GIRK通道在匹罗卡品癫痫模型中的表达改变

目的：研究匹罗卡品诱导癫痫发作后不同时期G蛋白耦联内向整流钾通道（GIRK通道）在海马神经元细胞膜表面表达变化情况，并探索可能的调控机制。 方法：将成年雄性SD大鼠随机分为对照组和匹罗卡品造模组，利用致痫剂匹罗卡品诱导癫痫持续状态（Status epilepticus，SE）后，分别在急性期（24h）和慢性期（30d）取海马组织提取膜蛋白，利用Western Blot方法检测海马膜蛋白GIRK通道亚基蛋白GIRK1、GIRK2的表达改变，并同时检测海马组织PI3K/Akt通路激活情况。建立细胞癫痫模型，观察PI3K抑制剂渥曼青霉素和LY294002对海马神经元内向整流钾通道（Kir）电流的影响。 结果：匹罗卡品诱导大鼠SE发作后急性期细胞膜上GIRK1和GIRK2蛋白的表达较对照组相比显著下调（P<0.05）。海马膜蛋白中GIRK1的表达在大鼠SE发作后慢性期较对照组下降（P<0.05），而GIRK2蛋白表达量没有显著改变（P>0.05）。p-Akt（308）、Akt蛋白表达量的比值在匹罗卡品诱导大鼠SE发作后急性期与对照组相比显著上升（P<0.05），而在SE发作后慢性期无显著差异（P>0.05）。在细胞癫痫模型中，PI3K抑制剂渥曼青霉素和LY294002对痫样放电神经元的Kir电流未发现显著影响。 结论：在大鼠匹罗卡品诱导SE发作后急性期，海马中GIRK通道蛋白表达量下调， PI3K/Akt通路存在明显激活。癫痫急性期GIRK通道表达的调控机制尚需进一步研究。     

雌激素调控瞬时外向钾通道对大鼠慢性颞叶癫发作的影响

目的探讨雌激素对大鼠慢性颞叶癫发作的影响及其与瞬时外向钾通道(kv4.2)之间的关系。方法 SD雌性大鼠随机分为正常对照组、去势对照组、正常致组、去势致组。应用毛果芸香碱诱导大鼠癫持续状态(SE),观察大鼠行为学变化。经4周后成为慢性颞叶癫大鼠。Western bolt方法检测大鼠海马瞬时外向钾通道Kv4.2蛋白表达水平。结果与正常致组比较,去势致组达到SE的潜伏期延长、死亡率降低,但差异无统计学意义(P0.05);去势致组的癫发作强度较正常致组轻,差异有统计学意义(P0.05)。去势致组和正常致组在SE 4周后海马Kv4.2均较正常对照组显著升高,均差异有统计学意义(P0.05和P0.01)。去势对照组和去势致组比较,均未见对Kv4.2蛋白表达产生影响,说明Kv4.2蛋白表达升高为癫发作所致。结论大鼠癫发作后Kv4.2表达增加、瞬时外向钾电流增强、神经冲动的发放频率减慢,可能是产生代偿性自我保护反应的结果;虽然去势雌性大鼠未对Kv4.2表达产生影响,但出现潜伏期延长和死亡率降低、发作强度降低的行为学趋势,提示低剂量雌激素可能存在对癫发作的保护作用。