作用研究进展

血吸虫病肝纤维化过程中,促纤维生成和促纤维溶解因素不平衡导致细胞外基质大量沉积。肝脏巨噬细胞和星状细胞的激活是肝脏纤维化的两个关键事件,两者形成一个复杂的调节纤维化平衡的网络。本文对巨噬细胞分泌的纤维化相关细胞因子的功能及其对星状细胞的激活、不同表型和不同激活状态的巨噬细胞在肝纤维化过程中的作用进行了综述,旨在为免疫调节防治肝纤维化研究提供参考。     

IL-13及其受体在血吸虫病肝纤维化中的作用

血吸虫病肝纤维化是以胶原蛋白为主的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的合成与降解失衡导致胶原过度沉积的结果,其纤维化过程主要是由多条信号转导途径和一系列的细胞因子网络共同调控的.近几年国内外研究发现白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)在血吸虫病肝纤维化形成和发展过程中起着重要作用.白细胞介素-13受体α1(interleukin-13 receptorα1,IL-13Rα1)作为IL-13功能受体,在肝星状细胞(hapatic stellate cells,HSC)膜表面起促纤维化作用,而IL-13Rα2作为IL-13诱饵受体(decoy receptor),起抑制纤维化的作用.此外,IL-13还可通过替代激活途径激活巨噬细胞发挥促纤维化作用.总之,IL-13及其受体与血吸虫病肝纤维化关系的研究目前已成为热点之一.该文就IL-13及其受体在血吸虫病肝纤维化中作用的最新研究进展做一综述.     

sIL-13Rα2抑制IL-13介导的NIH-3T3胶原Ⅰ的合成及血吸虫病肝组织中sIL-13Rα2／IL-13的表达

目的研究在成纤维细胞NIH-3T3中IL-13可溶性受体slL-13Rα2对IL-13的抑制作用,为进一步研究sIL-13Rα2对日本血吸虫感染小鼠体内肝纤维化的治疗作用奠定基础。方法用ELISA和RT-PCR检测感染日本血吸虫的BALB／c小鼠0、6、8、10和12w不同感染时期肝脏组织IL-13和sIL-13Rα2表达和转录水平。构建sIL-13Rα2表达质粒转染成纤维细胞NIH-3T3,用IL-13（50ng／mL）刺激转染后成纤维细胞NIH-3T3,用RT—PCR和Western blotting分别检测该细胞分泌的Ⅰ型胶原。结果感染后小鼠肝脏肉芽肿组织中IL-13和sIL-laRα2的蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐增高,第8wIL-13水平达到高峰（16．1586pg／mL）,随后逐渐降低但仍高于正常水平（3．4146pg／mLP-0．017）;第10wsIL-laRα2的分泌达到高峰（4827．426pg／mL）,以后逐渐减低,但仍高于正常水平（4057．112pg／mL P=0．021）。IL-13和sIL-laRα2的mRNA转录趋势和ELISA检测结果相符合,均随感染时间的延长而增高,分别在第8w和第10w达到最高峰,随后逐渐降低但仍高于正常组小鼠（P=0．033;P=0．025）。实验组（sIL-laRα2—2mg／mL）Ⅰ型胶原mRNA转录水平较正常对照组减低8．83％（P=0．012）;蛋白水平较对照组减低7．41％（P=0．031）。结论sIL-laRα2在NIH-3T3细胞中对IL-13有抑制作用,提示sIL-laRα2在治疗血吸虫病肝纤维化中具有潜在价值。     

重组Sj14-3-3,SjGST及mIL-12/聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)缓释微球对小鼠免疫保护性的研究

目的研究聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球给药系统在血吸虫病分子疫苗中的应用,并探讨rSj14-3-3,rSjGST及mIL-12作为疫苗的协同作用,及mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th)在抗血吸虫病中的作用。方法从pET28a/Sj14-3-3和GST重组质粒中诱导表达rSj14-3-3及rSjGST,过柱纯化。构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)mIL-12,并共同包入PLGA缓释微球。对制备的微球进行体外释放,观察其释放速度。分组免疫BALB/c小鼠,进行尾蚴攻击感染实验。在攻击感染6w后,剖杀小鼠,计算各组的减虫率。结果各组的减虫率:单独rSj14-3-3组为27.6%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12组34.9%,rSj14-3-3+PcDNA3.1(+)mIL-12PLGA微球组37.5%,rSj14-3-3与rSjGST混合后+PcDNA3.1(+)mIL-12PLGA微球组38.8%;各组减卵率分别为(按以上组序)35.3%,49.1%,50.5%,和43.1%。结论PLGA微球给药系统可诱导并调节体液与细胞免疫从而增强了疫苗的抗感染,抗生殖作用。但rSj14-3-3和rSjGST抗原之间未表现出协同作用。mIL-12刺激机体产生CTL和辅助性T细胞(Th),在BALB/c鼠抗血吸虫攻击感染发挥作用,增强了疫苗保护作用。     

