血必净注射液在重症肺炎中对机体免疫功能的调控研究

目的观察应用血必净注射液对重症肺炎患者血清中白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平以及外周血中CD4~+T、CD8~+T细胞频率变化,以明确其对机体免疫功能的影响。方法收集武汉大学人民医院ICU的46例需要机械通气的重症肺炎患者,应用随机方法分为血必净组各23例,两组患者基本治疗均予以积极液体复苏、抗感染、机械通气、维持水电解质平衡及营养支持等综合治疗。血必净组患者在上述综合治疗基础上加用血必净静脉输注治疗,用法为血必净100m L加入100m L生理盐水中,使用频率为q12h,连续应用7d。收集患者治疗前后外周静脉血,应用ELISA方法测定血清中IL-6、IL-10、TNF-a分子水平,应用FACS方法测定外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4~+T、CD8~+T细胞频率的变化。同时监测治疗前后患者血气分析、胸片、应用呼吸机时间等变化,评价其治疗效果。结果血必净组与对照组相比,其血清中IL-6、TNF-a水平在血必净组较对照组显著降低,差异具有统计学意义(P0.05);IL-10水平在血必净治疗组较对照组升高,差异具有统计学意义(P0.01);CD4~+T、CD8~+T细胞频率在血必净治疗组较对照组均升高,差异具有统计学意义(P0.01)。血必净治疗组患者应用呼吸机时间较对照组患者明显缩短,差异具有统计学意义(P0.01);两组患者氧合指数(PaO_2/FiO_2)治疗后均有明显改善,但血必净治疗组较对照组改善效果更为显著,血必净治疗组急性生理与慢性健康评分(APACHE II)较对照组降低,临床肺部感染评分(CPIS)较对照组降低,差异均具有统计学差异(P0.01或P0.05)。结论应用血必净治疗能够明显改善机体免疫功能,控制肺部炎症反应,提高治疗效果。     

Galectin-9/ Tim-3 信号通路在HBV 感染中对机体固有免疫及适应性免疫调控的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染过程中,机体固有免疫及适应性免疫功能损伤与HBV 感染的慢性化密切相关,特别是T 细胞功能的耗竭。T 细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)及其配体半乳糖苷结合蛋白9(Gal-9)在包括HBV 在内的多种病毒感染所致的机体免疫功能紊乱过程中发挥着重要作用,是参与机体固有免疫及适应性免疫应答调控的重要信号通路,也是诱导T 细胞耗竭的重要负调控分子之一。本文扼要就Galectin-9/ Tim-3 信号通路在HBV 感染过程中对机体免疫功能调控的相关研究进展作综述。     

去肾交感神经术对治疗慢性心力衰竭的作用

慢性心力衰竭(简称心衰)为各种心脏疾病的严重和终末阶段,是危害人类健康的最主要疾患之一。交感神经系统的激活对心肌病理性重构和心竭发生发展起着至关重要的作用,交感神经系统激活所致的去甲肾上腺素释放与心衰的发病率和死亡率密切相关,影响心衰的预后。近年研究证实,去肾交感神经术能够特异性地阻断肾脏传入和传出交感神经活动从而降低全身交感神经活性和减少去甲肾上腺素溢出,它不仅能够降低血压,还能减轻心肌肥厚,改善心功能等,从而为心衰的非药物治疗提供了一种新的方式。     

肾去交感神经术对心力衰竭大鼠心功能及转化生长因子β1的影响

目的 探讨肾去交感神经术(renal sympathetic denervation, RDN)对心力衰竭大鼠心功能和心肌转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平的影响。方法 成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组对照组、单纯假手术组、肾去交感神经组(RDN组)、心力衰竭组4组。预处理后用异丙肾上腺素皮下注射法制作大鼠心力衰竭模型。心脏彩超评价大鼠心肌组织结构和功能的变化。Masson染色测算大鼠心肌胶原容积分数(collagen volume fraction, CVF),评价大鼠心肌纤维化程度。RT-PC法检测大鼠心肌TGF-β1mRNA的相对表达水平。免疫组化法测心肌组织TGF-β1蛋白的相对表达。结果 RDN组大鼠左心室射血分数、左心室短轴缩短率高于心力衰竭组,而左心室舒张末期容积(ml)更低(射血分数:72.66%±7.95% vs 64.21%±6.23%, P<0.05;短轴缩短率:37.05%±5.30% vs 31.38%±1.65%,P<0.05;舒张末期容积:0.765±0.003 vs 0.912±0.002ml,P<0.05)。RDN组胶原容积分数低于心力衰竭组(13.96%±8.41% vs 59.69%±24.31%, P<0.05),TGF-β1mRNA的相对表达低于心力衰竭组(0.478±0.012 vs 0.896±0.025,P<0.05),TGF-β1蛋白表达平均吸光度值低于心力衰竭组(5.02±0.5 vs 6.99±0.39,P<0.05)。结论 肾去交感神经术能抑制心力衰竭大鼠心肌纤维化并改善心功能,可能与抑制心肌组织TGF-β1的表达途径有关。     

