中性粒细胞胞外诱捕网通过上调MMP9表达激活黏着斑激酶促进小鼠结直肠癌细胞的增殖和迁移

目的 研究中性粒细胞胞外诱捕网(NET)对小鼠MC38结直肠癌细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法 提取小鼠脾脏中性粒细胞，体外用离子霉素刺激获得NET。将NET与MC38细胞共孵育后，采用CCK-8法检测MC38细胞增殖，Transwell^TM和细胞划痕实验检测MC38细胞迁移能力。实时荧光定量PCR检测细胞基质金属蛋白酶2 (MMP2)、 MMP9的mRNA表达，Western blot法检测MC38细胞MMP2、 MMP9和黏着斑激酶(FAK)、磷酸化的FAK蛋白表达。使用小干扰RNA(siRNA)沉默MMP9后，采用前述方法检测NET对MC38细胞增殖、迁移能力的影响及相关分子表达的改变。结果NET促进MC38细胞增殖和迁移能力，并上调MMP9表达、促进FAK的磷酸化。沉默MMP9后，抑制NET对MC38细胞增殖和迁移的促进作用并抑制FAK磷酸化。结论 NET上调MC38细胞MMP9表达，激活FAK信号通路，促进肿瘤细胞增殖和迁移。     

腹腔镜与开腹手术治疗外伤性脾破裂效果的meta分析

目的比较腹腔镜与开腹手术在外伤性脾破裂患者中应用效果的差异。方法计算机检索Pub Med、Web of Science、中国知网、万方数据库及维普数据库中发表的关于腹腔镜手术与开腹手术治疗外伤性脾破裂的对比研究性文献,检索时间为2007年1月至2017年1月,采用Stata 12.0软件进行meta分析。结果 (1)术中情况:与OS组相比,LS组患者的手术时间更短[SMD=–0.71,95%CI为(–1.12,–0.30),P=0.001],术中出血量更少[SMD=–1.53,95%CI为(–2.28,–0.78),P0.001]。(2)术后情况:与OS组比较,LS组患者的术后肛门排气时间[SMD=–2.47,95%CI为(–3.24,–1.70),P0.001]、术后下床活动时间[SMD=–2.97,95%CI为(–4.32,–1.62),P0.001]和住院时间[SMD=–1.68,95%CI为(–2.15,–1.21),P0.001]均较短。(3)总并发症发生率和各并发症发生率:与OS组比较,LS组患者的术后总并发症发生率较低[OR=0.29,95%CI为(0.19,0.43),P0.001]。与OS组比较,LS组患者的感染[OR=0.27,95%CI为(0.13,0.55),P0.001]、腹腔积液[OR=0.36,95%CI为(0.13,1.00),P=0.049]、出血[OR=0.29,95%CI为(0.10,0.90),P=0.032]、肠梗阻[OR=0.34,95%CI为(0.13,0.90),P=0.030]、切口脂肪液化[OR=0.27,95%CI为(0.08,0.94),P=0.040]和切口裂开[OR=0.17,95%CI为(0.03,0.96),P=0.045]的发生率均较低(P0.05),但2组患者的脾切除后发热[OR=0.41,95%CI为(0.13,1.27),P=0.123]、胰瘘[OR=0.40,95%CI为(0.06,2.63),P=0.343]、肝功能损害[OR=0.36,95%CI为(0.10,1.34),P=0.127]和血栓形成[OR=0.33,95%CI为(0.09,1.22),P=0.097]发生率比较差异均无统计学意义。结论腹腔镜手术不仅能够显著降低外伤性脾破裂患者多种并发症的发生率,还能有效加快其术后康复,因而外伤性脾破裂患者行腹腔镜手术是安全和有利的。     

4种肿瘤标志物的检测对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨肿癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA-199)、糖类抗原125(CA-125)和糖类抗原153(CA-153)等4种肿瘤标志物的检测对卵巢癌的诊断价值.方法 采用化学发光法检测49例卵巢癌患者、48例卵巢良性病变患者和40例健康体检者的口述4种肿瘤标志物,并探讨联合检测对诊断卵巢癌的临床价值.结果 49例卵巢癌患者血清CEA、CA-199、CA-125和CA-153阳性率明显高于卵巢良性病变组及健康对照组(均P<0.05),4项联合检测敏感性明显高于单项检测.结论 单项检测血清CEA、CA-199、CA-125和CA-153对卵巢癌的诊断有一定的临床价值,联合检测这4种标志物更具有临床意义.     

