分离肝细胞纯化培养方法的比较研究

目的 评价一种可提高肝细胞纯度和存活率的分离培养方法。方法 以体外两步胶原酶灌流法分离肝细胞,然后将其分成两组,对照组在接种培养前不经进一步处理,试验组则在应用适宜的Percoll梯度液离心纯化之后再行培养。藉台盼蓝拒染法比较两组肝细胞的存活率,采用MTT法动态比较两组肝细胞的增殖状态,在相差显微镜下观察细胞的纯度和形态。结果 未经进一步纯化处理的猪肝细胞存活率为90％±5％,鼠肝细胞存活率为80％±5％,两者纯度均约90％;经Percoll梯度液离心纯化后,其高活力肝细胞比率均提高至98％±2％,纯度可达99％以上。从开始接种到大部分肝细胞贴壁生长,试验组比对照组肝细胞的时间有所缩短。结论 用Percoll梯度液纯化新分离肝细胞,可提高肝实质细胞的活力与纯度。     

急性白血病核仁形成区的银染色

应用银染色技术观察了77例急性白血病(AL)患儿骨髓细胞核仁形成区嗜银蛋白(AgNOR)的数目、形态、分布及大小,并选20例小儿正常骨髓为对照。结果:(1)AL各组的AgNOR计数、不规则率、靠近核膜分布的百分率均增加,颗粒最大直径减小,其中以化疗前变化最明显;(2)急淋L_2型的AgNOR计数、靠近核膜分布的百分率及最大直径均显著高于急淋L_1型;(3)急非淋的AgNOR计数高于急淋;(4)急     

AICD与病毒感染

因缺乏必要的存活信号而发生凋亡(apoptosis)几乎是所有体细胞的一个共同特征,但T细胞可以经受另种特殊的凋亡,即"激活诱导细胞死亡(activation-inducedcelldeath,AICD)"。本文在阐述AICD的发生机理及一般意义的基础上,重点讨论其与病毒感染的关系。     

143例晚期喉癌患者的临床特征及生存分析

目的 总结143例晚期喉癌患者的临床特征,分析预后的影响因素。方法 回顾性分析2010年1月-2016年12月经中国人民解放军总医院治疗的143例晚期喉癌患者的临床资料。其中,男135例(94.4%),女8例(5.6%);年龄35~79岁,中位年龄58岁。依据患者治疗方案不同分为2组:手术联合术后放化疗组106例和非手术综合治疗组37例。收集患者基本临床情况、治疗、随访及生存情况;生存率及单因素生存分析采用Kaplan-Meier法和log-rank检验,多因素生存分析采用Cox比例风险回归模型。结果 143例晚期喉癌患者的5年总体生存率为67.9%。单因素分析显示,影响晚期喉癌患者预后的临床因素有年龄、临床分期、T分期及肿瘤分化程度等(P值均<0.05);Cox模型多因素分析显示,患者年龄、临床分期、肿瘤分化程度及治疗方式是影响预后的独立危险因素(P值均<0.05)。T₄期、临床Ⅳ期患者采用手术联合术后放化疗5年生存率分别为62.2%和59.5%,明显好于非手术综合治疗的18.2%和41.4%,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 晚期喉癌患者预后相对较差,影响患者预后的因素包括患者年龄、临床分期、肿瘤分化程度及治疗方式等。对于临床Ⅳ期、尤其是T₄期患者,采取手术联合术后放化疗可以获得相对较好的预后。     

剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定

目的：探讨丁型肝炎病毒（Hepatitis D virus,HDV）核酶用于抗丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV）基因治疗的可能性。方法：以HDV基因组核酶的假结样结构为基础,优化其茎IV区,改建基底物结合区,获得3种针对HCV RNA的HDV核酶RzC1、RzC2和RzC3。体外转录获取含HCV RNA5‘－非编码区（5‘-noncoding region,5‘-NCR）及部分C区在内的底物RNA（HCV RNA 5‘－NCR－C）,并进行5‘端放射性标记。在pH7.5、37℃、Mg^2 20mmol/L和去离子甲酰胺2.5mol/L等条件下,将核酶和底物按摩尔比100：1混合,在不同的时间点观察剪切百分率。结论：RzC1、RzC2对底物的剪切百分率随时间延长而递增,90min分别达24.9％、20.3％;未观察到RzC3有剪切活性。结论：经过结构构优化的HDV基因组核酶在合适的位点能够剪切异源性RNA分子HCV RNA。     

