奥曲肽对人肝癌细胞株BEL-7402和 MHCC97-L中血管内皮生长因子表达与合成的影响

本研究旨在探讨奥曲肽是否对人肝癌细胞中的血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响阐明其抗肿瘤血管生成的作用机制。一、材料与方法1.主要仪器和试剂 :CK型倒置显微镜 ,BB5 0 60型CO2 培养箱 ,Biocellht1型全自动酶标仪 ,Cryfuge 5 0 0S型低温离心机 ,EpicsXL2型流式细胞仪 ,PCR扩增仪 ,UV 3 0 0 0紫外分析仪OHM 0 2 6。RP MI 164 0培养基 ,牛血清白蛋白 (BSA )、胰蛋白酶均为Gibco公司产品 ,胎牛血清(FBS ,10 0ml/瓶 )为Hyclone公司产品。2 .细胞培养及处理 :人肝癌细胞株BEL 740 2及MHCC97 L由中山医院肝癌研究所提供。细…     

肛周尖锐湿疣患者外周血T细胞亚群及NK细胞的分析

目的：了解肛周尖锐湿疣T细胞亚群及NK细胞有无异常。方法：应用流式细胞仪检测尖锐湿疣患者及正常对照组T细胞亚群以及NK细胞。结果：与对照组比较患者组CD3细胞无显著性改变，CD4细胞显著降低，CD4／CD8值降低，NK细胞较正常对照组显著降低，CD8细胞显著升高。结论：尖锐湿疣患者细胞免疫功能缺陷以及NK细胞数的下降可能是导致尖锐湿疣易发病的原因。     

脐血造血干/祖细胞体外扩增实验研究

目的:探讨人脐血造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSC/HPC)在适合临床移植条件下体外扩增以获得理想的造血干/祖细胞数量的最佳细胞因子组合及扩增时间,为脐血经体外扩增后成为高体重受者克服脐血移植细胞数量不足及缩短植入时间提供客观指标。方法:采集脐血4份,分离单个核细胞(mononuclear,MNC),免疫磁珠分选(MiniMACS)CD+34细胞,分别在细胞因子组合为A:SCF+FL+TPO、B:SCF+FL+TPO+IL蛳3及C:SCF+FL+TPO+G蛳CSF支持的无血清、无基质的液体培养基中扩增培养14 d,收集扩增前、扩增后7 d及14 d的细胞进行细胞表型分析、半固体集落培养及端粒酶活性分析。结果:在含细胞因子IL蛳3组扩增培养7 d及14 d,均获得了总有核细胞数(total nucleated cells,TNC)及集落形成细胞(colony蛳forming cell,CFC)最大的扩增倍数。扩增7 d,IL蛳3组的CD+34细胞扩增倍数为(10.11±7.21 )倍,较其他两组稍低,但无统计学意义;三组CD+33细胞、CD+41细胞、CD+71细胞也得到了较大程度的扩增,IL蛳3组高于其他两组;3组扩增后的细胞端粒酶活性均上调,7 d时A值达最高,IL蛳3组低于G蛳CSF组(P =0.008)。随着扩增时间的延长,扩增后的细胞端粒酶活性下降;CD+34细胞占TNC的比例也明显下降,部分定向祖细胞的比例也出现先升高后     

疣状胃炎外周血T淋巴细胞亚群检测及其临床意义

目的:检测疣状胃炎患者(n=35)外周血T淋巴细胞亚群CD_3+、CD_4+、CD_8+,并与107例慢性浅表性胃炎中的幽门螺杆菌(Hp)感染的患者(n=16)比较。方法:所有患者均通过胃粘膜活检快速尿素酶试验和~(14)C-尿素呼气试验以确定是否有Hp感染,用流式细胞术方法检测疣状胃炎和Hp感染的浅表性胃炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD_3+、CD_4+、CD_8+。结果:疣状胃炎Hp感染率明显高于慢性浅表性胃炎者(P<0.01);与Hp感染的浅表性胃炎比较,疣状胃炎CD_3+、CD_8+降低以及CD_4+/CD_8+比值增加(P<0.01,P<0.05)。疣状胃炎中Hp阳性组与Hp阴性组比较CD_8也明显降低(P<0.05)。结论:疣状胃炎发病可能有免疫因素参与。     

奥曲肽抑制人肝癌细胞血管内皮生长因子的表达与合成

目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达及VEGF合成与分泌的影响.方法利用酶联免疫吸附法、流式细胞仪、逆转录-聚合酶链反应检测不同剂量的奥曲肽对人肝癌细胞株MHCC97-L的VEGF合成与分泌及VEGF mRNA表达的影响.结果奥曲肽(10-5～10-10 mol/L)可以抑制人肝癌细胞株 MHCC97-L中VEGF mRNA表达及VEGF合成与分泌,呈剂量依赖性,可见饱和现象.结论奥曲肽能够抑制人肝癌细胞株MHCC97-L中VEGF的表达、合成和分泌,可能是奥曲肽抗血管新生的作用机制之一.     

脐血造血干/祖细胞体外扩增后端粒酶活性的表达

目的 探讨脐血造血干／祖细胞在不同细胞因子支持的体外扩增过程中端粒酶活性的表达及意义。方法 应用PCR—ELISA方法检测脐血造血干／祖胞体外扩增前后的端粒酶活性、细胞扩增倍数及免疫表型的变化。结果 新分离的脐血CD34^ 细胞表达弱的端粒酶活性，体外培养7d，细胞端粒酶活性达最高，干／祖细胞扩增倍数也明显增高，随着培养时间的延长，细胞分化成熟，端粒酶活性减低。结论端粒酶的活性的升高与造血干／祖细胞的扩增相一致；从临床应用价值来看，脐血CD34^ 细胞体外扩增时间应以7d内为宜；IL-3促分化能力大于G-CSF。