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1.
目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。 相似文献
2.
新型mucA基因突变的铜绿假单胞菌生物被膜的形成和藻酸盐相关基因表达的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 确定黏液型铜绿假单胞菌PA17的mum基因突变位点,研究藻酸盐合成相关基因在其生物被膜形成过程中的表达,并观察PAl7生物被膜形成过程和形态。方法 PCR方法扩增铜绿假单胞菌PA17的mueA基因全长并测序;改良平板培养法建立PA17的生物被膜模型,半定量RT-PCR测定生物被膜形成24h、3d.6d时藻酸盐合成相关基因,algD、algU和algR的表达,并进行统计学分析;扫描电镜观察不同时间点的生物被膜形态。结果 PA17的mucA基因第166~333位核苷酸片段缺失,第342位A→G;其藻酸盐相关基因algD和algU均在生物被膜形成过程的第6天表达水平最高,algR在24h表达最高,单因素方差分析显示,上述基因在生物被膜形成过程不同时间点表达的差异有统计学意义;PA17于第6天形成成熟生物被膜,形态为薄膜状。结论 PA17是一株含新型mucA突变基因的黏液型铜绿假单胞菌,其藻酸盐相关基因在生物被膜形成的不同时间点的表达差异具有统计学意义,其生物被膜形态为薄膜状。 相似文献
3.
目的 :观察卡托普利治疗糖尿病肾病 (DN)的临床疗效。方法 :45例DN患者 ,分为治疗组 2 5例 ,对照组2 0例。对照组采用常规治疗 ,治疗组在常规治疗基础上加用卡托普利 2 5~ 10 0mg·d 1 ,po。在治疗前后各收集 2 4h尿液各项指标测定。结果 :治疗组与对照组治疗后平均动脉压下降 12 .8,5 .3mmHg ,2 4h尿蛋白平均下降 3 0 4,66mg ,空腹血糖平均下降 3 .7,3 .3mmol·L 1 ,差异无显著性 ,两组治疗前后的尿素氮和血肌酐值差异也无显著性。结论 :卡托普利治疗糖尿病肾病有一定疗效。 相似文献
4.
目的:探讨COOK球囊加力助产术在剖宫产术后再次妊娠阴道分娩中的应用方法及效果。方法:将86例剖宫产术后再次妊娠拟行阴道分娩产妇依据入院先后顺序分为对照组和观察组各43例,对照组采用常规助产护理措施,观察组采用COOK球囊加力助产术,比较两组干预效果。结果:两组产妇子宫过度刺激、顺产转剖宫产发生率、产后出血量及新生儿Apgar评分比较差异有统计学意义(P<0.05),观察组产妇第一产程、第二产程及总产程时间短于对照组(P<0.05)。结论:COOK球囊加力助产术能够促进剖宫产术后再次妊娠经阴道分娩产妇宫颈成熟度,避免宫颈过度刺激,降低顺产转剖宫产风险,缩短产程时间,减少产后出血量,减少新生儿窒息,可行性较高。 相似文献
5.
6.
目的研究不同浓度DNaseⅠ对非黏液型和黏液型铜绿假单胞菌生物膜形成及成熟生物膜的影响。方法分光光度计法检测25、50、100U/ml的DNaseⅠ对非黏液型铜绿假单胞菌PAOⅠ和黏液型铜绿假单胞菌PA17生长曲线的影响;改良平板培养法建立生物膜模型,分别在生物膜形成过程中及生物膜形成后用25、50、100U/ml的DNaseⅠ处理,扫描电镜观察PAOⅠ和PA17的生物膜形态。结果随着DNaseⅠ浓度增加,PAOⅠ和PA17的对数生长期延迟,但最终不能抑制细菌生长;25U/ml的DNaseⅠ即可抑制不同类型铜绿假单胞菌生物膜形成且分解成熟生物膜,100U/ml的DNaseⅠ可完全阻止铜绿假单胞菌生物膜形成并彻底分解成熟生物膜。结论DNaseⅠ不能直接杀灭铜绿假单胞菌,但可有效抑制铜绿假单胞菌生物膜形成并分解成熟生物膜,对非黏液型和黏液型铜绿假单胞菌生物膜的影响无明显差异,作用效果呈浓度依赖性。 相似文献
7.
有首歌说由来只有新人笑,有谁看到旧人哭,可我不这么看,我觉得,前女友绝对是个强大的存在。至少,我已经斗得累死累活,而对方可能还一无所知。和老宣熟悉起来,是因为一次无意中的诉苦,不是我诉,是他诉。在此之前,我和老宣只是两名同时参加过多次网友聚会的陌生人。作为一名单身女性,有男人约你吃饭,一般都会给对方机会,只是我没有料到,他找我居然是来倾诉的,或许他自己也没有料到吧? 相似文献
8.
9.
目的:了解临床分离的铜绿假单胞菌的耐药特征,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:回顾性调查并分析我院近3年铜绿假单胞菌的临床分离情况及其耐药特征。结果:近3年临床分离出铜绿假单胞菌1287株,占革兰阴性(Gˉ)杆菌的21%,药敏结果显示,对亚胺培南、美洛培南及β-内酰胺酶抑制剂耐药率增加(>20%),对其他β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类的耐药率较高(>30%),仅对头孢他啶和阿米卡星保持较高的敏感率(>75%)。结论:铜绿假单胞菌对碳青霉烯类及β-内酰胺酶抑制剂敏感性下降,对多种药物耐药率较高,应合理应用抗菌药物,加强耐药性监测。 相似文献
10.
目的探讨干扰素结合布地奈德治疗小儿哮喘的临床价值。方法选择2013年5月至2014年6月该院治疗的哮喘患儿80例为研究对象,随机分为观察组与对照组,各40例。两组患儿均给予临床综合治疗,观察组患儿在综合治疗的基础上,给予干扰素结合布地奈德治疗,对比分析两组患儿的临床疗效。结果观察组患儿显效25例(62.5%),有效14例(35.0%),无效1例(2.5%),总有效率为97.5%;对照组患儿显效14例(35.0%),有效10例(25.0%),无效16例(40.0%),总有效率为60.0%,两组总有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。气血分析结果方面,观察组患儿氧气分压(Pa O2)为(67.1±9.0)mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa),二氧化碳分压(Pa CO2)为(64.4±8.7)mm Hg;对照组患儿的Pa O2为(79.2±9.2)mm Hg,Pa CO2为(54.5±7.4)mm Hg,差异有统计学意义(P<0.05)。在肺功能方面,对照组患儿的呼气流速峰值(PEF)为(64.3±4.2)L/min,第1秒用力呼吸容积(FEV1)为(69.2±6.6)L;观察组患儿的PEF为(74.4±4.5)L/min,FEV1为(76.2±7.2)L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对哮喘患儿给予干扰素结合布地奈德治疗,可有效缓解患儿的哮喘症状、消除哮喘带来的负面影响、对患儿造成的不良反应少、临床疗效显著,日后可深入研究该种治疗方法,健全治疗体系,彻底治愈哮喘患儿。 相似文献