增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中表？…

目的：研究增殖细胞核抗原在喉粘膜不典型增生及喉癌组织中的表达。方法：采用免疫组化ＬＳＡＢ法，用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的单克隆抗体对９例正常喉粘膜、２９例喉粘膜不典型增生及３６例喉鳞状细胞癌进行标记及分析。结果：随着喉粘膜病变的加重，ＰＣＮＡ的标记指数（ＬＩ）有逐渐增高的趋势。而ＬＩ与喉鳞状细胞癌的病理分级、Ｔ分期、淋巴结转移及肿瘤生长部位均无关。结论：ＰＣＮＡ对喉鳞状细胞癌的早期诊断有重要意     

瘤内血管密度与声门上型喉癌相关性研究

为探讨肿瘤血管生成与喉鳞状细胞癌转移及预后的关系,我们采用免疫组化 SP 法用抗 FⅧ因子多克隆抗体对36例声门上型喉癌(T_1～T_2)内的血管进行标记及分析,结果显示:淋巴结转移组血管密度(30.52±5.31)明显高于无淋巴结转移组(16.28±6.15)(P<0.01)。随访发现,血管密度高表达组和低表达组,颈淋巴结术后复发率分别为66.67%和9.52%,两者比较有显著的统计学意义(P<0.01)。研究结果表明,肿瘤内血管密度与喉鳞癌转移密切相关,它可作为判定喉癌转移的预后指标。     

基于MaxEnt模型的防风生境适宜区预测及生态特征研究北大核心

目的:通过对中药材防风进行生境适宜区分布的研究,为我国防风的野生资源有效保护与合理开发、产区布局以及规范化种植提供参考。方法:利用131个防风地理位置与35个环境因子数据,通过MaxEnt模型对我国三级重点保护野生药材防风的生境适宜区进行预测并分析影响其分布的主要环境因子。结果:模型预测结果的可信度高,可以用来预测防风生境适宜区的分布;生境适宜区总面积约144.51万km^(2),其中高度适宜区约为10.10万km^(2),涉及地貌类型为平原和丘陵;影响防风分布的主导环境因子依次为温度季节性变化标准差、降水量季变异系数、最暖季度降水量、海拔、最干季度降水量及上层土壤可交换钠盐。结论:黑龙江西部、内蒙古中西部为高度适生区集中分布区域,是防风野生资源保护和人工种植的首选之地。在栽培选址时,应考虑季节间温度的变化、土壤湿度和酸碱度及海拔因素。     

慢性乙型肝炎恩替卡韦治疗过程中病毒动力学特点分析

Objective To analyze the viral dynamics and clinical significance during the antiviral treatment by a mathematical model.Methods Six chronic hepatitis B patients were evaluated with a kinetic model(Neumann model)during dose of 0.5 mg/d oral entecavir.Blood samples were drawn for HBV DNA measurement at week 0,2,4,12,24.Non-linear modeling was used to fit individual patient data.Results The median effectiveness in blocking viral production was 99.970%(n=6).The median half-life of viral turn-over was 1.6 d(n=6).The median half-life of infected hepatocytes was 21.3 d(n=5).Compared with the other patients,the c(virions are cleared at a rate)、ε(effectiveness)、δ(infected cell are lost at a rate)value of one patient(eg.6)were all lower and the half-life of virus and infected cells were higher,and eg.6 developed viral break-through after 38 weeks of follow-up.Conclusions Viral load decay showed a biphasic pattern during entecavir therapy which can be described with a mathematical model.The model relates processes of viral infection and replication as well as drug efficacy to model parameters.It indicates the prediction of bio-mathematical model during antiviral treatment.