糖化终末产物对INS-1细胞基质金属蛋白酶2表达的影响

目的 探讨糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛细胞株INS-1基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达量的影响.方法 培养INS-1细胞,检测MMP-2表达;制备糖化胎牛血清,通过流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,通过逆转录PCR、实时定量PCR和Western印迹方法观察细胞中MMP-2表达量的变化.结果 INS-1细胞中存在MMP-2的表达;AGEs刺激后ROS明显升高(P<0.05),刺激组细胞内MMP-2mRNA表达量和蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05).结论 提示胰岛β细胞内存在MMP-2表达,AGEs可诱导β细胞MMP-2表达量增高,MMP-2在介导胰岛氧化应激损伤中可能起着重要作用.     

母鼠高脂饮食增加子代大鼠罹患代谢性疾病的危险性

目的观察母代高脂饮食和后天高脂饮食对子代大鼠代谢状态的不同影响,以探索母代高脂饮食与子代大鼠成年后代谢性疾病发生的关系。方法将成年SD大鼠分成对照组（C组）和高脂饮食组（H组）,至10周龄时交配怀孕生育子代大鼠,子代大鼠断乳后每组再分成高脂饮食组（HH组,CH组）和普通饮食组（HC组,CC组）,分别至子代大鼠3周龄和8周龄时观察其代谢相关性指标以及肝脏病理表现。结果H组母鼠孕前体质量、糖耐量曲线下面积、总胆固醇及三酰甘油均明显高于C组母鼠（P<0.05）;3周龄时H组母鼠所生育并喂养的子代大鼠其体质量明显高于C组母鼠生育的子代大鼠（P=0.002）,但两者的糖耐量曲线下面积差异无统计学意义（P＞0.05）;至8周龄时各组子代大鼠空腹血糖和胰岛素水平差异无统计学意义,而母鼠为H组的子代大鼠体质量和糖耐量曲线下面积大于母鼠为C组子代大鼠（母代饮食主效应P分别为0.024和0.013）,HH组和CH组子代大鼠糖耐量曲线下面积亦大于HC组和CC组的子代大鼠（子代饮食主效应P=0.041）;8周龄时HH组和CH组子代大鼠血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白水平均高于HC组和CC组（子代饮食主效应P分别为0.008,0.007和0.000）;8周龄时HH组、HC组和CH组子代大鼠表现出不同程度的脂肪肝;CC组子代大鼠肝脏镜下结构均显示正常。结论母代高脂饮食可以引起子代大鼠成年后体质量增加,糖耐量减退以及肝脏脂肪变,增加子代发生代谢性疾病的危险性。     

2型糖尿病大鼠胰岛组织中基质金属蛋白酶2的表达与活性研究

目的 观察2型糖尿病大鼠胰岛组织中基质金属蛋白酶2 (MMP2)的表达及活性变化.方法 SD大鼠随机分为对照组和糖尿病组.利用高热量饮食喂养结合小剂量链脲佐菌素( STZ,15 mg/kg)腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型.分别于造模后2周和6周时提取大鼠胰岛组织,采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测MMP2的mRNA和蛋白表达,以明胶酶谱分析MMP2活性.结果 两组大鼠胰岛组织中均存在MMP2的mRNA和蛋白表达,且糖尿病组显著高于对照组(P＜0.05);明胶酶谱分析结果显示:糖尿病组MMP2的酶活性显著高于对照组(P＜0.05).与造模后2周比较,糖尿病组造模后6周时MMP2的mRNA和蛋白表达及酶活性均较高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 糖尿病大鼠胰岛组织中MMP2基因表达上调且酶活性增强,可能与2型糖尿病大鼠胰岛B细胞功能受损有关.     

糖化终末产物对INS-1细胞基质金属蛋白酶2表达的影响

目的 探讨糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛细胞株INS-1基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达量的影响.方法 培养INS-1细胞,检测MMP-2表达;制备糖化胎牛血清,通过流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,通过逆转录PCR、实时定量PCR和Western印迹方法观察细胞中MMP-2表达量的变化.结果 INS-1细胞中存在MMP-2的表达;AGEs刺激后ROS明显升高(P<0.05),刺激组细胞内MMP-2mRNA表达量和蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05).结论 提示胰岛β细胞内存在MMP-2表达,AGEs可诱导β细胞MMP-2表达量增高,MMP-2在介导胰岛氧化应激损伤中可能起着重要作用.     

糖化终末产物对INS-1细胞基质金属蛋白酶2表达的影响

目的 探讨糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛细胞株INS-1基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达量的影响.方法 培养INS-1细胞,检测MMP-2表达;制备糖化胎牛血清,通过流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,通过逆转录PCR、实时定量PCR和Western印迹方法观察细胞中MMP-2表达量的变化.结果 INS-1细胞中存在MMP-2的表达;AGEs刺激后ROS明显升高(P<0.05),刺激组细胞内MMP-2mRNA表达量和蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05).结论 提示胰岛β细胞内存在MMP-2表达,AGEs可诱导β细胞MMP-2表达量增高,MMP-2在介导胰岛氧化应激损伤中可能起着重要作用.

Abstract：

Objective To explore the impact of advanced glycation end-products ( AGEs) on matrix metalloproteinase 2 ( MMP-2) expression in cultivated INS-1 cells. Method INS-1 cells were cultivated and MMP-2 expression was analyzed. Glycated serum was prepared for incubating with INS-1 cell. Reactive oxygen species (ROS) was detected by flow cytometry. The intracelluar MMP-2 expression was analyzed by RT-PCR, realtime PCR and Western blot. The MMP-2 cDNA was expressed in cultivated INS-1 cells. Result The level of ROS treated with AGEs was significantly higher than that in the control( P<0.05 ) , and the levels of MMP-2 and its protein expressions turned out as well( P<0. 05). Conclusion The results suggest that MMP-2 was expressed in INS-1 cells. Increased MMP-2 expression in ?cells may be induced by AGEs, suggesting that MMP-2 might play an important role in oxidative stress-mediated islet injury.