自体骨髓移植治疗系统性红斑狼疮及疗效观察

目的：用自体骨髓移植的方法治疗系统性红斑狼疮（SLE）并探讨影响疗效的因素。方法：对确诊SLE需长期服用肾上腺皮质激素治疗的患者,在硬膜外麻醉下采集骨髓,并予以4℃条件保存,以环磷酰胺／足叶乙甙／甲基强的松龙方案预处理,处理完成后24h回输骨髓。结果：2例患者在移植后＋47－＋60时复发。结论：在本治疗方法中,移植前后未能进行去除T细胞处理可能是导致早期复发的主要原因。     

高强度聚焦超声制备抗原致敏树突状细胞及其诱导细胞毒性T淋巴细胞杀伤效应的研究

目的 探讨高强度聚焦超声(HIFU)制备抗原致敏树突状细胞(DC)及其诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤效应.方法 应用小鼠重组GM-CSF和IL-4培养小鼠骨髓DC,用HIFU制备CT26肿瘤细胞抗原致敏DC疫苗,用3H-TdR法检测T细胞增殖反应的能力,标准的4 h 51Cr 释放测定法检测CTL杀伤活性.结果 HIFU组、肿瘤细胞冻融组、肿瘤上清组和PBS组的DC在体外均可以诱导CTL增殖,但HIFU组、肿瘤细胞冻融组的DC体外诱导CTL增殖能力明显高于肿瘤上清组和PBS组(P＜0.05).HIFU组和肿瘤细胞冻融组DC体外诱导的CTL对CT26结肠癌均有明显的细胞毒性作用,与肿瘤上清组DC和PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05),HIFU组体外诱导的CTL杀伤活性与肿瘤细胞冻融组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HIFU制备抗原致敏DC可以诱导CTL大量增殖,并能诱导出杀伤效应较强的CTL.     

高强度聚焦超声制备肿瘤抗原致敏树突状细胞及其体外诱导T细胞产生IFN-γ的研究

目的 探讨采用高强度聚焦超声（HIFU）辐照肿瘤细胞制备肿瘤抗原致敏树突状细胞（DD）和制备DD肿瘤疫苗的可行性。方法 （1）采用1ng／ml IL-4和10ng/ml GM-CSF联合诱导小鼠骨髓细胞产生DC，并用流式细胞仪检测DC的CD80、CD86、H-2K^d和I-A^d表达情况；（2）固定辐照时间或超声声强，应用不同声强或辐照时间的HIFU辐照CT26细胞株后，用台盼蓝染色、MTT法检测活肿瘤细胞数，同时用台盼蓝染色观察肿瘤细胞的形态学变化，分析HIFU剂量与肿瘤细胞存活率的关系，了解剂量-效应关系；（3）固定辐照时间和超声强度，HIFU辐照CT26细胞悬液，制备肿瘤细胞抗原并致敏DC，致敏DC与T细胞共孵育48h后提取上清液，通过ELISA法检测上清中IL-12、γ干扰素（IFN-γ）的含量，并与冻融组、单纯CT26、对照组进行比较。结果 （1）采用IL-4和GM-CSF联合诱导小鼠骨髓细胞可培养出典型的DC；（2）固定辐照时间，随着HIFU辐照剂量的增加肿瘤细胞的存活率迅速减少，肿瘤细胞的碎片逐渐增多，当声强为1000W／cm^2，辐照30s时，无细胞存活，肿瘤细胞失去正常形态，全部被撕裂成碎片；（3）通过ELISA法检测HIFU、冻融及单纯CT26组上清液中IL-12、IFN-γ的含量显著高于对照组（P均〈0．05），HIFU及冻融组上清液中IL-12、IFN-γ的含量高于单纯CT26组（P均〈0．05），但HIFU、冻融组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 HIFU能灭活肿瘤细胞并能使肿瘤细胞破碎，HIFU制备的肿瘤抗原可体外致敏DC，并可使DC成熟分泌大量IL-12，同时诱导T细胞分泌大量IFN-γ。     

高强度聚焦超声制备树突状细胞瘤苗对BALB/c小鼠肿瘤主动免疫的实验研究

目的探讨采用高强度聚焦超声(HIFU)制备肿瘤抗原致敏树突状细胞(DC)对正常BALB/c小鼠肿瘤的主动免疫作用。方法采用功率1000W/cm2的HIFU辐照CT-26结肠癌细胞30s,获取肿瘤抗原,与体外培养扩增第5天的DC共孵育,制备DC瘤苗。HIFU辐照法制备的DC瘤苗(HIFU组)一次性免疫正常BALB/c小鼠,7d后再皮下接种活的CT-26结肠癌细胞,然后观察肿瘤发生时间、20d时瘤体重量和体积、小鼠生存时间等。并设立反复冻融法致敏DC组(冻融组)和生理盐水对照组(对照组),比较各组瘤体重量和体积、小鼠生存时间是否有差异。结果HIFU组、冻融组与对照组比较肿瘤发生时间、20d瘤体重量和体积、小鼠中位生存时间等差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。HIFU组与冻融组比较瘤体重量、体积及小鼠中位生存时间差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论HIFU辐照法制备的DC瘤苗对小鼠肿瘤的发生有一定的主动免疫作用,并优于反复冻融法制备的DC瘤苗。