肝癌组织和血清中钙囊素的表达及其意义

目的 研究人肝癌组织及血清中钙囊素(S100A11)的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学法检测46例肝癌及其癌旁组织中S100A11表达,比较肝癌与癌旁组织中S100A11的阳性率,分析肝癌组织中S100A11表达水平与各临床参数之间的关系;同时检测肝癌(62例)、肝硬化(32例)、慢性肝炎(30例)患者及健康体检者(28名)血清中S100A11浓度,比较S100A11浓度与甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)诊断肝癌的灵敏性及特异性.结果 S100A11在肝癌组织中的表达阳性率(78.3%)显著高于癌旁组织(19.6%,P<0.01),其表达水平与分化程度相关,分化程度越低表达水平越高.根据ROC曲线,当确定诊断界值为7.3μg/L时,S100A11在肝癌患者血清中的阳性率为30.6%,明显高于肝硬化、慢性肝炎及健康人(P值均<0.05).肝癌患者血清中S100A11与AFP、GGT-Ⅱ均无相关性,联合检测三项指标对肝癌诊断有互补性,可使诊断敏感性提高至84.5%.结论 S100A11可能与肝癌的发生发展有关.联合检测S100A11与AFP和GGT-Ⅱ可提高对肝癌的诊断敏感度.

Abstract：

Objective To explore the expression of calcium binding protein (S100A11) and its clinical significances in human hepatocellular carcinoma (HCC) tissue and blood plasma. Methods The expressions of S100A11 in 46 cases of HCC tissues and their paracancerous tissues were detected by immunohistochemistry. The relationship between S100A11 expression level in HCC tissues and clinical parameters was analyzed. The S100A11 expression levels in blood plasma of HCC patients (62 cases), liver cirrhosis patients (32 cases), chronic hepatitis patients (30 cases) and healthy subjects (30 cases) were detected. The sensitivity and specificity of S100A11, alpha fetoprotein (AFP) and γ-glutamyl transpeptidase Ⅱ (GGT-Ⅱ ) in HCC diagnosis were compared. Results The positive rate of S100A11 in HCC tissue (78. 3%) was significantly higher than that in paracancerous tissues (19. 6%) (P<0. 05). The expression level was correlated with the degree of differentiation, the lower differentiation degree with the higher expression level. According to ROC curve, if the cutoff points for diagnosis was set at 7. 3 μg/L, the positive rate of S100A11 in HCC patients blood plasma was 30. 6% , which was significantly higher than that in the blood plasma of patients with liver cirrhosis, patients with chronic hepatitis and healthy persons (P<0. 05). There was no correlation between S100A11 and AFP or GGT-Ⅱ in the blood plasma of HCC patients. These three indicators were complementary in HCC diagnosis, and the diagnostic sensitivity increased to 84.5% with combined detection. Conclusions S100All may be related to HCC genesis and development. The HCC diagnostic sensitivity may be increased with combined detection of S100All ,AFP and GOT- Ⅱ.     

抗放射性肺炎方治疗大鼠放射性肺损伤的实验研究

目的：研究抗放射性肺炎方（ARPD）剂量与疗效的关系,并观察其毒副反应。方法：以不同剂量ARPD对照光（6MvX线20Gy单次胸部照射）后的SD大鼠行灌胃治疗,照射后第7、14、30、45、60天各组随机抽取4只处死取材,对肺组织行病理检查,测定肺间质细胞数、肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（HP）含量。另按大鼠常规剂量的15倍进行急性毒性试验,分别按常规剂量的1倍、2.5倍及5倍进行亚急性毒理试验。结果：单纯照光组大鼠后期肺组织大量胶原纤维增生,SOD明显下降,MDA及HP明显上升,而ARPD小剂量组仅轻度增生,ARPD大、中剂量组增生不明显。SOD、MDA及HP在ARPD大、中剂量组的改善均优于小剂量组。ARPD的LD50大于531g/kg,亚急性毒性试验未见血液学、生化指标及主要脏器病理学异常。结论：ARPD通过其抗氧化机制,发挥抗炎和抗纤维化作用,安全,常规剂量的2.5倍已达到最大疗效。     