肾去交感神经术对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察肾去交感神经术(renal sympathetic denervation,RDN)对心力衰竭大鼠心肌纤维化及心肌组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,探讨肾去交感神经术治疗心力衰竭的机制。方法 48只SPF级Wistar雄性大鼠分成4组,分别为心力衰竭RDN治疗组(RDN+HF组)、心力衰竭模型组(Sham+HF组)、假手术组(Sham组)及正常对照组,其中RDN+HF组和Sham+HF组分别进行双侧肾交感神经切除或假手术处后用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导建立大鼠心力衰竭模型,4周后行心脏彩超测左心室舒张末期内径(LVEDD)、舒张末期容积(LVEDV)、左心室射血分数(EF%)及收缩百分率(FS%)评估心功能变化并处死大鼠,留取心脏左心室心肌组织行Masson染色测定心肌胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测心肌组织CTGF蛋白表达,RT-qPCR检测左心室心肌CTGFmRNA。结果 与心力衰竭模型组相比,心力衰竭RDN治疗组中反映心室腔扩大的指标LVEDD和LVEDV(LVEDD:0.65±0.02 vs 0.76±0.04,P<0.05;LVEDV:0.77±0.05 vs 0.91±0.04,P<0.05)均明显减小,反映心肌收缩力的指标EF和FS(EF:72.66%±2.82% vs 64.21%±2.50%,P<0.05;FS:32.55%±2.95% vs 25.88%±3.42%, P<0.05)均明显增大,反映胶原含量的指标CVF(13.96%±2.90% vs 59.69%±4.93%,P<0.05)下降,CTGF蛋白表达(4.53±0.75 vs 7.06±0.72, P<0.05)和mRNA相对量(6.95±0.73 vs 10.88±0.85, P<0.05)均减少,但仍高于假手术组(P均<0.05)。结论 肾去交感神经术能够改善心力衰竭大鼠心功能并抑制心肌纤维化的进展,其机制可能与下调CTGF的表达有关。     

下肢深静脉血栓形成患者凝血酶-抗凝血酶复合物的变化及在抗凝治疗中的价值

目的探讨血浆凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)在重症监护室患者下肢深静脉血栓形成(DVT)诊断中的意义及对抗凝治疗效果的评估价值。方法收集该院2017年1-5月入住重症监护室时间大于1周的危重患者60例,其中确诊有下肢DVT的14例患者纳入血栓组;无下肢DVT的46例患者纳入对照组。所有患者在怀疑有血栓形成时检测血浆TAT、血栓调节蛋白(TM)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)水平。对有下肢DVT患者进行低分子肝素抗凝治疗,并于治疗后第2天检测血浆TAT、D-D、FDP水平。结果血栓组患者血浆中TAT、D-D、FDP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),而2组间TM水平差异无统计学意义(P=0.332)。受试者工作特征(ROC)曲线分析发现,血浆中TAT、D-D、FDP水平诊断下肢DVT的ROC曲线下面积分别为0.901、0.726、0.753。血栓组患者抗凝治疗前血浆中TAT水平明显高于抗凝治疗后,差异有统计学意义(P0.05),而血浆中D-D、FDP水平在抗凝治疗前后差异无统计学意义(P0.05)。结论检测血浆TAT水平可作为下肢DVT诊断的有效的筛查方法,同时可作为下肢DVT患者肝素抗凝治疗疗效的一项监测指标。     

肾去交感支配对心肌梗死后大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1的影响

目的 探讨肾去交感神经术(Renal sympathetic denervation,RSD)对心肌梗死大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平的影响。方法 52只雄性SD大鼠随机分为4组,正常组对照组（Control组）、肾去交感组（RSD组）、心肌梗死组(MI7d Sham组)、肾去交感干预组（MI7d RSD组）。MI7d Sham组和MI7d RSD组分别给予前降支冠脉结扎术制备心梗模型7天后行肾交感假手术或去交感术。心脏彩超评估大鼠左心室收缩末期直径（LVESD）,左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）。Masson法检测大鼠左心室心肌胶原容积分数(CVF)。RT-PCR法和Western-blot法分别检测大鼠左室心肌TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白的相对表达水平。结果 与MI7d Sham组相比,MI7d RSD组大鼠LVESD明显减小（LVESD: 3.13mm ± 0.25mm vs. 5.23mm ± 0.15mm, P<0．01）,而LVFS和LVEF均增高（LVFS: (38.2 ± 4.5)% vs. (23.1 ± 3.3)%,P<0．01; LVEF: (61.7 ± 1.3)% vs. (40.4 ± 2.7)%,P<0．01）。与MI7d Sham组相比,MI7d RSD组胶原容积分数减少((42.66 ± 7.55) % vs. (59.33±9.79)%,P<0．01),TGF-β1 mRNA(1.47±0.09 vs. 2.00±0.09,P<0.01)和TGF-β1蛋白(0.46±0.04 vs. 0.73±0.02,P<0．01)的相对表达量均减少。结论 肾去交感神经术能抑制心肌梗死大鼠心肌纤维化并改善心功能,可能与下调TGF-β1的表达有关。     

