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大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养和鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研究大鼠骨髓内皮祖细胞(EPC)分离、培养并向内皮细胞方向诱导分化的方法和条件。方法从大鼠骨髓中分离单个核细胞.经差速贴壁后取二次贴壁细胞选择性诱导培养2W。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法以及vWF、Flk-1免疫荧光染色法鉴定EPC;流式细胞术(FACS)检测EPC纯度;细胞培养液一氧化氮(NO)含量测定分析EPC功能。结果二次贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展,5d形成集落,7~10d增殖加速并出现条索状结构,2W大部分细胞呈多角形。Dil—ac—LDL、FITC-UEA-1双染.vWF及Flk-1免疫荧光染色阳性率均〉70%。FACS检测其中vWF阳性细胞占77.93%.Flk-1阳性细胞占81.50%。二次贴壁并经诱导培养的细胞培养液中NO含量明显高于普通培养的细胞.但低于成熟内皮细胞(P〈0.05)。结论大鼠骨髓富含EPC,体外诱导培养后可以表现出内皮细胞的部分特征。 相似文献
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目的: 检测大鼠心肌在缺氧条件下发生细胞凋亡的变化,以及乙醛脱氢酶2(ALDH2)在此过程中所起的作用。 方法: 运用缺氧模型,比较大鼠心肌细胞在单独缺氧和经ALDH2特异性抑制剂daidzin预处理24 h后缺氧的凋亡改变,酶活性检测采用乙醛代谢法、凋亡的测定通过用Hoechest 33324、免疫荧光标记用流式细胞仪测定和TUNEL试剂盒检测。 结果: 心肌细胞在daidzin作用下,其酶活性被抑制而细胞无凋亡发生。在daidzin预处理24 h后再经缺氧诱导,比单独缺氧引起的心肌细胞凋亡更为明显:表现为在Hoechest 33324染色中,细胞核溶解和核碎裂(P<0.05),FACS和TUNEL显示,凋亡细胞明显增加(P<0.05)。 结论: ALDH2酶活性降低可增加心肌细胞对缺氧导致凋亡的易感性,ALDH2对缺氧引起的细胞凋亡有拮抗作用。 相似文献
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目的检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)被daidzin抑制时对大鼠心肌细胞在缺氧状态下发生凋亡和信号转导的影响,验证乙醛脱氢酶2 (ALDH2)在此过程中所起的作用.方法在确定daidzin的最佳抑制浓度后,运用心肌细胞缺氧模型,比较大鼠心肌细胞在单独缺氧和经ALDH2特异性抑制剂daidzin预处理24 h后缺氧的凋亡和MAPK信号通路的改变。酶活性检测采用乙醛代谢法、ROS的检测用C400测定,凋亡的测定通过用Hoechest 33324、免疫荧光标记的流式细胞仪和TUNEL试剂盒检测,MAPK信号通路酶(ERK1/2、JNK、P38)磷酸化的改变用Western印迹法检测。结果60μmol/Ldaidzin浓度是ALDH2酶活性被抑制而细胞无凋亡发生的最佳工作浓度。在daidzin (60μmol/L)预处理24 h后再经缺氧诱导,比单独缺氧引起的心肌细胞凋亡更为明显:表现为在Hoechest 33324染色中,细胞核溶解和核碎裂(P<0.05),在FACS和TUNEL的检测中,凋亡细胞明显增加(P<0.05),经凋亡后的死亡细胞有增加趋势但差异无统计学意义,同时与MAPK信号通路有关的磷酸化ERK1/2、JNX和P38的酶活性均表达增强。结论daidzin使ALDH2酶活性降低可增加心肌细胞对缺氧导致凋亡的易感性,其机制是与细胞ROS和凋亡的增加及MAPK信号通路的激活有关。ALDH2对缺氧引起的细胞凋亡损伤具有保护作用。 相似文献
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摘要 目的 〖HT5"SS〗编制医院感染管理人员消毒知-信-行(KAP)调查问卷并评价其信效度。方法 编制调查问卷,筛选135名医院感染管理人员进行问卷调查,随机抽取其中的32人,于10 d后再次进行问卷调查。利用组内相关系数分析重测信度;Cronbachs α系数分析问卷的内部一致性信度。利用各条目与各维度得分、总问卷得分的相关性评价问卷的内容效度。利用探索性因子分析和验证性因子分析评价问卷的结构效度。结果 两次进行问卷测量显示各项组内相关系数均大于0.9(P>0.05);知识、态度和行为维度Cronbachs α系数分别为0.756、0.763和0.816。3个维度和总问卷的相关系数分别为0.765、0.798和0.740,各维度均呈正相关(r>0);探索性因子分析显示,3个公因子方差贡献率分别为32.994%、19.794%和27.638%,指标的公因子方差比在0.525~0.858之间;验证性因子分析显示,NC值为2.637,GFI、CFI和IFI值分别为0.905、0.940和0.916。结论 该问卷具有较好的信效度,其结果有利于量化评价医院感染管理人员消毒知-信-行情况,可为同类研究提供参考。 相似文献
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目的了解西安地区医疗机构的德国小蠊体表带菌状况,为医疗机构的蟑螂防治和院内感染控制提供理论依据。方法采用人工诱捕法获得德国小蠊。对送检的样本进行分类纯化培养,使用全自动微生物鉴定系统对分离的微生物进行种属鉴定。结果医疗机构不同部门捕获的德国小蠊带菌检出率为100.00%;不同部门细菌菌落总数由高到低依次为:病房、门诊、药房、检验科、血透室和手术室;大肠埃希菌检出率最高,在各个部门均有检出,检出率为100.00%;其次为金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌,检出率分别为42.55%和40.43%;沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌的检出率最低,均为6.83%。结论德国小蠊作为传播感染的重要媒介生物应引起重视,医疗机构应加大蟑螂的监测和防治力度,降低媒介生物传播院内感染的风险。 相似文献
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背景 下呼吸道感染特别是医院获得性肺炎发病率较高,增加了大量医疗负担,早期诊断对于下呼吸道感染的防治具有重要价值.目的 分析肺部细菌感染患者支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞分类特点及BALF中性粒细胞比例对下呼吸道细菌感染的诊断价值.方法 纳入2018年1月-2... 相似文献
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目的 通过分析西安市医疗机构使用中消毒液有效成分含量与染菌量监测数据,了解使用中消毒液合格情况,规范消毒液的使用,有效控制医源性感染的发生.方法 采集医疗机构使用中消毒液,按照《消毒技术规范(2002)》进行卫生学评价.结果 2016年-2019年共监测西安市医疗机构使用中消毒液606份,总合格率为71.8%,4年合格... 相似文献