白蛋白微泡促进报告基因在细胞表达的实验研究

目的: 探讨白蛋白微泡作为非病毒载体在基因传输中的作用。方法:6孔板培养脐静脉内皮细胞(EC)和血管平滑肌细胞(VSMC),每孔加pcDNA3.1/His/LacZ质粒20 μg,加不同浓度微泡或不加微泡,超声条件为连续波,频率2MHz,机械指数1.8,照射时间1 min,48 h后计算蓝染细胞百分率和β-半乳糖苷酶活性。另以不同浓度微泡及超声照射时间处理细胞,测定细胞增殖情况。结果:与单纯超声质粒组相比,含微泡组蓝染细胞率增加约10-15倍(其中内皮细胞组11.6倍,平滑肌细胞组15.2倍),报告基因表达定量增加近8倍。微泡浓度为10％时细胞转染效率最高。超声照射对细胞增殖无影响,微泡浓度为50％时有明显的细胞毒作用。结论:白蛋白微泡在超声作用下能明显增加基因的传输效率,有可能成为一种安全有效的基因治疗的载体。     

接受溶栓的ST段抬高心肌梗死病人在经皮冠状动脉介入术前应用氯吡格雷的作用

背景：经皮冠状动脉介入术（PCI）术前预先应用氯吡格雷是否会使病人获益现尚存争议，因此未被广泛接受。 目的：为确定近期ST段抬高心肌梗死病人在PCI术前预先应用氯吡格雷在预防主要心脏不良事件（MACE）方面优于手术时应用。     

声学造影评估心内占位性病变血流灌注状况的初步探讨

目的探讨心肌声学造影评估心腔内占位性病变血运状况的可能性。方法常规超声发现心腔内占位性病变后,经静脉行声学造影观察其灌注效果。结果共观察了2例患者心脏占位性病变灌注情况。其中：病例1为左心内占位性病变患者,经静脉注射声学造影剂后见该占位病变与心肌同步出现灌注显影。提示该病变血流丰富,术后病理证实为胚胎型横纹肌肉瘤。病例2为左心房内占位性病变患者,造影后未见该占位性病变显影。提示该病变为无血流病变,术后病理证实为血栓。结论声学造影方法可用于心内占位性病变血运状况的评估,对于判断病变的性质可能有一定的帮助。     

突变低氧诱导因子1α基因真核表达载体的构建和表达

目的构建人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）真核表达载体pcDNA3．1^＋-HIF-1α的两种突变体pcDNA3．1^＋-HIF-1α-564A1a和pcDNA3.1^＋-HIF-1α-564A1a-803Ala，并检测它们在人肺微血管内皮细胞（HMVECs）中的表达。方法用定点突变的方法将pcDNA3．1^＋-HIF-1α的HIF-1α第564位脯氨酸（Pro）密码子CCC突变为丙氨酸（Ala）密码子GCC，构建成单个突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3．1^＋-HIF-1α-564Ala。在第一次突变的基础上，仍然用定点突变的方法将pcDNA3．1^＋-HIF-1α-564Ala的HIF-1α-564Ala第803位天冬酰胺（Asn）密码子ATT突变为丙氨酸（Ala）密码子GCT，构建成双个点突变HIF-1α真核表达载体pcDNA3．1^＋-HIF-1α-564Ala-803Ala。将3种HIF-1α表达载体用脂质体法分别转入HMVECs．以RT-PCR、免疫荧光法和Western blotting法分别对转染细胞进行表达分析。结果测序证实，定点突变成功，构建成重组真核表达载体pcDNA3．1^＋-HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1^＋-HIF-1α-564Ala-803Ala；3种载体均能表达相应的蛋白和mRNA。但转化突变HIF-1α表达载体的细胞蛋白量比空白细胞和转化无突变HIF-1α载体的细胞显著增加。结论成功构建能够在HMVECs中表达的单个和双个点突变的HIF-1α基因的真核表达载体。     

超声作用下声学造影剂对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察低机械指数超声作用下声学造影剂对平滑肌细胞增殖的影响。方法6孔板培养大鼠血管平滑肌细胞,加或不加声学造影剂,超声条件为连续波,频率2 MHz,机械指数0.25,照射时间1 min。分别于照射后3、24、48 h行锥虫蓝染色,平行孔内的细胞进行胰酶消化后,用Coulter计数器计算细胞数量,应用流式细胞术测定细胞周期。结果锥虫蓝染色未观察到细胞毒性作用。与对照组相比,超声加声学造影剂组24 h内大鼠血管平滑肌细胞的增殖被抑制,48 h后这一作用消失。结论在低机械指数超声作用下造影剂空化对平滑肌细胞增殖有一过性的抑制作用。     

