应用单克隆抗HBc和抗人IgM(μ链特异)检测血清抗HBcIgM试剂盒的研究

本试剂盒以自制羊抗人IgM(μ链特异)为包被抗体,鼠单克隆抗HBcIgG_3的酶结合物为指示抗体,并采用HBsAg携带者非肝炎死者肝脏提取的HBcAg。经166份病人及健康人血清1:1,000稀释后,用丹麦Dako公司和美国Sigma公司抗人IgM(μ链特异产品)包被微板进行比较,以Dako公司抗人IgM检测结果为相对标准,初步证明:自制抗人IgM与Sigma公司产品不论是相对灵敏度,相对特异性,相对预报率还是相对符合率等四个指标,X~2测定结果并无显著差别。己初步用于临床实验室诊断,结果满意。     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,其脾细胞与Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞株(HE_(20)IB_8、HE_(21)IIG_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2～6.4×10~6。因相捕捉HBeAg、HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂中的包被抗体配合人抗HBe-HRP与Abbott试剂结果非常一致。     

单项HBVDNA阳性时以原血清检测抗-HBc及意义

HBVDNA是乙肝病毒感染并复制的直接证据。我们的前期实验表明,在101例以常规检测乙肝五项全阴性的门诊患者血清中,经PCR检测有25例HBVDNA阳性,阳性率为24.8％。虽然,PCR是目前公认的最敏感的检测方法之一。但是,这样高的单项HBVDNA阳性检出率,能否真实反映感染乙肝病毒的患者血清中其它乙肝标志物的存在状况?     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,取该鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞系(HE_(20)1B_8,HE_(21)2C_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2×6.4×10~6。因相捕捉HBeAg,HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验均证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂包被抗体,配合人抗HBe-HRP,结果与Abbott试剂非常一致。     

利用多组套式引物检测庚型肝炎病毒RNA

利用庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）ＮＳ３～５区序列合成了四组套式引物，建立了灵敏、特异的庚型肝炎病毒ＲＮＡ双扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。用此方法检测了１０份庚型肝炎病毒抗体阳性患者血清及１０份阴性的健康人血清。前者不同组引物的检出率为ＮＳ３（１）引物９份阳性，ＮＳ３（２）引物８份阳性，ＮＳ４引物４份阳性，ＮＳ５（１）引物５份阳性，ＮＳ５（２）引物９份阳性；后者各组引物检测均为阴性。结果表明，庚型肝炎病毒不同区域引物用于ＲＴ－ＰＣＲ检出率差异较大。ＮＳ３（１）及ＮＳ５（２）这两组引物检出率最高，更适合用于ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒ＲＮＡ。     

重组抗原检测戊型肝炎病毒IgM抗体及其意义

用戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测肝炎患者和健康供血人群血清中抗戊型肝炎病毒IgM类抗体(抗-HEV IgM)，并评价其检测意义。在与合成肽抗原比较检测的77份急性戊型肝炎患者血清中，有54份(70.1%)由重组抗原捡测抗-HEV IgM阳性。其阳性率明显高于台成酞抗原(21/77,27．3％)。15例戊型肝炎患者双份血清用重组抗原ELISA检铡，急性期血清有11份抗-HEV IgM阳性，恢复期血清仅1份阳性。抗-HEV IgG阳性的健康供血者(8人)和甲、乙、丙型肝炎患者(11例)无1例IgM抗体阳性。结果表明，抗-HEV IgM可以作为戊型肝炎病毒新近感染的标志。HEV重组抗原检铡抗-HEV IgM敏感性高，特异性强，有助于戊型肝炎病毒感染的早期诊断。     

竞争EIA检测原倍血清中抗－HBc的实用性

竞争ＥＩＡ检测原倍血清中抗－ＨＢｃ的实用性周继文，杨守纯，任继明，罗清华目前，国内用酶免疫分析（ＥＩＡ）检测抗－ＨＢｃ的方法不一，有用先包被抗－ＨＢｃ的二步抑制法［１］，也有用直接包被ＨＢｃＡｇ的竞争法［２，３］等。但无论哪种方法，在用于临床抗－ＨＢ...     

鼠单克隆抗HBc检测病人血清抗HBc应用的研究

<正> 我们在建立分泌抗 HBc 杂交瘤细胞株后,将获得的鼠单克隆抗 HBc 进行纯化和辣根过氧化物酶标记作为酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病人血清抗 HBc 诊断试剂(下称单克隆抗 HBc 试剂),并与多年来应用HBsAg 携带者血清纯化的抗 HBe IgG 及其酶标记物作为试剂(下称多克隆抗 HBc 试剂)的酶联免疫吸附试验及应用纯化 HBcAg的免疫粘连血凝试验进行了比较。现将结果报告如下。     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和检测HBeAg抗-HBe中的应用

应用亲和层析纯化的HBeAg免疫接种BALB/C小鼠,收获脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞株融合,对淋巴细胞杂交瘤细胞生长孔上清用ELISA法进行检测,发现两个分泌特异性抗-HBe的细胞株(IB_8;2G_(11))。经有限稀释法亚克隆3次以上,扩大培养后腹腔注射同系小     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ），制成免疫层析检测试条。血清中ＨＢｓＡｇ与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果ＧＩＣＡ试条只与ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、ｅ抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所ＨＢｓＡｇ标准品，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。用ＧＩＣＡ与酶免疫法比较检测了３９５份不同血清标本中ＨＢｓＡｇ，两法符合率为９９．０％。结论ＧＩＣＡ检测血清中的ＨＢｓＡｇ特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。