VEGF、nm23在胆囊癌中的表达及与淋巴结转移相互关系的研究

目的：研究VEGF与nm23基因在胆囊癌中的表达及其在淋巴结转移中的作用，并探讨两者的相互关系。方法：采用免疫组化法，检测VEGF蛋白及nm23蛋白在胆囊癌中的表达。结果：VEGF在胆囊癌中的阳性表达率为86.7％，明显高于正常组织；而nm23阳性表达率则为40％，显著低于正常组织；两者在胆囊癌组织中的表达呈负相关趋势。结论：VEGF与nm23基因协同促进胆囊癌的淋巴结转移，两者的共同检测可做为肿瘤进展和预后的生物学指标。     

人肝细胞癌VEGF及受体的表达与临床病理的关系

目的:分析VEGF及其受体flt-1/flk-1蛋白表达与肝细胞癌临床病理的关系.方法:应用ABC免疫组化染色法,检测60例肝细胞癌中VEGF、flk-1、flt-1蛋白表达情况,并分析它们与肝细胞癌临床病理的关系.结果:60例肝细胞癌组织中VEGF、flk-1、flt-1蛋白的阳性表达率分别为81.3%、88.3%、80.0%,均明显高于正常肝组织(P＜0.05);并且VEGF蛋白表达与肿瘤的病理分级、有无包膜、瘤栓、直径大小均有相关性.结论:VEGF蛋白表达水平越高,细胞恶性程度及侵袭、转移能力越强,并且VEGF与flt-1/flk-1在肿瘤形成过程中具有协同作用.     

卵巢上皮性癌BRCA1和p53基因表达的临床意义及相互关系研究

目的：探讨BRCA1、p53基因蛋白在卵巢上皮性癌中的表达情况及相互关系。方法：应用S-P免疫组织化学法检测50例卵巢上皮性癌组织中BRCA1和p53蛋白的表达。采用Kaplan—Meier法分析两种蛋白表达情况与患者预后的关系。结果：1)BRCA1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率仅为30％，明显低于正常卵巢组织(100％)和良性肿瘤组织(90％)(P＜0．01)；BRCA1在低分化癌、有淋巴结转移的卵巢癌组织中表达减少甚至缺失。2)p53蛋白在卵巢癌组织中的表达率为64％，而在正常卵巢及良性肿瘤组织中无表达；其表达仅与病理学分级有关。3)两种基因蛋白表达比较呈显著负相关(P＜0．01)。4)患者生存随访表明，有BRCA1表达的患者平均生存期长于无表达者；而p53对生存时间无影响。结论：BRCA1基因在转录后水平的下调对卵巢上皮性癌的发生发展有重要的作用．同时BRCA1基因与p53基因协同促进肿瘤的演进恶化。     

乏氧和低糖条件下低表达ESE3促进胰腺癌细胞的侵袭

目的 观察乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中上皮特异性ETS转录因子3（ESE3）表达的变化及其对胰腺癌细胞侵袭能力的影响。方法 收集在天津医科大学肿瘤医院2005年1月—2014年10月期间行根治性手术治疗的99例胰腺癌患者的胰腺癌组织和16例邻近正常胰腺组织标本。采用免疫组化法分析癌组织和邻近正常胰腺组织中ESE3的表达水平,探究其表达水平与胰腺癌患者生存预后间的关系;进一步在TCGA数据库中分析ESE3的mRNA 表达水平与147例胰腺癌患者的临床病理学特征间的关系;构建胰腺癌细胞PANC-1过表达ESE3稳定转染细胞系并验证;Transwell法探究过表达ESE3的胰腺癌细胞侵袭能力的变化;利用蛋白质免疫印迹法检测乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中乏氧诱导因子1α（HIF-1α）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和ESE3蛋白表达水平的变化。结果 胰腺癌组织中ESE3的表达量明显低于正常胰腺组织,ESE3的低表达与患者总生存期（OS）和无复发生存期（DFS）缩短密切相关（均P＜0.05）。TCGA数据库分析表明ESE3表达高低与肿瘤转移相关（P＜0.05）;在乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞侵袭能力增强,ESE3的表达降低,HIF-1α与GRP78的表达增加（P＜0.05）。结论 在乏氧和低糖条件下,胰腺癌细胞中ESE3的表达降低,促进胰腺癌细胞的侵袭。     

核转录因子NF-κB在TRAIL诱导肝癌细胞凋亡中作用的研究

目的初步探讨核转录因子NF-κB在TRAIL诱导肝癌细胞发生凋亡过程中的作用和可能机制。方法应用流式细胞仪技术检测经TRAIL和(或)MG-132处理后,肝癌细胞SMMC-7721凋亡发生情况;采用蛋白印渍技术检测TRAIL处理后SMMC-7721细胞凋亡相关蛋白表达情况;并用ELISA法检测NF-κB活性变化。结果单独使用TRAIL后,肝癌细胞发生凋亡,其凋亡指数为15．1％;若联合应用NF-κB抑制剂-MG-132后,则凋亡指数达27．4％,明显高于前者(P<0．01);同时,两者均高于对照组(P<0．01)。SMMC-7721细胞经TRAIL处理后,抗凋亡蛋白表达增加,而促凋亡蛋白表达下降。另外,经TRAIL单独处理后,细胞的NF-κB活性(0．49±0．02)明显高于其余各组(P<0．01)。结论NF-κB在TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡过程中被激活,而NF-κB又可能通过促进抗凋亡蛋白的表达、抑制促凋亡蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞的凋亡。     

