儿科临床教学中培养学生创新思维探讨

随着信息技术、分子生物学技术、数字影像技术以及其它相关技术在医学的不断渗透，现今临床医学已成为诸多技术的集合体。医学已是一门不断以医学知识的创新及创造性应用各领域知识的医学服务学科。儿科作为临床医学之一同样需要创新。同时，随着医疗市场的改革，对人口素质的要求越来越高，健康成为人民的第一需要，儿童是祖国的未来，优生优育是计划生育的重要内容。因此，培养儿科专业学生的创新精神和实践能力势在必行，已成为高等教育改革的首要和核心问题，为此，首先需要解决以下几个问题。     

自身免疫性肝炎并发2次自发性细菌性腹膜炎1例

患者陈×,女,59岁。因反复乏力、纳差、关节疼痛,肝功异常18年,加重伴眼黄半月于1992年9月15日入院。患者74年发病,肝大,肝功ALT波动,A/G比例下降以后倒置。81年出现发热后检查ANA⊕,RF⊕,ESR120-150mm/h,肝、肾功及心肌损害,并有中度贫血,考虑自身免疫性疾病,用糖皮质激素治疗4月好     

用猪肝细胞型混合生物人工肝支持系统治疗肝衰竭的初步研究

目的 对培养猪肝细胞型混合生物人工肝支持系统治疗肝衰竭的可行性进行初步评价。方法 采用自行研制的以新生实验小型猪肝细胞为基础的混合生物人工肝支持系统，对5例慢性重型肝炎患者进行体外人工肝支持，综合评价其临床疗效和安全性。结果 5例患者经混合人工肝支持后，肝衰竭均得到不同程度的控制，表现为临床症状和肝衰竭相关指标好转，肝性脑病改善。最终2例好转出院，1例经肝移植存活，2例 死亡，死亡原因与不良反应无关。结论 猪肝细胞型混合生物人工肝系统可用作重型肝炎肝衰竭的辅助支持和治疗。     

应用低压逆相脂质体包裹技术提高小分子Mart-127-35的免疫原性

为提高恶性黑色素瘤抗原Ｍａｒｔ ｌ2 7-3 5肽的免疫原性 ,有效地在体诱发保护性免疫应答 ,本研究采用负压逆相蒸发技术 (ＲＥＶ) ,制备脂质体 ,包裹Ｍａｒｔ 12 7 3 5肽 ,免疫小鼠 ,并与常规应用完全弗氏佐剂 (ＣＦＡ)相比较 ,观察 2种方法对提高该小肽免疫原性的影响。1　材料与方法1.1　脂质体包裹Ｍａｒｔ 1肽的制备与鉴定　根据参考文献 [1]的方法 ,略做改动。所得产物对ＰＢＳ(4℃ )透析过夜 ,去除游离肽和痕量有机溶剂。终产物用 0 .4 μｍ滤膜过滤。取部分用磷钨酸负染 ,在透射电镜下放大 4～ 5万倍观察形态 ,余分装保存于 - 70℃冰…     

氨茶碱对哮喘缓解期儿童TH相关细胞因子调节作用的实验研究

目的：探讨氨茶碱对哮喘缓解期患儿抗炎作用免疫机理。方法：采集20例缓解期哮喘儿童PBMCs与氨茶碱共同培养，按不同浓度（0、5、10、20mg/L）分为哮喘对照组（ACG）、处理组（ATG1）、ATG2和ATG3，同时设立正常对照组（NCG）。采用ELISA检测培养24h后各组PBMCs上清液中IL-4、IL-10、IFN-γ浓度和血清IgE浓度，同时计数外周血EOS。结果：哮喘缓解期患儿EOS和IgE水平均明显高于NCG；ACG组IL-4、IL-10明显高于NCG，IFN-γ明显低于NCG；20mg／L氨茶碱能显著抑制IL-4、IL-10分泌，提高IFN-γ的分泌，逆转IL-4/IFN-γ比值。结论：在哮喘缓解期患儿仍然存在TH2亚群功能亢进；20mg／L的氨茶碱可以通过纠正TH1和TH2细胞因子的失衡状态而发挥抗炎作用。     

