登革病毒非结构蛋白NS1群特异性单克隆抗体的制备及初步应用

目的制备登革病毒NS1群特异性单克隆抗体,建立可检测登革病毒1～4型NS1抗原的ELISA检测法,为登革热的早期快速诊断奠定基础。方法应用毕赤酵母表达系统分泌表达登革病毒2型重组非结构蛋白NS1,以此为抗原免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养、间接ELISA筛选和亚克隆,获得能稳定分泌登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用所获得的单克隆抗体建立可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法。结果从登革病毒2型NS1重组毕赤酵母（Pichia Pastoris-NS1）中获得了大量纯化的登革病毒重组NS1蛋白;经免疫小鼠、细胞融合、间接ELISA筛选及3次亚克隆后,最终获得2株能高效分泌抗登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D7B6B4和2D10E2F6,间接ELISA显示抗体效价高达1∶8000～1∶16000;ELISA及免疫荧光检测证实,其所分泌的抗体与1～4型登革病毒及其重组NS1蛋白均有特异性免疫反应,为登革病毒NS1群特异性单克隆抗体;两株单克隆抗体均为IgG2a亚类;初步建立了检测4个血清型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法。结论成功研制出两株能高效分泌抗登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。初步建立了可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA检测法。     

老年肺结核患者甲状腺激素水平的临床研究

本文采用放射免疫法对33例老年肺结核患者血清TT_3、TT_4、rT_3、T_3Ru和TSH水平进行检测,并计算FT_4I及T_3/rT_3比值。结果表明,老年肺结核患者血清TT_3、TT_4和T_3/rT_3比值均较健康老年人降低(P<0.01),而rT_3、T_3Ru和TSH则升高(前两者P<0.01,后者P<0.05),FT_4无显著性差异(P>0.05)。提示老年肺结核患者血清甲状腺激素水平与病程和合并症有关。     

免疫组织化学和聚合酶链反应检测乳腺癌易患基因研究

目的 研究免疫组织化学和聚合酶链反应检测乳腺癌易患基因.方法 方便选取该院2015年4月—2017年4月收治的40例乳腺癌患者的临床资料进行统计分析.结果 乳腺癌组患者的乳腺癌易患基因1表达显著低于良性乳腺疾病组、健康对照组(F=31.027,P<0.05),Her2(F=27.012)、CK5/6(F=150.452)、EGFR(F=188.347)表达均显著高于良性乳腺疾病组、健康对照组(P<0.05);聚合酶链反应检测乳腺癌组患者乳腺癌易患基因1、CK5/6、EGFR阳性表达率87.5％(35/40)、42.5％(17/40)、45.0％(18/40)均显著高于免疫组织化学检测57.5％(23/40)、17.5％(7/40)、22.5％(9/40)(x2=5.02,7.38,9.35,P<0.05),灵敏度、特异度、准确度均显著高于免疫组织化学检测(P<0.05).结论 聚合酶链反应检测乳腺癌易患基因的效果较免疫组织化学好.     

绝经后阴道出血临床分析

绝经后阴道出血是老年妇女常见的症状之一,绝经一年后又有阴道出血称绝经后阴道出血.卵巢功能衰退后,肾上腺分泌少量雌激素,促使子宫内膜增生,经过一段时间引起子宫出血.     

抑郁症药物治疗的研究进展

抑郁症属于情感性精神障碍，是一种以心境低落为主要特征的精神疾病综合征。其临床表现为情绪低落、思维迟钝、言语动作减少，对工作失去兴趣等，是目前世界上最易致残的疾病之一。据不完全统计，目前全世界抑郁症患者已占世界人口的3％～5％。通过药物治疗，其中约2／3的患者可取得不同疗效。近年来许多学者对抑郁症的发病机制及临床药物治疗进行了深入研究，     

口服舒络宁致低血糖昏迷4例报告

1 临床资料 [病例1]患者,女,84岁,因神志不清4 h入院.1月前因进食少致低血糖昏迷,在本院治愈出院.既往无糖尿病病史,未服用降糖药,胰腺CT及胰岛素释放检查均未见异常.入院时查体:血压140/80 mmHg,深昏迷状态,压眶反射消失,呼吸表浅,有间歇,双侧瞳孔等大、同圆,直径2 mm,对光反射迟钝,口唇发绀,双肺呼吸音粗,四肢肌张力减弱,余未见异常.急检血糖1.0 mmol·L-1,经补糖、对症治疗,治愈出院.[病例2]患者,女,57岁,因反复神志不清、失语1月余,加重3 h入院.急检血糖1.8 mmol·L-1.查体:浅昏迷,余未见异常.推注葡萄糖后清醒.[病例3]患者,女,54岁,因阵发性意识障碍伴抽搐2 d入院.急检血糖1.1 mmol·L-1.查体:浅昏迷,余未见异常.推注葡萄糖后清醒.[病例4]患者,女,53岁,因阵发性意识障碍伴抽搐1 d入院.急检血糖1.8 mmol·L-1.查体:浅昏迷,余未见异常.推注葡萄糖后清醒.     

