过氧化物酶体增殖物辅助激活因子1 α基因多态性对糖异生基因转录的影响

目的 研究过氧化物酶体增殖物辅助激活因子1α（PGC-1α）基因482号密码子甘氨酸-丝氨酸突变（Gly482Ser）多态性对糖异生关键基因磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶（PEPCK）转录的影响.方法 （1）应用寡核苷酸诱导的定点突变和PCR技术构建PGC-1α 1444位点基因多态性表达质粒,并用普通PCR和酶切方法构建连接荧光素酶报告基因的人PEPCK启动子报告质粒PGL3-hPCK-luc.分别将PGC-1α基因482号密码子为甘氨酸的野生型表达质粒pcDNA3.1-PGC-1α（G）或482号密码子为丝氨酸的突变型表达质粒pcDNA3.1-PGC-1α（S）,与转录因子肝细胞核因子4α（HNF4α）表达质粒pcDNA3.0-HNF4α共转染进培养的人肝癌细胞及人正常肝细胞株.（2）转染48 h后检测细胞株内PGC-1α及PEPCK的mRNA水平及蛋白水平.进一步按不同组合联合转染PGL3-hPCK-luc及内参质粒PRL-SV40,培养48 h后用双荧光素酶检测试剂盒检测细胞荧光素酶的相对活性.多组间比较用单因素方差分析,2组组间比较用独立样本t检验.结果 成功构建PGC-1α 1444位点突变质粒及PGL3-hPCK-luc荧光素酶报告质粒.瞬时转染进HepG2细胞中,PGC-1α（G）与PGC-1α（S）质粒转染组PGC-1α mRNA及蛋白表达水平均明显增加,但2组间无明显差异（P＞0.05）;联合转染PGC-1α和HNF4α组的PEPCK的mRNA及蛋白表达水平较单转染PGC-1α明显增高（分别为10.40±0.70、4.50±0.50和0.86±0.18、0.99±0.09,均P＜0.05）;转染PGC-1α（G）＋HNF4α组较PGC-1α（S）＋HNF4α组PEPCK的mRNA及蛋白表达水平分别增高1.83倍和1.4倍（分别为10.40±0.70、5.35±0.23和4.50±0.50、3.00±0.40,均P＜0.05）.转染PGC-1α＋HNF4α组可显著促进PEPCK启动子活性（与单转染PGL3-hPCK-luc组比较）（分别为28.0±5.0和2.4±0.4,F=23.41,P＜0.05）;在HepG2中联合转染HNF4α时,PGC-1α（G）组较PGC-1α（S）可使PEPCK启动子相对活性增高2倍（分别为83±10和41±5,F=23.41,P＜0.001）;在L02细胞中联合转染HNF4α时,PGC-1α（G）组较PGC-1α（S）可使PEPCK启动子相对活性增高2.25倍（分别为28.0±5.0和12.6±1.5,F=60.75,P＜0.001）.结论PGC-1α可辅助激活HNF4α对PEPCK转录的促进作用,而PGC-1α基因Gly482 较Ser482对HNF4α的蛋白辅助激活作用更强,这可能为基因多态性引起蛋白表达后不同构型影响蛋白-蛋白相互作用有关.     

老年心房颤动合并骨骼肌减少症的研究进展

心房颤动(房颤)和骨骼肌减少症(肌少症)均是老年患者的常见疾病, 两者存在共同的危险因素和病理生理发病机制, 在其发生发展过程中相互作用和影响。文章主要对老年房颤合并肌少症的流行病学、危险因素、发病机制、筛查、评估和综合管理等方面的研究进展进行综述。     