非生物人工肝在重型肝炎患者过渡肝移植中的应用价值

目的　评价非生物人工肝对重型病毒性肝炎 (重型肝炎 )患者等待肝移植的过渡支持作用与价值。方法　采用血浆置换和血浆吸附两种非生物人工肝支持疗法 ,对 8例拟定肝移植的中晚期重型肝炎患者进行人工肝过渡支持。结果　 8例重型肝炎患者经人工肝支持 ,4例肝衰竭得到较好的控制 ,4～ 13d后成功等到供肝。另 4例肝衰竭控制不明显 ,病情呈进行性加重 ,在待肝过程中 (人工肝支持后 3～ 8d)死亡。结论　非生物人工肝对等待肝移植的重型肝炎患者有一定的过渡支持作用 ,能否最终成功过渡与患者肝衰竭程度、并发症及待肝时间密切相关。     

嗜麦芽窄食单胞菌致超早产儿肺部感染1例并文献复习

嗜麦芽窄食单胞菌（stenotrophomonas maltophilia , SMA）,亦称嗜麦芽寡养单胞菌,广泛存在于动物体内、土壤、水,为条件致病菌,近年来已成为新生儿感染的重要致病菌之一,常易发生医院内获得性感染［1］。尤其是早产儿免疫力低下,在应用广谱抗菌药物及进行各种频繁侵入操作后,易引起内源性或外源性交叉感染［2］。感染后常症状重、控制难,在临床抗菌药物的选择及治疗上依旧存在较大困难。特别是针对超早产儿 SMA 肺部感染后治疗在国内外相关报道很少。因此本文就本院收治的1例极低超早产儿（出生体质量为1095 g ,胎龄27＋2周）SMA 肺部感染的临床特点及诊治经过进行回顾性分析,为肺部感染 SMA 的早产儿临床治疗提供指导依据。     

人胎儿骨髓间充质干细胞体外分离培养及诱导分化为类肝细胞

目的建立人胎儿骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MMSCs)的体外分离、培养方法,体外诱导分化MMSCs为类肝细胞,观察MMSCs细胞生物学特性,并对类肝细胞进行分子生物学及功能鉴定。方法采用体外细胞培养技术,分离培养人胎儿MMSCs,在1%Matrigel做基质,2.5μmol/ml AZA预处理10~12h,HGF 10ng/ml FGF4 10ng/ml HGM培养基中诱导。用显微摄像和MTT研究细胞增殖及生长特征,用流式细胞仪、免疫组织化学和RT-PCR鉴定细胞表型。采用ELISA法检测培养上清中人清蛋白水平。结果24h换液后可获得约(300±80)个贴壁细胞;培养细胞在种植后1~3d为生长滞留期,第4天达到对数生长期,以后进入到平台期,细胞分裂指数曲线的趋势与生长曲线类似。连续传10代后,每个胎儿来源的MMSCs可扩增达1011~1012个细胞。MMSCs表型为CD166阳性,CD34阴性。在添加FGF4和HGF的Matrigel上诱导培养的MMSCs在21~28d时,细胞形态由长梭形变为三角形、多角形或类圆形。细胞转圆率为40%~50%,双核细胞比率5%~7%。免疫组化和RT-PCR检测显示未诱导培养的MMSCs中,有较少的细胞表达AFP及其mRNA,未见其他肝脏特有的转录因子或者胞浆蛋白标志。诱导早期可见较多细胞表达GATA4、AFP和CK19及其mRNA,至诱导后期表达下降,而ALB、CK18、GST-π和肝细胞转录因子HNF-1α表达逐渐上升。ALB、CK18阳性细胞比例达61%~65%。未诱导分化的MMSCs没有分泌ALB,诱导分化的MMSCs以时间依赖方式产生清蛋白。结论人胎儿MMSCs分离成分单纯,增生旺盛。诱导培养可获得高比例的类肝细胞。MMSCs向类肝细胞的横向分化是先分化为肝前体细胞,再分化为成熟肝细胞,在本实验诱导条件下可获得在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞。诱导后MMSCs已具备肝细胞特有的功能性特征。