结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB突变特征初步分析

目的 阐明结核分枝杆菌利福平耐药株rpoB基因突变特点。方法 对110株结核分枝杆菌临床分离株包括rpoB基因利福平耐药决定区（RRDR）81个碱基在内的286bp片段进行聚合酶链反应．单链构象多态性（PCR．SSCP）分析，并对经检测显示有突变的结核分枝杆菌rpoB基因此扩增区域进行序列测定。其中利福平耐药株73株，非利福平耐药株11株，敏感株26株。结果 PCR—SSCP检测显示利福平耐药株中有47株有突变存在，经直接测序分析其中76．6％的菌株存在rpoB基因的单位点突变，主要集中在531位（61．1％）和526位（25．0％）；联合突变发生率为23．4％。此外，经PCR—SSCP检测，11株非利福平耐药株中2株有突变存在，26株敏感株中1株有突变存在。经直接测序分析突变涉及位点为511位、526位和535位。结论 rpoB基因耐药决定区发生突变是结核分枝杆菌利福平耐药的主要原因，其中531位丝氨酸和526位组氨酸是最常见的突变位点。     

Spoligotyping结合多位点PCR用于牛分枝杆菌卡介苗的快速鉴定

目的鉴别分枝杆菌临床分离菌株中的牛分枝杆菌卡介苗,为临床确诊提供依据。方法采用PNB／TCH鉴别培养基和分子生物学技术（间隔寡核苷酸分型Spoligotyping和多位点PCR）对从一例疑似牛分枝杆菌卡介苗感染的结核病患者分离的菌株（FJ07111）进行鉴定。结果临床分离分枝杆菌菌株FJ07111具有与牛分枝杆菌93006一致的生长特性,Spoli—gotyping和多位点PCR结果与注射用BCG完全一致。结论Spoligotyping和多位点PCR方法可简便、快速、准确鉴定牛分枝杆菌卡介苗。     

Sysmex XT-1800i血液分析仪对异常血细胞报警的评价

目的评估Sysmex XT1800i全自动血液分析仪对异常血细胞报警的可信度。方法选择Sysmex XT1800i异常血细胞报警的标本296例,无异常报警的标本180例,进行手工推片瑞氏染色镜检,观察血涂片红细胞、白细胞和血小板形态,与Sysmex XT1800i异常报警进行比较。结果 Sysmex XT1800i对异常血细胞报警灵敏度100.0%,特异性58.4%,阳性预测值56.7%,阴性预测值100.0%,对血小板的聚集和异型淋巴细胞警告功能较差。结论 Sysmex XT1800i全自动血液分析仪能够有效地筛选出真正异常的标本,同时应结合仪器性能制定复检规则,使工作人员更有效对真阳性标本进行复检。     

应用MPB64抗原检测快速鉴定结核分枝杆菌的研究

目的评价检测分枝杆菌MPB64抗原对快速鉴别分枝杆菌菌种的价值。方法采用结核分枝杆菌MPB64抗原胶体金法和传统对硝基苯酸(PNB)生长实验,对652株分枝杆菌临床分离株进行鉴别并比较分析。结果两种方法的检测结果相符647株,不符5株,符合率99.2%(647/652),两种方法对分枝杆菌复合群检出率差异无统计学意义(P>0.05),用胶体金法检测结核分枝杆菌复合群敏感性为99.1%,特异性为100.0%。结论与PNB方法相比,分枝杆菌MPB64抗原胶体金法有较高的特异性和灵敏性,方法简便、快速,是分枝杆菌菌种鉴别的有效方法。     

非结核分枝杆菌病的实验室诊断技术进展

目前,非结核分枝杆菌（NTM)病的发病率在全球逐年提高,NTM与结核分枝杆菌均可引起肺部以及其他部位病变,而且临床症状相似,鉴别诊断困难,所以分枝杆菌菌种鉴定对于疾病的诊断、治疗及预后意义重大。传统生化鉴定方法费力耗时,不能很好地满足临床需要。近年来,以免疫层析技术为基础的MPB64抗原胶体金法、以色谱技术为基础的气相及高效液相色谱法、以基因探针、限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）及PCR-基因测序方法为代表的分子生物学技术等各种新技术的引入,为NTM的菌种鉴定提供了更为科学的方法。作者就上述3种技术为基础开展的菌种鉴定方法,综合国内外近年来的文献,介绍了各种方法的原理、应用情况、性能指标等,同时对方法的优点及局限性进行初步评价。相信随着新技术不断完善,能够逐步形成快速可靠、成本低廉的标准化NTM菌种鉴定体系。     

福建省肺非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定

目的 对2005-2011年间,福建省福州市胸科医院分离获得的非结核分枝杆菌临床菌株进行菌种鉴定.方法 分别使用传统鉴别培养基法和多位点PCR、hsp65-PRA与rpoB-PRA,以及hsp65、rpoB、16s rRNA和ITS基因测序等分子生物学方法,对全部菌株进行菌种鉴定.结果 450株被初步鉴定为非结核分枝杆菌的临床分离菌株中,有45株被鉴定为结核分枝杆菌,其余405株被鉴定为23种不同的非结核分枝杆菌和1株支气管戈登菌.结论 在该地区有多种非结核分枝杆菌传播和流行,其中,6种非结核分枝杆菌和支气管戈登菌为在福建省内首次发现.     