登革病毒非结构蛋白NS1群特异性单克隆抗体的制备及初步应用

目的 制备登革病毒NS1群特异性单克隆抗体,建立可检测登革病毒1～4型NS1抗原的ELISA检测法,为登革热的早期快速诊断奠定基础.方法 应用毕赤酵母表达系统分泌表达登革病毒2型重组非结构蛋白NS1,以此为抗原免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养、间接ELISA筛选和亚克隆,获得能稳定分泌登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用所获得的单克隆抗体建立可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结果 从登革病毒2型NS1重组毕赤酵母(Pichia Pastoris-NS1)中获得了大量纯化的登革病毒重组NS1蛋白;经免疫小鼠、细胞融合、间接ELISA筛选及3次亚克隆后,最终获得2株能高效分泌抗登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D7B6B4和2D10E2F6,间接ELISA显示抗体效价高达1∶8 000～1∶16 000;ELISA及免疫荧光检测证实,其所分泌的抗体与1～4型登革病毒及其重组NS1蛋白均有特异性免疫反应,为登革病毒NS1群特异性单克隆抗体;两株单克隆抗体均为IgG2a亚类;初步建立了检测4个血清型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结论 成功研制出两株能高效分泌抗登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株.初步建立了可检测1～4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA检测法.     

甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶基因遗传进化分析

【目的】 了解季节性H1N1流感病毒与2009年新型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因的遗传进化关系,探讨甲型H1N1流感病毒的遗传变异规律&#65377;【方法】 分别从2006年和2009年流感病人标本中分离并鉴定出季节性HIN1流感病毒和新型H1N1流感病毒,用RT-PCR技术扩增了病毒NA基因全序列,并对其分子进化和重要功能位点的遗传变异进行了分析&#65377; 【结果】 2009年新型H1N1流感病毒与2006年季节性HIN1流感病毒比较,NA基因的同源性较低(77.9% ~ 78.8 %),与世界各地不同年代代表株及WHO推荐的1979 ~ 2010年季节性流感疫苗株比较,NA基因的同源性也较低(78.1% ~ 79.3%),但与WHO推荐的2009年新型H1N1流感疫苗株比较同源性则高达99%以上;系统进化分析结果表明,2009年新型H1N1流感病毒NA基因与欧亚猪流感病毒株A/swine/Belgium/1/1983的亲缘关系最近;并发现自2005年以来季节性H1N1流感病毒NA基因的某些抗原位点和神经氨酸酶活性位点已发生了变异&#65377;【结论】 2009年新型H1N1流感病毒NA基因可能来源于欧亚猪流感病毒;接种季节性流感疫苗不能对本次流行的新型流感产生有效的免疫保护作用;季节性H1N1流感病毒在流行过程中NA基因已发生了一定的变异,有必要持续跟踪和监测病毒的变异情况&#65377;     

血细胞分析仪计数血小板假性减少原因分析及对策探讨

目的探讨血细胞分析仪计数血小板(PLT)假性减少的原因及处理对策。方法对Beckman LH780自动血细胞分析仪计数PLT100×109/L的351例样本进行手工稀释计数及涂片染色镜检,按血小板直方图类型分组,A组(正常血小板直方图):297例;B组(小血小板直方图):13例;C组(大血小板直方图):11例;D组(血小板聚积直方图):19例;E组(红细胞碎片直方图):11例,对血细胞分析仪计数与手工稀释计数进行比较,并与涂片染色镜检进行相符程度比较。结果①与手工稀释计数比较,A、B组血细胞分析仪PLT计数无显著差异(P0.05);C、D组血细胞分析仪PLT计数减少,有显著性差异(P0.01);E组血细胞分析仪PLT计数增高,有显著性差异(P0.01)。②手工稀释计数比血细胞分析仪计数与涂片染色镜检结果相符程度高。③30例血小板假性减少的样本中,7例EDTA依赖性假性PLT减少(EDTA-PTCP);8例采血不顺造成;4例冷凝集;大血小板及红细胞碎片11例。结论血细胞分析仪计数血小板有可能出现血小板计数假性减少,对血小板直方图异常的样本必须进行手工稀释计数和涂片染色镜检来提高血小板报告的准确性。     

新生儿窒息的抢救及后遗症

新生儿窒息是指胎儿娩出后 1ｍｉｎ ,仅有心跳而无呼吸或未建立规律自主呼吸的缺氧状态 ,为新生儿死亡及伤残的主要原因之一。必须积极抢救和正确处理 ,以降低新生儿死亡率及预防远期后遗症。1　资料与方法1 1　研究对象我院从 1998- 0 1～ 2 0 0 1- 0 1间出生的新生儿 (妊娠周数37～ 42周 )发生窒息的 12 4例 ,新生儿男 78例 ,女 46例。根Ａｐｇａｒ评分轻度窒息 (4～ 7分 ) 10 2例 ,占 82 2 6 %;重度窒息 (0～ 3分 ) 2 2例 ,占 17 74%。随机分成第 1组和第 2组。1 2　抢救方法第 1组采取即在充分清理呼吸道的基础上 ,给予吸氧与人工呼吸 …