26例儿童幽门螺旋菌胃炎的研究

本文对26例有慢性上消化道症状的3岁～12岁患儿作了胃镜检查、胃粘膜活检HP试纸检测及ELISA法抗HP抗体测定,以了解慢性胃炎患儿HP的感染情况及两种HP检查方法之间的统计学差异。现报告如下。     

小鼠IL-13Rα2胞外区基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆并在原核表达载体pET-28a中表达小鼠IL-13受体α2(sIL-13Rα2)胞外区基因。方法利用小鼠3T3细胞总RNA,逆转录为cDNA,设计引物,常规PCR法扩增出小鼠sIL-13Rα2基因,将PCR产物克隆入pMD18-T载体,经双酶切及测序鉴定后,再亚克隆入pET-28a,构建重组质粒pET-28a/sIL-13Rα2,并转化到大肠杆菌BL21感受态细胞。IPTG诱导表达后表达产物经Western blot鉴定。结果PCR扩增产物与预期大小相符合,重组质粒经双酶切鉴定及基因序列测定表明构建正确;sIL-13Rα2蛋白表达以包涵体形式存在,可与山羊抗小鼠sIL-13Rα2单克隆抗体发生特异性反应,相对分子质量约为36 ku。结论成功原核表达sIL-13Rα2基因,为进一步探讨sIL-13Rα2在血吸虫病肝纤维化过程中的调节作用奠定了基础。     

新生儿颅内出血CT临床分析

本文对疑似有新生儿颅内出血的患儿进行头颅CT检查,结果在240例有不同类型的颅内出血患儿中,蛛网膜下腔出血发生率最高,为76.7％。并且发现,产伤及脑缺氧是颅内出血的主要原因。临床上,硬膜下出血、蛛网膜下腔出血多表现为兴奋,脑实质出血多表现为抑制。     

重组果糖二磷酸醛缩酶SjLAP和亮氨酸氨基肽酶SjFBPA用于日本血吸虫病的诊断和疗效考核的评价(英文)

目的评价重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和重组果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)抗原用于诊断人血吸虫感染以及疗效考核的价值。方法异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET-28a-rSjLAP/BL21和pET-28a-rSjFBPA/BL21表达目的蛋白,组氨酸标签亲和纯化柱纯化rSjLAP和rSjFBPA蛋白。88只BALB/c雌性小鼠随机分为4组,A、B和C组(各21只小鼠),D组(25只小鼠)。A、B和C组分别感染5、15和25条日本血吸虫尾蚴。D组为不感染对照组,在实验的第1天全部处死。A、B和C组在感染后第3、7、10、14、20、30和60天,分别处死小鼠3只,采眼球血制备血清,检测其抗体水平。采用单独或联合rSjLAP和rSjFBPA为抗原,ELISA法检测小鼠血清、急性血吸虫病(38份)和慢性血吸虫病患者(96份)血清中的抗体,以健康人(90份)血清为对照,同时检测华支睾吸虫病(33份)、卫氏并殖吸虫病(40份)和钩虫病患者(37份)血清,并检测急性血吸虫病患者吡喹酮治疗(60 mg/kg,2次/d×2 d)后1年的血清(36份)、慢性血吸虫病患者吡喹酮治疗(剂量,疗程同前)后1年...     

芍药苷对小鼠巨噬细胞产生TGF-β1的影响

目的 探讨芍药苷（paeoniflorin,PAE）对血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）刺激小鼠腹腔巨噬细胞（PMs）产生转化生长因子β1（TGF-β1）的影响。 方法 研磨法制备SEA,分别加入含有小鼠PMs的培养板、培养瓶及培养皿中,培养24 h,ELISA法测定TGF-β1含量,RT-PCR检测PMs内TGF-β1基因的表达,Western blotting检测PMs内TGF-β1蛋白的表达;在含PMs的培养瓶和培养皿中分别加入10 mg/L SEA 5 ml,培养12 h,再分别加入不同浓度的PAE（0、7.5、15、30、60及120 mg/L）,继续培养12 h和24 h。RT-PCR与蛋白质印迹（Western blotting）分别检测PAE对SEA刺激的PMs内TGF-β1基因与蛋白的表达。 结果 10 mg/L的SEA可明显刺激PMs产生TGF-β1（235.86±3.43 ng/L）,PAE呈浓度依赖性地抑制TGF-β1 mRNA的表达（r=-0.827,P＜0.01）和TGF-β1蛋白的表达（r=-0.952,P＜0.01）。结论 PAE能抑制SEA刺激的PMs产生TGF-β1。