医院获得性肺炎相关蛋白飞行质谱表达初步研究

目的 探索医院获得性肺炎(HAP)相关蛋白飞行质谱的表达特点.方法 方便选择2014年7月-2015年6月期间于福建省福州肺科医院接受血清蛋白质飞行图谱检测的HAP(细菌性)患者58例与健康者31名作为研究对象,进行血清蛋白飞行质谱检测,分析其相关蛋白峰值并进行统计学处理.结果 对58例HAP(细菌性)患者与31名健康者的血清蛋白飞行质谱数据进行比较,发现有4个蛋白峰(3336.53、3415.60、4651.22、6118.62 M/Z),比较差异有统计学意义(P<0.01).由此4个差异蛋白峰构成的诊断模型判别HAP的总有效率为98.88%(88/89),特异度为100.00%(31/31)、灵敏度为98.28%(57/58)、阳性预测值为100.00%(57/57)、阴性预测值为96.88%(31/32).结论 蛋白飞行质谱技术具有方法简便、检测快速,标本用量少等优点.该方法在HAP早期诊断方面具有一定价值,可能成为HAP早期诊断的辅助指标,值得进一步研究.     

荧光PCR熔解曲线法快速鉴定痰标本中分枝杆菌菌种的临床应用价值

目的：研究荧光聚合酶链式反应（PCR）熔解曲线法快速鉴定痰标本中分枝杆菌菌种的临床应用价值。方法：采集福州肺科医院2018年1月至2019年12月经BACTEC MGIT 960系统液体培养阳性的558株疑似非结核分枝杆菌（NTM）临床分离菌株。对所有菌株均开展荧光PCR熔解曲线及16S核糖体核糖核酸（rRNA）基因测序法鉴定。将16S rRNA基因测序结果作为标准,采用荧光PCR熔解曲线法鉴定NTM的效能,分析主要NTM的耐药性情况。结果：16S rRNA基因测序法鉴定结果显示,疑似NTM菌种以胞内分枝杆菌（M.胞内）、龟/脓肿分枝杆菌（M.龟/脓肿）、鸟分枝杆菌（M.鸟）、堪萨斯分枝杆菌（M.堪萨斯）及戈登分枝杆菌（M.戈登）为主;荧光PCR熔解曲线法鉴定结果显示,疑似NTM菌种亦以上述5种为主。荧光PCR熔解曲线法鉴定M.龟/脓肿的灵敏度、特异度及准确度为95.7%、100.0%、99.1%;M.胞内的灵敏度、特异度及准确度为100.0%、97.3%、98.7%;M.鸟灵敏度、特异度及准确度为88.7%、100.0%、98.6%;其他NTM菌种的灵敏度、特异度及准确度均为100....     

三维CT支气管血管重建技术在胸腔镜肺段切除术治疗早期肺癌中的应用

目的:观察三维CT支气管血管重建技术（3D-CTBA）在胸腔镜肺段切除术治疗早期肺癌中的应用价值。方法:回顾性分析60例早期非小细胞肺癌患者的临床资料,均行胸腔镜肺段切除术+淋巴结清扫（或采样）,其中30例采用3D-CTBA技术（三维重建组）,另外30例术前常规进行二维CT检查（CT组）,记录两组手术指标、住院总费用、术后恢复情况、并发症发生率及术后6个月复发情况。结果:三维重建组术中出血量显著少于CT组（P<0.05）,手术时间显著短于CT组（P<0.05）,切缘宽度显著大于CT组（P<0.05）;三维重建组术后胸管留置时间、住院时间显著短于CT组（P<0.05）,胸管引流量、住院总费用显著少于CT组（P<0.05）;三维重建组并发症总发生率显著低于CT组（P<0.05）;随访6个月,发现两组均无复发病例。结论:3D-CTBA技术应用于早期肺癌患者胸腔镜肺段切除术,可有效提高手术安全性,获得更好手术切除效果,同时减少术后并发症,更利于患者快速康复,降低住院费用。 【关键词】三维;支气管血管重建;肺癌;胸腔镜;肺段切除术