血清半乳糖凝集素3对胰腺癌的诊断价值

目的 运用时间分解免疫荧光(TRFIA)法检测血清半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3)水平,并探讨Gal-3对胰腺癌的诊断价值.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测血清Gal-3的TRFIA,探讨最佳实验条件.在最适条件下检测胰腺癌、胰腺良性占位、胰腺炎患者及健康对照者血清Gal-3水平,并联合检测血清CEA及CA19-9水平.结果 TRFIA法检测血清Gal-3的线性为0～100μg/L,批内变异系数(CV)≤6.45％,批间CV≤8.68％,平均回收率为106.6％.胰腺癌患者血清Gal-3水平为4.93(0.85～23.80) μg/L,明显高于胰腺良性占位者的2.83(2.17～4.06) μg/L、胰腺炎患者的2.62(0.55 ～9.76) μg/L和健康者的1.88(0.59 ～ 3.94) μg/L(P值均＜0.05).以3.77 μg/L为界,其诊断胰腺癌的敏感性为75.5％,特异性达90.9％.Gal-3与CEA及CA19-9水平均无相关性(r=0.1321,P=0.3761；r =0.0920,P=0.5384),Gal-3联合CEA或CA19-9检测,对胰腺癌的诊断敏感性可提高到92％.结论 TRFIA法检测血清Gal-3具有较好的敏感性和稳定性；Gal-3有望成为新的胰腺癌标记物.     

抗放射性肺炎方毒理学研究

目的观察抗放射性肺炎方(ARPD)对SD大鼠的急性毒性及亚急性毒性反应。方法采用最大给药量法(15倍常规剂量)测定ARPD对SD大鼠的急性毒性试验,1d内分2次给完,观察7d。分别以ARPD常规剂量的1倍、2.5倍及5倍对SD大鼠进行亚急性毒理试验,每日灌胃1次,连续45d。观察SD大鼠血生化指标、脏器系数与形态变化。结果 ARPD的半数致死量(LD50)大于531g/kg;急性和亚急性毒性试验均未见血生化指标及主要脏器病理学异常。结论 ARPD无明显毒性。     

NMBS-TRFIA法检测血清S100A11对胰腺癌的诊断价值

目的通过建立纳米磁珠分选联合时间分辨免疫荧光测定(nanomagicbeabs sorting-time resolved fluoroimmuno assay,NMBS-TRFIA)检测血清钙囊素(S100A11)的水平,同时评价其对胰腺癌的诊断价值。方法选择88例胰腺癌、50例急性胰腺炎、10例胰腺囊肿患者和20例健康体检者作为研究对象。先采用S100A11抗体耦联的纳米磁珠对人外周血清进行分选,再用TRFIA法检测S100A11浓度。应用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)确定诊断胰腺癌的界值,以评价诊断胰腺癌的敏感度和特异度。结果 NMBS-TRFIA法检测S100A11在6.08~500ng/ml范围内呈线性关系,批内CV≤6.35%,批间CV≤7.12%,平均回收率为104.7%。胰腺癌、急性胰腺炎和胰腺囊肿患者血清S100A11水平分别为185.53±161.19,106.06±113.83和68.99±47.83ng/ml,与正常对照组(37.98±25.14ng/ml)比较,差异均有统计学意义(t=-8.065,-3.375,-2.266,均P0.01);胰腺癌患者明显高于急性胰腺炎、胰腺囊肿患者(均P0.05)。根据ROC曲线,ROCAUC=0.985(95%CI:0.972~0.997),诊断胰腺癌的最佳界值为89.5ng/ml(敏感度81.8%,特异度67.5%)。结论 NMBS-TRFIA法可富集血清中S100A11,提高血清S100A11检出敏感度,且操作方法简便、易于推广。血清S100A11诊断胰腺癌具有较高的敏感度和特异度,是一种诊断早期胰腺癌的新型血清标志物。     

EHD2与E-cadherin 在肝细胞肝癌中的表达及其相关性

  目的  研究EHD2、E-cadherin蛋白在肝细胞肝癌中的表达及两者相关性。  方法  Western blot法和免疫组织化学法检测肝细胞肝癌及对应的癌旁组织中EHD2与E-cadherin表达情况,分析两者的相关性及与患者临床病理学参数及预后的关系。  结果  EHD2、E-cadherin蛋白在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,且两者的表达水平与肝癌的组织分化程度、静脉侵袭及淋巴结转移密切相关（P＜0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小等参数无相关性。EHD2、E-cadherin低表达与肝癌患者的不良预后显著相关（P＜0.05）。  结论  EHD2、E-cadherin蛋白表达与肝细胞肝癌的发生发展有关,两者的联合检测有助于肝细胞肝癌的诊断、恶性程度及预后的评估。      