胶原纤维在小鼠酒精性肝损伤过程中的表达变化

目的:探究胶原纤维在酒精性肝损伤发展过程中各个阶段的变化规律及其与酒精性肝损伤的关系.方法:饲养清洁健康BALB/c♂小鼠40只,随机分为对照组(n=3)与模型组(n=37).将对照组3只小鼠处死,取肝;模型组小鼠每日给予0.15 m L/10 kg 56°红星二锅头白酒灌胃,持续4 wk,于开始灌胃后1、2、3、4 w k各取3只小鼠进行肝脏取材.天狼星红染色法观察小鼠肝组织胶原纤维病理变化情况,蛋白印迹法检测小鼠肝脏增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,P C N A)蛋白表达及变化趋势.运用ImageProPlus6.0对病理切片样本进行积分光密度(IOD)定量分析,Gel Pro4.0软件对目标蛋白条带灰度值进行测定.运用SPSS16.0对数据进行处理,用ANOVE法和非参数秩和检验法进行显著性分析.结果:第1、2周组小鼠肝组织胶原纤维含量持续显著增高(852.21±10.65 vs 345.24±65.94,1054.15±10.80 vs 852.21±10.65,P0.01),第2周达到最高,随后第3、4周小鼠肝组织胶原纤维含量依次降低(588.75±17.18 vs 1054.15±10.80,559.40±14.17,P0.01);小鼠肝组织中PCNA蛋白含量前2 wk明显下降,第2周时达到最小值,第3周较第2周增加显著,差异有统计学意义(P0.05).第4周与第3周变化无明显差异.结论:在酒精诱导小鼠肝脏损伤的过程中,肝脏胶原纤维的变化规律是先增加后减少,变化明显;PCNA的表达出现显著动态变化,二者均可能与肝脏的损伤修复机制密切相关.     

国内新辅助放化疗后行腹腔镜和开腹手术治疗直肠癌疗效的meta分析

目的比较国内新辅助放化疗后行腹腔镜与传统开腹手术在直肠癌治疗中的应用效果。方法检索中国知网、中国生物医学数据库、万方数据库、维普科技期刊、PubMed、Cochrane Library、Embase等国内外数据库中发表的有关我国新辅助放化疗后行腹腔镜与传统开腹手术治疗直肠癌的文献,由两位评价员按纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后采用RevMan 5.3软件进行meta分析。结果最终评审后共纳入行新辅助放化疗后进一步施行腹腔镜手术与传统开腹手术比较研究的文献20篇,其中11篇为随机对照研究,9篇为非随机对照研究。本研究共纳入直肠癌患者2 036例,其中1 021例新辅助放化疗后行腹腔镜手术,1 015例新辅助放化疗后行开腹手术。与行开腹手术比较,行腹腔镜手术的手术时间明显延长[WMD=14.21,95%CI为(1.92,26.51)]、术中出血量明显减少[WMD=–38.96,95%CI为(–60.29,–7.63)]、术后首次排气时间明显提前[WMD=–0.86,95%CI为(–1.14,–0.57)]、术后首次进食时间明显提前[WMD=–0.89,95%CI为(–1.15,–0.62)]、术后住院时间明显缩短[WMD=–2.38,95%CI为(–3.44,–1.32)]、保肛率明显增高[OR=2.35,95%CI为(1.67,3.30)]、局部复发率明显降低[OR=0.25,95%CI为(0.13,0.47)],而两种手术术中淋巴结切除数目[WMD=–0.99,95%CI为(–2.11,0.12)]和3年无瘤生存率[OR=0.91,95%CI为(0.54,1.54)]比较差异无统计学意义。与行开腹手术比较,行腹腔镜手术的术后总并发症[OR=0.34,95%CI为(0.26,0.43)]、吻合口漏[OR=0.40,95%CI为(0.22,0.73)]、肺部感染[OR=0.32,95%CI为(0.18,0.57)]、肠梗阻[OR=0.30,95%CI为(0.17,0.53)]及切口感染[OR=0.39,95%CI为(0.25,0.62)]发生率均明显降低,而2组的盆腔感染[OR=0.64,95%CI为(0.17,2.45)]、吻合口出血[OR=0.54,95%CI为(0.22,1.34)]、尿潴留[OR=0.71,95%CI为(0.34,1.48)]及尿路感染[OR=1.22,95%CI为(0.45,3.30)]发生率比较差异均无统计学意义。结论新辅助放化疗后,采用腹腔镜治疗仍较传统开腹手术更安全、有效及可靠,但是还需要更多的临床随机对照研究来提供更加准确可靠的结果。     

