王宗仁教授中西医结合治疗冠心病的临床经验

王宗仁教授长期从事心血管疾病临床、科研、教学工作，积累了丰富的临床经验，尤其对冠心病的中西医结合治疗有着独到的见解。现对王宗仁教授中西医结合治疗冠心病的临床经验总结报道如下。     

活血通脉片对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的保护作用

目的：研究中药复方制剂活血通脉片（Huoxue TOngmai tablet,HXTMT)对异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO)心肌损伤大鼠的保护作用,方法：用HXTMT给SD大鼠连续灌胃14d,第12日起动物sc ISO(48umol.kg^-1.d^-1),每日一次,连续3d,复制异丙肾上腺素性心肌损伤大鼠模型。结果：中药复方制剂HXTMT能明显减轻心肌损伤程度,血清CK活性,心肌MDA含量,心肌含水量分别减少14％,25％,2％,与模型组比较有显性差异（P＜0．05）,结论：HXTMT能稳定细胞膜,减轻心肌水肿程度,阻止脂质过氧化物的形成,提示HXTMT对心肌缺血性损伤有细胞保护作用。     

活血通脉片对实验性SD大鼠急性血瘀证血液流变性的影响

目的　研究中药复方制剂活血通脉片 (HXTMT)对SD大鼠急性血瘀证的影响 .方法　用 HXTMT混悬液给予SD大鼠灌胃 1wk,第 7日同时对大鼠皮下注射 2次 1g·L- 1 肾上腺素 0 .2 m L ,其间进行 1次寒冷刺激 (冰水 ,0℃ ) 5min,于第 8日晨复制成血瘀实验模型 ,并采血测定血液流变学各指标 .结果　 HXTMT能明显降低全血粘度 (ηb)、血浆粘度 (ηp)、纤维蛋白原 (Fib) (P<0 .0 1)及红细胞比容 (HCT) (P<0 .0 5 ) ;缩短红细胞电泳时间 (EET) (P<0 .0 5 ) ,提高红细胞电泳率 (EEM) (P<0 .0 1) ;亦能明显增强红细胞变形性 (DI)(P<0 .0 5 ) ,降低红细胞聚集指数 (AI) (P<0 .0 1) .结论　HXTMT具有改善血液流变性作用 ,能防治高粘血症和缺血性心脏病     

水蛭素在毕赤酵母中的分泌表达

目的:构建水蛭素毕赤酵母表达载体,获得重组蛋白在毕赤酵母中的分泌型表达. 方法: 通过PCR扩增获得水蛭素HV2, HV2-N47K基因,将序列正确的基因序列插入酵母表达载体pPIC9α分泌信号下游,再亚克隆入高拷贝载体pPIC9K,构建表达质粒pPIC9K-HV2, pPIC9K-HV2-N47K. 重组质粒转化宿主菌GSM1168,G418抗性筛选高拷贝的稳定表达菌株,经甲醇诱导表达并对表达产物进行鉴定. 结果: 成功构建了水蛭素毕赤酵母表达载体,获得水蛭素在毕赤酵母中的分泌型表达,表达产物具有抗凝血酶活性. 结论: 水蛭素在毕赤酵母中获得分泌型表达,为研究新药奠定了基础.     

人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达

目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染CHO细胞并筛选阳性克隆,免疫荧光法鉴定重组BPI的表达和免疫学活性。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,与文献报道的序列相比,有6个核苷酸差异。转染筛选的阳性CHO细胞克隆表达产物能够被抗BPI的单克隆抗体所识别。结论BPI活性片段表达载体的构建及真核表达成功,为BPI功能的研究奠定了基础。     

耐药结核分枝杆菌基因突变分析

目的 探讨结核分枝杆菌耐药表型与基因突变位点之间的相互关系.方法 采用序列特异性引物分别扩增92株结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB,异烟肼耐药基因katG、inhA、ahpC,链霉素耐药基因rrs、rpsL,乙胺丁醇耐药基因embB及喹诺酮耐药基因gyrA,SSCP筛选出突变序列,DNA测序分析突变性质.结果 59株利福平耐药株rpoB基因突变检出率94.9%(56/59),以Ser450Trp突变最多;90株异烟肼耐药株中,katG基因突变检出率38.9%(35/90),以Ser315Thr最多,3株检出inhA基因突变,ahpC基因无突变检出;34株喹诺酮耐药株中gyrA基因突变检出率82.4%(28/34),主要为Asp94Gly,其次为Ala90Val;31株链霉素耐药株中,15株检出rrs突变,最常见为A514C和A1041G,10株发生rpsL Lys88Arg突变,总的链霉素基因突变检出率为77.4%(24/31);31株乙胺丁醇耐药株中embB 基因突变检出率19.4%(6/31),主要为Met306Val.结论 耐药结核分枝杆菌耐药情况较为严重,以DNA测序为基础的基因突变分析能快速有效地检测结核分枝杆菌的rpoB、katG、gyrA、rrs、rpsL、embB 等耐药分子标识,显示了西安地区耐药性结核分枝杆菌的突变特点,为结核病的临床诊断和合理用药提供了实验依据.     

水蛭素基因DNA家族改组方法的建立

目的:运用DNA家族改组技术,增加改组分子库的多样性.方法:取水蛭素HV1、HV2、HV3基因等量混合,用DNase Ⅰ消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子,将其与载体连接获得水蛭素改组文库,DNA测序观察改组效果.结果:随机挑取3个克隆均为3种模板基因片段的杂合体,表明改组分子库多样性较好,改组方法较为成功.结论:水蛭素基因DNA家族改组方法的成功建立为进一步筛选高活性的水蛭素奠定了基础.     

益气活血复方与复方丹参制剂治疗心绞痛疗效的系统评价

目的系统评价益气活血复方与复方丹参制剂治疗冠心病心绞痛的疗效和安全性。方法两名作者独立收集资料和评价纳入文献质量,采用RevMan4.2.2软件对资料进行Meta分析。结果①对20项研究的临床疗效有效率合并效应量的检验：OR合并=3.74,其95%CI为[2.58,5.43],P〈0.01;②对18项研究的心电图疗效有效率合并效应量的检验：OR合并=2.29,95%CI为[1.85,2.83],P〈0.01。结论益气活血复方治疗冠心病心绞痛的疗效优于复方丹参制剂,且不良反应少。     

中药芪丹通脉片对心肌损伤大鼠血小板功能的影响

目的：研究中药复方制剂芪丹通脉片（QDTMT）对心肌损伤大鼠血小板功能的影响。方法：用QDTMT给SD大鼠连续灌胃14d，第12日起动物皮下注射ISO（48μmol.kg^-1d^-1)，每日一次，连续3d，复制心肌损伤大鼠模型，结果：中药复方制剂QDTMT能明显减轻心肌损伤程度，抑制血小板聚集功能，降低血浆血栓素B2（TXB2）水平，提高6－酮－前列腺素（6-keto-PGF1α）水平和6－keto-PGF1α/TXB2比值，与模型组相比有显性差异（P＜0．05，P＜0．05，P＜0．05和P＜0．01）。结论：QDTMT可能通过抑制血小板活化，调节前列环素与的血栓素平衡来抗心肌损伤。