蛋白酶体抑制剂在TRAIL诱导恶性淋巴瘤细胞凋亡中的协同作用

目的:探讨合理应用蛋白酶体抑制剂PS-341协同TRAIL有效增加耐药恶性淋巴瘤细胞凋亡的内在机制,为耐药肿瘤的治疗提供新思路。方法:采用流式细胞仪、Western Blot、荧光显色技术观察PS-341与TRAIL协同作用后恶性淋巴瘤细胞CRL的凋亡情况、促凋亡蛋白Bax的表达水平以及Caspase-3的活性变化。结果:TRAIL作用细胞24h凋亡率仅为21.3%,并且出现Bax蛋白表达水平的下降,6h的表达量仅为正常量的5/9;联合使用浓度为10nmol/L PS-341后显著增加细胞的凋亡,24h凋亡指数为50.4%;6h Bax蛋白表达量为正常量的1.2倍,Caspase-3酶活性增加至122.56±1.434μmol/L·h~(-1)·mg~(-1)蛋白。结论:合理使用蛋白酶体抑制剂可通过有效抑制凋亡蛋白Bax降解,逆转恶性淋巴瘤细胞对TRAIL的药物抵抗,为合理用药提供理论依据。     

急性脑卒中并睡眠障碍临床分析

脑卒中是危害中老年人身体健康的严重疾病，其发病率、致残率、致死率高。不仅生理上残疾，而且患者心理上也受到极大创伤。急性脑卒中患者因各种功能障碍容易产生躯体和心理的不适，临床上最常见的是导致睡眠障碍，直接影响患者神经功能的恢复，临床表现为睡眠颠倒、全天睡眠增多或减少、有精神症状的睡眠一觉醒，同时也使血压升高，导致再出血、再梗死的危险系数加大。本研究对急性脑卒中合并睡眠障碍患者的临床资料进行分析，现将结果报告如下。     

BH3结构域拟似物BH3I-2''在肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导白血病细胞凋亡中的协同作用

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体（Tumor necrosis factor apoptosis-inducing ligand，TRAIL）是TNF家族的新成员，可高效特异的杀伤体内肿瘤细胞，有很高的临床应用价值。但在某些肿瘤细胞却存在不同程度的耐受，有效的克服细胞耐药性是目前较为棘手的问题。BH3I-2’是新近合成的小分子量细胞透过分子，它具有与BakBH3蛋白相似的功能， 导凋亡的敏感性及其内在机制。     

金雀异黄素协同TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用的研究

目的:研究金雀异黄素是否协同TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡,并探讨其可能的内在机制.方法:首先,MCF-7细胞分别经过1.25,2.5,5,10,20,40μg/mL金雀异黄素及1,10,100,1000 ng/mL TRAIL单独处理后,应用MTT法检测MCF-7细胞增殖情况,根据其结果选择终浓度为20μg/mL金雀异黄素及100 ng/mL TRAIL作为后续试验的浓度;接着,MCF-7细胞分为4组,即时照组、Gen组(终浓度为20 μg/mL)、TRAIL组(终浓度为100 μg/mL)及Gen+TRAIL组.细胞经不同处理后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫荧光法检测细胞凋亡中Caspase-3活性;应用酶联免疫吸附方法检测细胞NF-kB含量.结果:联合应用Gen后,明显增强TRAIL对MCF-7细胞增殖的抑制[抑制率为(63.78±2.61)%],并且促进TRAIL诱导细胞凋亡的发生[凋亡率为(42.20±1.35)%],均分别高于相应的单独TRAIL处理组(P＜0.01).另外,TRAIL单独处理的MCF-7细胞Caspase-3活性为17.324±0.880μmol/L/hr/mg protein,NF-κB的含量为343.333±8.064 pg/mL;而在联合应用Gen以后,Caspase-3活性增高(44.000±0.445μmol/L/hr/mg protein),同时NF-κB的合成受到抑制(177.453±25.389 pg/mL),与相应单独用药组比较差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:金雀异黄素可协同TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡、增加乳腺癌细胞对TRAIL的敏感性,其可能的机制是Gen协同TRAIL激活了细胞凋亡过程中Caspase-3,并进一步抑制了NF-κB的合成,从而最终导致乳腺癌MCF-7细胞凋亡的发生.     

凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax在糖尿病骨骼肌病变中的变化及意义

目的:探讨糖尿病骨骼肌凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化及意义.方法:选用Wistar大鼠24只,随机分成正常对照组、单纯缺血组、糖尿病组和糖尿病缺血组.每组6只.以四氧嘧啶50mg/kg尾静脉注射制造糖尿病模型.造模后2周结扎右股动脉制造缺血模型.10周后,以免疫组化方法观察腓肠肌中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达情况.结果:糖尿病组骨骼肌表现为普遍性萎缩,肌纤维变性坏死.与对照组比较糖尿病可使骨骼肌凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05),Bax表达增高(P<0.05).缺血可使骨骼肌Bax蛋白表达增高(P<0.05),但对Bcl-2表达的影响与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).糖尿病与缺血对骨骼肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响无交互作用(P>0.05).结论:糖尿病骨骼肌病变可能与Bcl-2与Bax蛋白比例下降促进细胞凋亡有关.