胰岛素中枢作用与老年性痴呆发病关系研究进展

胰岛素治疗老年性痴呆，能显著提高病人痴呆量表的评分；胰岛素抵抗(IR)则可加重老年性痴呆的病理改变及症状。因此，胰岛素在中枢神经系统的代谢、调节作用与老年性痴呆发病的关系正日益受到关注，并取得了许多重要进展，对揭示用胰岛素治疗老年性痴呆的机制发挥了重要作用。为此，作者就此进行综述，以引起人们对用胰岛素治疗老年性痴呆的重视和研究。     

自制生化凝胶电泳试验的做槽工具一成槽梳

血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳,是生化实验课的重要内容之一。该实验结果的成功与否,主要取决于3个因素：(1)血清是否新鲜;(2)样品槽制作是否规范;(3)电泳缓冲系统是否符合要求。血清保鲜和电泳缓冲液配置由实验技术人员操作质量可以保证。唯有样品槽制作须由学生自己动手,所以样品槽制做是否规范是实验成败的关键.     

小鼠肝细胞胰岛素与EGF信号转导磷蛋白质组的动力学行为对比分析

目的分析小鼠肝细胞内胰岛素与表皮生长因子（EGF）信号转导磷蛋白质组的动力学行为差别，以此找出两者关键性的信号蛋白。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术，进行分析比较EGF与胰岛素分别介导的磷酸化蛋白质组的动力学行为。结果参与两者信号转导的磷蛋白质种类没有多大差异，大多数信号磷蛋白磷酸化水平的动力学行为也表现为一致性，但有4个蛋白点其磷酸化水平随时间变化趋势明显不同。结论胰岛素与EGF虽然在多方面有许多相似之处，但在同一细胞内参与信号转导的个别信号蛋白其磷酸化水平的动力学行为差别较大，估计这些蛋白就是导致EGF与胰岛素最终生物学活性有所不同的关键蛋白。     

中北社区糖尿病及糖调节受损患者流行病学调查与研究

通过对中北大学社区人群2000人进行OGTT试验,确定糖尿病及糖调节受损人群,并与其年龄分布、体重指数、血压、及职业特点进行相关性分析.结果DM发病率为3.1%,IGR的发生率为5.03%,且随年龄增长而增加,BMI≥23者DM、IGR发病率较BMI＜23者高,DM和IGR人群中高血压的患病率明显高于正常人群,有显著统计学意义,而DM及IGR分布也有其职业特点.结论早期发现DM和IGR人群,进行积极的防治,可有效控制、延缓糖尿病及其并发症的发生.     

小鼠肝细胞胰岛素信号转导的动力学研究

目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素（100nmol／L）持续刺激不同时间得到的胰岛素信号蛋白磷酸化水平发生的动力学变化。结果小鼠肝细胞胰岛素信号转导相关磷蛋白有数十种,其中磷蛋白Shc、MKP3等的时间动力学曲线均呈峰型。结论在细胞整体水平,胰岛素多条信号转导途径之间存在相互交流,这种相互交流对信号转导的最终效应产生了复杂的整合和调控,使细胞对持续高浓度的胰岛素刺激产生了自适应控制。     

放射性32P掺入小鼠肝细胞内的动力学研究

目的:寻求放射性同位素32P掺入到小鼠肝细胞内达到磷平衡的时间点.方法:采用32P掺入标记小鼠肝细胞磷蛋白不同时间点,SDS-PAGE对不同掺入标记时间的全细胞蛋白进行分离,放射自显影后进行半定量分析,获得32P掺入标记的时间动力学曲线.结果:32P掺入标记培养小鼠肝细胞磷蛋白是一动态过程,直到8小时后达到平衡.结论:放射性32P掺入到小鼠肝细胞内的磷平衡时间至少需8h,本实验为小鼠肝细胞放射性32P掺入标记实验提供了准确的掺入平衡时间点.     

用DAPI和Hoechst33342染色法检测DNA的流式细胞方法探讨

目的：探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法：分别用DAPI、Hochest和PI 3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA 质量控制试剂盒做测试质控。结果：质控实验显示,紫外激光的变异系数（CV）为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4。DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核（calf thymocyte nuclei ,CTN）出现2个峰,G2/G1为1.97,且G0/G1峰的CV为2.4。DAPI、Hoechst33342和PI 3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值 3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致。 结论：本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料。     

体外存储过程中红细胞衰亡的研究

目的:研究体外存储对红细胞衰亡(eryptosis)的影响。方法:募集6名健康成年志愿献血者,分别采集400 mL抗凝全血,滤白后离心去除血浆,将红细胞(red blood cells, RBC)重悬于100 mL MAP红细胞保护液中,4℃保存。于储存期0、7、14、21、28和35 d分别抽取血样6 mL,利用流式细胞仪、全自动血细胞计数仪、血气分析仪等分别检测RBC膜磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)含量、红细胞平均体积(mean corpuscular volume, MCV)、细胞外离子浓度、细胞外葡萄糖(glucose, Glu)、乳酸(lactic acid, Lac)、总胆红素(total bilirubin, TBil)浓度及高铁血红蛋白分数(fraction of methemoglobin, FMetHb)。结果:随着存储时间延长,PS含量降低(r=-0.8356),MCV、细胞外Cl^-浓度没有变化,细胞外TBil浓度(r=0.8035)、Lac浓度(r=0.9377)及FMetHb(r=0.9706)随存储时间延长...     

索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及基因表达分析

目的 建立索拉菲尼诱导的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)耐药细胞株,筛选出耐药细胞株中的高表达基因,进一步探讨肝细胞癌中与索拉菲尼耐药的相关基因.方法: 选取人肝癌细胞株PLC及Huh7,采用药物间歇诱导法分别建立索拉菲尼诱导的耐药细胞株,运用高通量测序技术(RNA-Seq)测定两株耐药细胞株中高表达基因,运用生物信息学数据库分析高表达基因与肝癌临床生物学指标相关性,筛选出肝癌耐药机制中可能参与的基因.结果: 通过基因测序得到两株肝癌耐药细胞株中的高表达基因,在设定的限定条件下进行进一步筛选, 限定条件为两株耐药细胞中共同表达的基因且表达差异倍数大于4倍,差异具有统计学意义(P<0.05),发现两株耐药细胞共同表达前12位基因符合限定条件,进一步运用Ualcan数据库分析12个基因与肝癌组织表达水平,分期,分级及生存的关系,筛选出符合条件的基因CBX4.结论: 成功构建了索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株,并筛选出与索拉菲尼耐药相关基因CBX4,为进一步耐药机制探讨提供依据.     

中北社区糖尿病及糖调节受损患者流行病学调查与研究

通过对中北大学社区人群2000人进行OGTT试验,确定糖尿病及糖调节受损人群,并与其年龄分布、体重指数、血压、及职业特点进行相关性分析.结果：DM发病率为3.1%,IGR的发生率为5.03%,且随年龄增长而增加,BMI≥23者DM、IGR发病率较BMI＜23者高,DM和IGR人群中高血压的患病率明显高于正常人群,有显著统计学意义,而DM及IGR分布也有其职业特点.结论：早期发现DM和IGR人群,进行积极的防治,可有效控制、延缓糖尿病及其并发症的发生.