手助腹腔镜与开腹脾切除术对巨脾患者 临床疗效差异的Meta 分析

目的 探讨手助腹腔镜脾切除术（HALS）与开腹脾切除术（OS）对巨脾患者临床疗效的差异。方法 检索中国知网（CNKI）、中国生物医学数据库（CBM）、万方数据库、维普科技期刊（VIP）、PUBMED、 COCHRANE LIBRARY 等数据库，查找关于HALS 和OS 对巨脾患者临床疗效的临床随机对照实验或非随 机对照实验文献，再用Rev Man 5.3 系统评价软件进行统计学分析并阐述统计学结果。结果 检索出有关文献 258 篇，最终纳入分析文献8 篇，Meta 分析结果显示HAL 与OS 比较，术中出血量[ 加权均数差（WMD）= -135.437（95%CI ：-251.405，-19.469），P <0.05]、手术时间[WMD=41.097（95%CI ：18.036，64.159），P < 0.05]、术后肠道排气时间[WMD=0.927（95%CI ：-1.401，-0.452），P <0.05]、术后住院时间[WMD=-2.557 （95%CI ：-3.200，-1.914），P <0.05] 差异有统计学意义，而术后并发症发生率[Ol ^ R=0.555（95%CI ：0.289， 1.064），P >0.05] 差异无统计学意义。结论 在巨脾患者的治疗中，HALS 相较于OS 而言，其具有术中出血量少、 术后肠道排气时间早及术后住院时间短的优势，是一种合理有效的手术方式。     

人结直肠癌肿瘤干样细胞生物学特性及其与细胞自噬关系

目的:探讨人结直肠癌肿瘤干样细胞的生物特性及其与自噬发生的关系。方法:采用无血清培养法从人结直肠癌HCT116细胞中获取HCT116球细胞(结直肠癌肿瘤干样细胞);分别用克隆集落形成实验、成球实验、Transwell实验检测HCT116细胞与HCT116球细胞的增殖能力、自我更新能力及侵袭和迁移能力,用免疫荧光法检测两种细胞中自噬标志物LC3B的荧光表达,并用RT-PCR和Western blot分别检测两种细胞中LC3B及自噬相关基因ATG5、ATG7的mRNA与蛋白表达。结果:HCT116球细胞克隆形成能力、新成球能力以及侵袭与迁移能力均较HCT116细胞明显增强(均P0.05)。HCT116球细胞中LC3B的荧光表达强度较HCT116细胞明显增高(P0.05);HCT116球细胞中LC3B、ATG5、ATG7的mRNA和蛋白表达量较HCT116细胞均显明显升高(均P0.05)。结论:结直肠癌肿瘤干样细胞较结直肠癌细胞具有更强的自我更新和体外增殖能力,以及更强的侵袭和迁移能力,该生物学特性可能与其高自噬活性密切相关。     

