人结肠上皮细胞的原代培养

目的:探讨人结肠上皮细胞的分离、体外培养方法,为研究结肠功能及相关疾病提供细胞模型。方法:人正常结肠黏膜取自结肠癌病人手术切除的癌旁正常组织,运用胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化分离,接种于适当培养液内,根据成纤维细胞贴壁时间的差异并运用胶原酶来纯化。结果:联合运用Ⅰ、Ⅳ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化可分离出健全绒毛隐窝单位,在适当的培养条件下可长出单层不规则形细胞,经鉴定为人结肠上皮细胞。结论:使用合适的方法及培养液,可以分离培养出正常人结肠上皮细胞。     

小鼠脂多糖应答蛋白LRP的大肠杆菌表达及其兔抗血清抗体的制备

目的：原核表达小鼠脂多糖应答蛋白并制备兔抗mLRP抗血清.方法：参考GenBank中已登录的人lrp-cDNA序列,对小鼠的同源表达序列标签（EST）序列进行拼接,预测mlrp cDNA序列.用设计的引物,进行RT-PCR,从脂多糖刺激的NIH3T3细胞中扩增mlrp的cDNA序列,克隆入pTAT载体中,构建mlrp的原核表达载体.以其转化在大肠杆菌中诱导表达后,将获得的His-TAT-mLRP融合蛋白免疫家兔,用丙酮沉淀全菌蛋白吸附法制备纯化的抗mLRP血清,用Western blot鉴定抗体的特异性.结果：预测的mlrp cDNA的长度为1 905 bp.将克隆获得的1 554 bp大小的mlrp-cDNA编码区序列插入pTAT质粒中,在大肠杆菌中表达出His-TAT-mLRP融合蛋白.以其免疫家兔,制备了特异性兔抗mLRP的血清.结论：mlrp的原核表达及特异性兔抗mLRP血清的制备,为进一步研究mLRP的功能奠定了基础.     

上消化道Dieulafoy病34例诊治分析

目的：探讨上消化道Dieulafoy病的临床特点、诊断及治疗。方法：对34例Dieulafoy病进行回顾性分析和总结。结果：上消化道Dieulafoy病是黏膜下恒径小动脉畸形,主要表现为间歇性、无痛性消化道大出血。采用急诊内镜检查和内镜治疗效果明显。结论：Dieulafoy病的临床表现和内镜特征是提高诊断率,减少漏、误诊的关键,内镜为Dieulafoy病的诊断和治疗的首选方法,具有良好的安全性及有效性。     

人lrp-cDNA全长编码区的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:扩增人lrp-cDNA全长编码区、并在大肠杆菌中表达和鉴定.方法:提取脂多糖刺激后HEK293细胞的总RNA,通过RT-PCR的方法扩增出全长人lrp序列,将其克隆入原核表达载体pcTAT后转化大肠杆菌诱导表达,做SDS-PAGE分析;并用免疫印迹法鉴定6His-TAT-LRG融合蛋白表达.结果:测序结果表明,获得了全长人lrp-cDNA全长编码区,其序列与GenBank已经公布的不完全一致;SDS-PAGE分析表明,6His-TAT-Lrp融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,表达量约占菌体总蛋白的17%;免疫印迹法鉴定显示,该融合蛋白可与相应抗血清产生阳性反应.结论:得到人lrp-cDNA全长编码区序列,并成功表达,为人lrp功能的深入研究奠定了基础.     

人Lrp蛋白多克隆抗体的制备

目的:制备人Lrp蛋白多克隆抗体. 方法:克隆全长lrp-cDNA编码序列并进行原核表达与鉴定. 用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化原核表达的全长Lrp蛋白,获得纯度较高的目的蛋白. 用纯化后蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并吸附去除非特异性反应成分. 结果:Western印迹结果表明,纯化前后的抗血清在69 ku处均检测到目的蛋白条带,说明吸附纯化后的抗体可以与Lrp蛋白特异结合. 而纯化后抗体Western印迹结果目的条带只有一条,说明吸附纯化后得到高特异性抗血清,其免疫印迹的效价在10-6以上,有较高免疫印迹滴度. 结论:成功制备了高效价高特异性的兔抗人Lrp蛋白的多克隆抗体,为Lrp功能的进一步研究提供了重要的实验工具.     

高原高寒环境对大鼠胃黏膜损伤及胃黏膜NO表达的影响

目的观察高原高寒环境对大鼠胃黏膜及大鼠血清和胃黏膜组织中NO表达的影响。方法 SD雄性大鼠43只,随机分成高原环境组、高原高寒环境组与对照组,观察胃黏膜变化并测定大鼠血清和胃黏膜组织中NO表达水平。结果高原环境组与高原高寒环境组大鼠胃黏膜产生不同程度的损伤,与对照组比大鼠血清胃黏膜组织中NO表达水平比较均有显著差异(P0.01),高原高寒环境组与高原环境组大鼠血清和胃黏膜组织中NO表达水平比较也有显著差异(P0.01)。结论高原高寒环境对大鼠血清和胃黏膜组织中NO含量有显著影响。     

磁控胶囊胃镜人工智能标注方法的建立与评价

目的:探索磁控胶囊胃镜人工智能标注胶囊胃镜图片的方法,以提升内镜医师的工作效率并减少人工智能阅片盲区。方法:按照磁控胶囊胃镜相关共识意见,由10名内镜医师和1名有医学背景的磁控胶囊胃镜研发人员对深圳市资福医疗技术有限公司2020年3月至8月招募的本公司35名磁控胶囊胃镜受检者(以下简称受检者)共14 775幅磁控胶囊胃...     

178例老年人消化性溃疡临床特征及埃索美拉唑疗效观察

目的：分析总结老年消化性溃疡（peptic ulcer,PU）的临床特征,观察埃索美拉唑治疗PU的效果。方法：调查我院2004年1月～2008年12月经胃镜确诊的178例老年PU患者的临床症状、溃疡发生部位、并发症及伴随疾病、治疗效果。治疗方案：Hp阴性患者：埃索美拉唑40mg,晨起口服（1次／d）。Hp阳性患者：埃索美拉唑40mg,晨起口服（1次／d）＋阿莫西林1g（2次／d）＋克拉霉素0．5g（2次／d）,疗程：胃溃疡6周,十二指肠球部溃疡4周,阿莫西林和克拉霉素疗程均为10d。结果：老年患者上腹痛多不典型;伴发病发生率高,高达52．81％。胃溃疡经埃索美拉唑或三联治疗6周后,愈合率86．11％,有效率94．44％。十二指肠溃疡经埃索美拉唑或三联治疗4周后,愈合率83．72％,有效率96．52％。复合性溃疡经治疗6周后,愈合率85．00％,有效率95．00％。所有患者3d后上腹痛缓解总有效率为100％。埃索美拉唑治疗不良反应发生率5．06％。结论：老年人消化性溃疡有临床表现不典型,并发症多等临床特点;埃索美拉唑应用于治疗老年PU具有治愈率高,起效快、作用持久稳定、不良反应较少的特点。