参附注射液联合去甲肾上腺素对脓毒症休克兔舌下微循环的影响

目的:观察参附注射液联合去甲肾上腺素对脓毒症休克兔舌下微循环的影响。方法:30只新西兰兔,随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、去甲肾上腺素组(NE组)、参附注射液组(SFI组)和参附注射液联合去甲肾上腺素组(SFI+NE组),每组各6只。Sham组只进行相应手术操作,不进行造模处理,其余各组经兔耳缘静脉注射脂多糖(LPS,2mg/kg)建立脓毒症休克模型,模型复制成功后给予乳酸钠林格注射液30ml/kg补液1h。NE组在模型建立后通过微量注射泵以2.0μg/kg/min的速度给予去甲肾上腺素(40μg/ml)6h;SFI分别于造模前、休克时、休克后1h和休克后2h给予参附注射液(2.5ml/kg)。SFI+NE组同时按NE组和SFI组处理方法进行干预;Model组和Sham组在模型建立后给予等体积的生理盐水(分6h持续泵入)。各组动物于建模前、休克时以及休克后1h、3h和6h时通过电生理记录仪和舌下微循环成像系统分别采集平均动脉压(MAP)和舌下微循环各指标[包括:血管密度(TVD)、微血管血流指数(MFI)、异质性指数(HI)、灌注血管比例(PPV)、灌注血管密度(PVD)],并比较各组各指标的差异。结果:基线状态下各组各指标之间无统计学差异(P>0.05),休克时除Sham组外,各组各指标之间无统计学差异(P>0.05)。休克3h、6h时,SFI+NE组MAP较Model组、NE组、SFI组均有明显改善(P<0.05)。休克6h时,NE组、SFI组MAP较Model组升高(P<0.05)。休克1h时,TVD、MFI、HI、PPV、PVD各指标在NE组、SFI组和SFI+NE组间均无明显统计学差异(P>0.05),与Model组相比,SFI组和SFI+NE组TVD、SFI组和NE组PVD有明显改善(P<0.05)。休克3h时,TVD、MFI、PPV各指标SFI+NE组与NE组、SFI组相比无明显统计学差异(P>0.05),SFI组MFI、PVD指标较Model组有明显改善(P<0.05),SFI组PVD指标较NE组、SFI+NE组有明显改善(P<0.05)。休克6h时,SFI组MFI指标与Model组、NE组、SFI+NE组相比有明显改善(P<0.05)。其余各指标差异在各时间点各组间比较无统计学意义(P>0.05)。结论:参附注射液联合去甲肾上腺素相比于单独应用参附注射液或去甲肾上腺素可明显改善脓毒症休克兔的MAP,但对TVD、MFI、HI、PPV和PVD微循环指标的改善作用,与单独用药疗效相当。     

大鼠肾去交感神经实验动物模型的制备

目的 制备大鼠肾去交感神经实验动物模型。方法 52只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、肾去交感组（RDN组）、心肌梗死组(MI+Sham组)和肾去交感治疗组（MI RDN组）4组。MI Sham组和MI RSD组分别结扎前降支冠脉制备心梗模型,7天后予肾去交感假手术或手术处理。电刺激法评估术前及术后即刻,HE染色法评估术前和MI术后4周肾交感去除情况,ELISA法评估血浆血管紧张素-II（Angiotensin-II, Ang-II）,醛固酮（Aldosterone, ALD）和去甲肾上腺素（Norepinephrine, NE）变化情况。结果 RDN术总死亡率为18.1%,手术成功率为81.9%。在RDN术前,肾神经干电刺激可诱导明显交感反应,而术后上述反应消失。HE染色显示正常未消融的肾动脉外膜外可见完整交感神经,RDN术后3周未见任何完整肾交感神经,肾动脉血管壁未见明显异常。与MI Sham组相比,MI RDN组Ang-II,ALD及NE均明显减少（NE,669.0 ± 24.0 vs. 1349.0 ± 209.0,P < 0.01;Ang-II,205.5 ± 16.4 vs. 1069.0 ± 209.1,P < 0.01;ALD,290.0 ± 36.0 vs. 1049.5 ± 298.5,P < 0.01)。结论 本研究所制备的大鼠肾去交感模型,具有良好的操作性、安全性、实用性和有效性。