S100A11过表达对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的影响

目的探讨钙囊素(S100A11)过表达对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的影响。方法构建S100A11过表达载体质粒pcDNA3.1-S100A11,并转染人胰腺癌细胞PANC-1细胞。Western blot检测转染效果;CCK-8检测转染后PANC-1细胞增殖活力;流式细胞术检测PANC-1细胞的凋亡和细胞周期的变化。结果 S100A11蛋白表达量与pcDNA3.1-S100A11的转染量成正相关。过表达S100A11基因可明显提高PANC-1细胞增殖速度,降低凋亡细胞比例,并使PANC-1细胞S期细胞比例增加,G1期细胞减少(P<0.05)。结论S100A11过表达能调控PANC-1细胞周期,并促进PANC-1细胞的增殖。     

抗放射性肺炎方对放射性肺损伤大鼠免疫功能的影响

目的:探讨抗放射性肺炎方(ARPD)对放射性肺损伤大鼠免疫系统的影响。方法:128只SD雄性大鼠随机分成正常对照组(A组)、单纯X射线照射模型组(B组)、地塞米松治疗组(C组)、ARPD治疗组(D组)。B,C,D组麻醉后行直线加速器(6 MV X射线)20 Gy单次胸部照射,C,D组照射后每日分别ig给予地塞米松(1.5×10-3g.kg-1.d-1)和中药(ARPD,35 g.kg-1.d-1)治疗。A,B组ig给予等容积生理盐水灌服。照射后第7,15,30,50天取材,观察脾脏组织病理学改变;检测免疫器官指数、外周血淋巴细胞亚群、血清溶血素水平及腹腔巨噬细胞吞噬率。结果:ARPD治疗组较其他X射线照射组病变程度轻,且恢复快。至第50天,胸腺指数、脾脏指数、CD3+,CD4+,CD8+T淋巴细胞、血清溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬率ARPD治疗组均高于单纯X射线照射模型组和地塞米松治疗组(P<0.05)。结论:抗放射性肺炎方(ARPD)可以提高放射性肺损伤大鼠的免疫功能。     

Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其相关性*

目的：探讨Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及相关性。方法：应用Western blot及免疫组化检测肝癌及相应的癌旁组织中Prdx1、Spy1、p27kip1的表达；免疫共沉淀分析Prdx1、Spy1的相互作用；Western blot分析Prdx1、Spy1相互结合对p27kip1蛋白表达的影响。结果：Prdx1、Spy1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达，与p27kip1表达呈负相关；Prdx1、Spy1相互结合使p27kip1的表达水平下调，此作用与Prdx1的抗氧化物活性无关。结论：Prdx1、Spy1蛋白的表达与肝细胞肝癌的发生发展有关，两者的表达可能在肿瘤的恶性进展中起协同作用，而与p27kip1的表达呈拮抗作用。     

CtBP2 在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义*

目的:研究羧基末端结合蛋白2（C-terminal binding protein 2,CtBP2）在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与食管癌发生发展的关系。方法:Westernblot法检测8 对食管鳞状细胞癌新鲜冰冻组织、免疫组化法检测90例食管鳞状细胞癌石蜡切片组织中CtBP2 表达情况,结合临床病理和随访资料分析CtBP2 表达与患者临床病理参数及总生存率的关系。结果:两法检测结果均显示CtBP2 食管鳞状细胞癌组织中的表达明显高于对应的癌旁组织,且CtBP2 的表达水平与食管癌的组织学分级（P =0.002）、浸润深度（P = 0.032）相关,而与年龄、性别等参数无相关性。Kaplan-Meier 分析结果显示,CtBP2 高表达组患者的总体生存率明显低于CtBP2 低表达组患者。结论:CtBP2 在食管鳞状细胞癌组织中表达显著上调,提示其可能与食管鳞状细胞癌的发生发展相关。