结直肠癌肝转移病人原发灶切除的临床意义及其预后影响因素分析——基于SEER数据库的倾向得分匹配分析

目的 基于SEER数据库探讨不可切除转移灶的结直肠癌肝转移病人(CRLM)原发灶的切除对生存预后的影响并进一步分析其预后相关危险因素.方法 获取SEER数据库中2010～2015年结直肠癌肝转移病人的临床及预后资料.根据标准筛选病例,最终获得高价值临床资料3920例,其中化疗联合原发灶切除组(联合组)3232例,单纯化...     

RCN3在结肠癌中的表达及其临床意义

目的利用生物信息数据库结合生物实验分析RCN3(Reticulocalbin 3)在结肠癌中的表达及其临床意义。方法选取结肠癌HT29和SW620细胞以及结肠正常黏膜细胞FHC进行培养, 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)实验验证RCN3在细胞中的表达情况。利用Ualcan数据库获取RCN3在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达数据。从LinkedOmics数据库获取RCN3的共表达基因信息, 通过基因本体论分析(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析确定这些RCN3共表达基因参与的生物学过程及相关功能。利用STRING数据库构建RCN3相关编码基因的蛋白互作网络。最后, 根据GEPIA、Ualcan和LinkedOmics生物数据库共同对比分析RCN3的表达与结肠癌患者临床预后的关系。结果 qRT-PCR和Western-blot实验结果显示HT29和SW620结肠癌细胞中RCN3的mRNA和蛋白表达水平均高于FHC正常细胞(均P<0.05)。通过分析生物数据库结果显示, 结肠癌组织中RCN3的表达水平高于正常结...     

基于SEER数据库的胃癌肝转移预后因素分析与预后模型构建

背景与目的：胃癌其因具有恶性程度高、易早期转移等特点而导致患者往往具有较差的临床预后,其中胃癌肝转移（GCLM）更是导致患者死亡的主要因素,然而,目前对于GCLM的预后评价手段仍然存在着一定的不足。因此,本研究利用SEER数据库分析GCLM患者的临床病理特征和预后风险因素,从而建立具有良好预测能力的评估模型,以提升对患者个体化预后的评估能力。 方法：从SEER数据库中提取2010—2015年确诊的GCLM患者的临床资料。根据纳入和排除标准,严格筛选后纳入研究病例共2 554例,按7:3比例随机分配为建模集（1 790例）和验证集（764例）,比较建模集与验证集中患者的临床基线特征差异,用Cox等比例回归模型与Fine-Gray竞争风险模型分别筛选出GCLM患者总体生存期（OS）与癌症特异性生存期（CSS）的独立危险因素。基于建模集Cox或Fine-Gray风险模型的多元回归分析及AIC因素优化的结果,构建预测GCLM患者OS或CSS的列线图模型。最后,采用一致性指数、ROC曲线和校正曲线评估模型预测的可靠性。 结果： 建模集与验证集患者的基线特征无明显差异。分析结果显示,患者年龄、化疗、肿瘤分级、原发灶切除和原发灶数目是影响GCLM患者OS预后的独立危险因素,而化疗、肿瘤分级、原发灶切除和原发灶数目是影响GCLM患者CSS预后的独立危险因素（均P<0.05）。基于上述指标分别构建列线图模型并进行评价,预测OS与CSS列线图模型的一致性指数均明显高于AJCC-TNM分期系统（建模集：0.706 vs. 0.560、0.670 vs. 0.554;验证集：0.769 vs. 0.534、0.744 vs. 0.518）,并且ROC曲线分析亦展示出预测模型具有较高的准确度。最后,校正曲线分析显示,构建的列线图模型预测患者OS或CSS的生存率与实际观察值均具有良好的一致性。 结论： 基于SEER数据库分析构建的列线图模型在预测GCLM患者OS和CSS方面有较高的准确性,将有助于临床医师对GCLM患者制定个体化的治疗策略。