声学造影诊断无血流限制性冠脉狭窄的新方法

目的探讨应用声学造影(MCE)在非负荷状态下诊断无血流限制性冠脉狭窄(NFLS)的可行性.方法分别在犬的前降支(LAD)无狭窄及两种不同程度的NFLS状态,MCE 采用高机械指数连续脉冲成像方法;比较不同状态下心脏收缩末声学造影强度(VIS)与舒张末造影强度(VID)的比值,探讨应用MCE在非负荷状态下诊断NFLS的可行性.结果随着冠脉狭窄程度的加重,VIS与VID比值进行性增大(P＜0 .05) .结论测量心脏收缩期与舒张期声学造影强度比值可用于非负荷状态下诊断无血流限制性的冠脉狭窄.     

接受溶栓的ST段抬高心肌梗死病人在经皮冠状动脉介入术前应用氯吡格雷的作用

背景:经皮冠状动脉介入术(PCI)术前预先应用氯吡格雷是否会使病人获益现尚存争议,因此未被广泛接受。目的:为确定近期ST段抬高心肌梗死病人在PCI术前预先应用氯吡格雷在预防主要心脏不良事件(MACE方面优于手术时应用。设计、入选:PCI-CLARITY是前瞻性、随机、双盲设计、对照试验,计划分析TIMI28-CLARITY试验中冠脉造影后接受PCI治疗的1863例病人。入选病人来自2个国家319个中心,时间自2003-02~2004-10。病人溶栓后一组接受阿司匹林、氯吡格雷(300mg负荷剂量后75mg,每日1次),另一组溶栓后先给予阿司匹林、安慰剂,直至冠脉造影…     

双导丝球囊在处理分叉病变中的应用

目的 评价冠状动脉分叉病变主支植入支架联合分支,双导丝球囊(Dual-Wire Balloon)单纯扩张治疗分叉病变的有效性和安全性.方法 Lefevre Ⅰ型冠状动脉分叉病变36例共41处,采用双导丝球囊行边支和(或)主支扩张,主支植入支架,观察住院及随访期间的疗效及主要心脏不良事件的发生率.结果 41处分叉病变主支支架植入前行边支双导丝球囊预扩张均成功,4例主支行直接支架术,37处分叉病变主支双导丝球囊预扩张成功后植入主支支架,主支支架后5例边支明显受压,心肌梗死试验性溶栓疗法(thrombolysis in myoxardial infarction trial,TIMI)血流不足3级的分叉病变行对吻扩张均成功.住院期间无Q波心肌梗死、急诊血运重建及死亡;平均随访16个月,期间无Q波心肌梗死、再次血运重建、死亡等严重临床并发症,心绞痛复发3例,强化药物治疗后均缓解.结论 用双导丝球囊处理分叉病变可以获得较好的效果,主支支架联合分支双导丝球囊单纯扩张治疗分叉病变是一种简单和有效的处理方法.     

长期肾素血管紧张素系统阻滞对心力衰竭大鼠心血管组织醛固酮代谢的影响

长期 (>3个月 )应用血管紧张素转换酶抑制剂 (ＡＣＥＩ)治疗充血性心力衰竭 (心衰 )会产生血浆醛固酮逃逸现象。血管紧张素ＩＩ受体阻滞剂 (ＡＲＢ)理论上可以更好地阻断肾素血管紧张素系统 ,与ＡＣＥＩ相比副作用少。已经证实心脏、血管可以合成醛固酮 ,表达醛固酮合成酶的编码基因为ＣＹＰ11Ｂ2。本实验旨在检测长期应用ＡＣＥＩ、ＡＲＢ是否产生组织醛固酮逃逸。1 资料与方法 :用依那普利 (2 0ｍｇ·ｋｇ-1·ｄ-1)和洛沙坦 (15ｍｇ·ｋｇ-1·ｄ-1)喂养心肌梗死后充血性心衰大鼠 ,用假手术大鼠和未处理心肌梗死后充血性心衰大鼠作对照 ,离…