2型糖尿病视网膜病变患者血清炎症因子和脂联素水平的变化

目的: 观察2型糖尿病合并视网膜病变(DR)患者血清炎症因子和脂联素的变化。方法: 110例糖尿病患者分为3组:糖尿病无视网膜病变组(DM)35例、糖尿病伴非增殖期视网膜病变组(NPDR)45例和糖尿病伴增殖期视网膜病变组(PDR)30例,并与40名正常人对照(NC组)。观察患者的体检指标,并检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h血糖(2hPG),总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、脂联素、血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)。计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果: DM组、NPDR组和PDR组患者的收缩压、体重指数、腰臀比、血清TG、LDL-C、FPG、2hPG、 HbA1c、ICAM-1、TNF-α、hs-CRP水平和HOMA-IR均高于NC组(P<0.05),而NPDR组和PDR组的收缩压、血清ICAM-1、TNF-α、hs-CRP水平和HOMA-IR均高于DM组(P<0.05)。DM组、NPDR组及PDR组的患者血清脂联素水平均低于NC组(P<0.05),而NPDR组及PDR组的患者血清脂联素水平低于DM组患者(P<0.05)。血清脂联素水平与ICAM-1、TNF-α、hs-CRP和HOMA-IR之间呈负相关(r值分别为-0.735、-0.781、-0.768、-0.752,均P<0.01),HOMA-IR与ICAM-1、TNF-α和hs-CRP之间呈正相关(r值分别为0.857、0.906、0.888,均P<0.01)。结论: 炎症因子和脂联素参与了DR的发生和发展,而脂联素可能通过拮抗炎症反应减轻胰岛素抵抗,对DR有一定的改善作用。     

亚急性甲状腺炎合并Graves病2例报道并文献复习

目的  探讨亚急性甲状腺炎合并Graves病的临床特点、诊疗及转归情况。方法  回顾性分析2例亚急性甲状腺炎合并Graves病患者的临床资料。结果  2例患者均有颈部疼痛、心悸,甲状腺肿大、触痛,血沉偏高,游离三碘甲状腺原氨酸、游离甲状腺素高,促甲状腺素低,促甲状腺素受体抗体阳性,甲状腺摄碘率正常或增高。给予强的松片、甲巯咪唑片治疗后,颈部疼痛、甲状腺触痛、心悸缓解,甲状腺功能恢复正常。结论  临床上有亚急性甲状腺炎症状伴摄碘率增高、促甲状腺激素受体抗体升高者,应考虑亚急性甲状腺炎合并Graves病的可能。

     

胰岛素泵和多点注射治疗，孰优孰劣？

对糖尿病病友来说,选择胰岛素泵持续皮下胰岛素输注（CSII）还是胰岛素每日多次皮下注射（MDI）,常常成为他们使用胰岛素时面临的难题。面对选择的岔道口,您或许疑惑,这二者到底孰优孰劣？     

维生素B12缺乏-多系统病变-从思维到诊断

维生素B12（VitB12）缺乏是一种全球性的营养素缺乏病,其发病率远比估计的高,尤其是老年人,但人们对其认识与重视程度不足,患者常出现多系统病变时才被诊断。本文报道1例VitB12缺乏引起多系统病变的患者,并通过文献复习,对叶酸、VitB12相关代谢通路与叶酸、VitB12缺乏相关疾病进行探讨,旨在提高临床医生对VitB12缺乏相关疾病的认识。同时本文在疾病的诊断过程中,坚持以患者为中心的系统思维,以问题为导向的临床诊断思维,以证据为基础的临床决策思维,鉴别诊断贯穿始终,对全科思维与疾病的一元论做了很好的诠释,相信对医务人员有较大的借鉴意义。     

PGC-1α辅助激活人PEPCK基因转录

 【目的】构建人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因启动子荧光素酶报告质粒PGL3-hPCK-luc,并探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ辅助激活因子1α(PGC-1α)在转录因子肝细胞核因子4α(HNF4α)介导下对人PEPCK基因启动子活性的影响。【方法】从人全血基因组DNA中克隆PEPCK启动子基因片段,并重组进荧光素酶报告载体PGL3-basic,将pcDNA3.1-PGC-1α、pcDNA3.0-HNF4α表达质粒与PGL3-hPCK-luc按不同组合共转染进人肝癌细胞株HepG2细胞或正常人肝细胞株LO2细胞,培养48 h后检测细胞裂解液中荧光素酶活性。【结果】通过酶切鉴定及测序证明扩增的人PEPCK启动子片段成功插入载体质粒中。转染后人PEPCK启动子基因荧光素酶活性较空白对照组增加60倍(P < 0.05);共转染质粒进HepG2细胞或LO2细胞后,HNF4α均可以增强人PEPCK启动子基因荧光素酶活性,在HepG2细胞,荧光素酶活性是对照组的2.69倍(P < 0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是对照组的3.64倍(P < 0.05);PGC-1α可以明显增强HNF4α对人PEPCK启动子的激活作用,在HepG2细胞,荧光素酶活性是PGL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.01倍(P < 0.05),而在LO2细胞中,荧光素酶活性是PGL3-HPCK-luc+HNF4α组的2.82倍(P < 0.05)。而与单一转染组相比,共转染pcDNA3.1-PGC-1α与pcDNA3.0-HNF4α显著增加了PEPCK的mRNA和蛋白表达水平(P < 0.05)。【结论】人PEPCK启动子基因报告质粒成功构建,且转录因子HNF4α可以激活人PEPCK启动子活性,辅助激活因子PGC-1α可以进一步加强HNF4α的作用。     

