中药复方防治胃癌的实验研究机制概述

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率居所有肿瘤第2位[1]。胃癌早期症状隐匿,容易被误诊为胃炎及胃溃疡等,我国大部分胃癌患者就诊时已属中晚期。目前我国胃癌的主要治疗方法为手术、化疗、放疗。近年来术前新辅助化疗及分子靶向药物治疗延长了进展期胃癌患者生存期,但术后5年生存率仅30%左右[2]。中医药是我国独有的传统的医疗优势。中药复方具有化学成分复杂、药理作用多靶点多层次多环节的特点,且干扰因素众多、剂型多样。     

胃复方对人胃癌BGC-823细胞移植瘤裸鼠作用及其对c-Myc、人端粒酶逆转录酶基因表达的影响

目的:观察胃复方对人胃癌BGC-823裸鼠的抑瘤作用及c-Myc、人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响,评估胃复方作用及其可能的作用机制。方法:建立人胃癌BGC-823裸鼠模型;将成功建立的裸鼠胃癌皮下移植瘤模型的40只荷瘤鼠随机分为5组(n=8):模型对照组、胃复方低剂量组、胃复方高剂量组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合中药组,连续给药4周。每7天记录肿瘤长径、短径,计算瘤体体积并绘制肿瘤生长曲线图;给药4周后处死所有荷瘤鼠,剥离皮下移植瘤称瘤重、计算抑瘤率;免疫组织化学法检测瘤体组织c-Myc、hTERT蛋白表达。结果:1)胃复方对人胃癌BGC-823裸鼠移植瘤具有明显抑制作用,各剂量间有量效关系。其中胃复方低剂量组、胃复方高剂量组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合中药组的抑瘤率分别为21.06%、45.89%、30.65%、59.42%。氟尿嘧啶联合中药组效果最好。2)瘤重显示与模型组比较,各药物组瘤重均有不同程度的减轻差异有统计学意义(P 0.05);其中氟尿嘧啶联合中药组降低明显。3)肿瘤生长曲线图显示与模型组比较,各药物组瘤体积均有一定程度缩小差异有统计学意义(P 0.05)。4)与模型组比较,药物组均能下调c-Myc、hTERT蛋白表达量差异有统计学意义(P 0.05)其中氟尿嘧啶联合中药组下降最明显。结论:胃复方能够抑制人胃癌BGC-823细胞BALB/c-nu裸鼠皮下移植瘤生长,可能与下调c-Myc、hTERT蛋白表达有关,并且与氟尿嘧啶联合用药有增效作用。     

胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞增殖影响的实验研究

目的基于过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、垂体肿瘤转化基因(PTTG)途径探讨胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞株增殖的影响。方法制备胃复方含药血浆,用不同浓度含药血浆作用人胃癌BGC-823细胞株,24 h、48 h、72 h后分别用MTS法检测细胞增殖抑制率并计算半数抑制率IC_(50)。并以1/4IC_(50)浓度胃复方含药血浆作用胃癌BGC-823细胞株72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡变化、Western blot方法测定人胃癌BGC-823细胞中PPARγ、PTTG、原癌基因(c-Myc)、端粒酶亚单位(h TERT)蛋白表达情况。结果胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞有明显的增殖抑制作用,且呈剂量及时间依赖性,5%、10%、20%浓度的药物干预后各组间比较差异有统计学意义(P 0. 05),而10%浓度以上的各药物组细胞生长大部分停滞,24 h、48 h各组间比较差异无统计学意义(P 0. 05),72 h各组间比较差异有统计学意义(P 0. 05)。胃复方含药血浆低、中、高剂量组IC_(50)分别为30. 32%、19. 37%、14. 69%。与空白组、PBS阴性对照组凋亡率比较,胃复方组凋亡率升高(P 0. 01)。与PBS阴性对照组比较,中剂量1/4IC_(50)含药血浆作用细胞72 h后,PPARγ蛋白表达升高(P 0. 05,P 0. 01),PTTG、c-Myc、hTERT蛋白表达下调(P 0. 01)。结论胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞有增殖抑制作用,呈时间和浓度依赖性;胃复方含药血浆可能通过上调PPARγ蛋白表达及下调PTTG、c-Myc、hTERT蛋白表达来抑制人胃癌BGC-823细胞增殖,从而诱导细胞凋亡。     

胃复方对裸鼠胃癌BGC-823移植瘤及PPARγ表达的影响

[目的]通过观察胃复方对裸鼠胃癌BGC-823移植瘤及对过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨胃复方抑制裸鼠胃癌BGC-823移植瘤的可能机制。[方法]用不同浓度的胃复方药液处理BGC-823移植瘤裸鼠,观察不同剂量胃复方干预后瘤体大小的变化,苏木精-伊红染色观察瘤体组织病理学改变、免疫组织化学和蛋白印迹法检测瘤体组织PPARγ的表达。[结果]胃复方能抑制裸鼠胃癌BGC-823移植瘤的生长,作用于移植瘤裸鼠2周后,5-Fu阳性对照组(5-Fu组)、胃复方低剂量组(低剂量组)、中剂量组、高剂量组的抑瘤率分别为30.67%、19.00%、49.52%、29.36%,以中剂量组最佳;通过免疫组织化学检测,蒸馏水组、5-Fu组、低剂量组、中剂量组、高剂量组PPAR-γ基因表达的IOD值分别为:0.04±0.02、0.05±0.01、0.05±0.01、0.09±0.02、0.06±0.01。胃复方中剂量组与其他各组比较,均差异有统计学意义(均P0.05)。蛋白印迹法检测PPAR-γ基因表达,蒸馏水组、5-Fu组、低剂量组、中剂量组、高剂量组分别为:0.316 0±0.013 6、0.724 0±0.018 1、0.564 0±0.019 9、0.718 0±0.028 9、0.570 0±0.020 0,蒸馏水组与其他各组比较差异均有统计学意义(均P0.05);5-Fu组与中剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05);5-Fu组与低剂量、高剂量组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。中剂量组与低、高剂量组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。[结论]胃复方可能通过上调PPARγ表达的途径来抑制胃癌BGC-823移植瘤的生长,且以1倍剂量效果最佳。