2型糖尿病合并脂肪性肝病患者炎性因子和脂联素的变化及意义

目的 探讨炎性因子和脂联素在2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病患者中的变化及意义.方法 共纳入观察者210例,其中健康对照组40名,T2DM组60例,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)组65例,T2DM合并NAFLD组45例.检测各组的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(GHbA1c)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、餐后2h血糖(2hPG)、空腹胰岛素(FINS)以及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体质量指数(BMI)和腰臀比.测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及脂联素.结果 NAFLD组与T2DM合并NAFLD组患者的血清ALT、GGT和BMI、腰臀比高于T2DM和健康对照组[ALT:(43.4±9.3)、(46.2±7.6)、(27.5±5.7)、(28.3±6.5)U/L,GGT:(55.3±10.4)、(54.5±11.3)、(40.3±8.4)、(38.2±10.5) U/L,BMI:(27.9±2.6)、(26.2±2.6)、(23.6±3.6)、(22.7±2.5)kg/m2,腰臀比:(0.94±0.05)、(0.96±0.07)、(0.91±0.08)、(0.89±0.05),P＜0.05或P＜0.01],T2DM组、NAFLD组与T2DM合并NAFLD组的TG、LDL-C均高于健康对照组[TG:(2.9±0.5)、(3.5±0.4)、(4.0±0.8)、( 1.3±0.2)mmol/L,LDL-C:(3.6±0.4)、(3.1±0.5)、(3.9±0.7)、(2.1±0.2)mmol/L,P均＜0.05],其中T2DM合并NAFLD组的TG高于T2DM组(P＜0.05).T2DM与T2DM合并NAFLD组的FPG、GHbAlc高于NAFLD和健康对照组[FPG:(8.5±0.6)、(8.9±0.9)、(4.6±0.7)、(4.7±0.4) mmol/L,GHbAlc:(9.3±3.6)％、(10.1±2.7)％、(5.0±0.2)％、(5.1±0.5)％,p＜0.05或P＜0.01],T2DM组、NAFLD组与T2DM合并NAFLD组的TNF-α、hs-CRP和HOMA-IR高于健康对照组[TNF-α:(90.5±10.5)、(115.3±10.1)、(197.5±13.8)、(34.3±7.5)ng/L,hs-CRP:(4.9±0.5)、(4.6±0.8)、(8.1±0.7)、(2.1±0.4) mg/L,HOMA-IR:(6.7±0.8)、(6.2±1.2)、(11.3±1.7)、(1.8±0.3),P＜0.05或P＜0.01],其中T2DM合并NAFLD组的TNF-α、hs-CRP、HOMA-1R高于单纯T2DM组(P均＜0.05).T2DM组、NAFLD组与T2DM合并NAFLD组患者的血清脂联素均低于健康对照组[(25.3±7.4)、(22.9±4.5)、(17.0±3.2)、(36.9±5.7) μg/L,P均＜0.05],其中T2DM合并NAFLD组的脂联素低于T2DM组(P＜0.05).T2DM合并NAFLD组患者血清脂联素浓度与TNF-α、hs-CRP和HOMA-IR之间呈负相关(r值分别为-0.635、-0.668、-0.752,P均＜0.01),HOMA-IR与TNF-α、hs-CRP之间呈正相关(r值分别为0.667、0.706,P均＜0.01).结论 炎性因子和脂联素参与了T2DM与脂肪性肝病的发病机制,而脂联素可能通过拮抗炎症反应减轻胰岛素抵抗,对脂肪性肝病有一定的改善作用.