调肝中药对精索静脉曲张大鼠睾丸形态结构及附睾精子密度和活率的影响

目的观察调肝中药对精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸组织形态结构及附睾精子密度和活率的影响。方法随机选取清洁级雄性SD大鼠50只,造模后分为模型组、调肝中药组、活血化瘀组、滋补肝肾组、补肾活血组,另取10只为假手术组,共6组,每组10只。各治疗组均于造模后48 d开始。连续用药60 d。处死大鼠,剪取睾丸、附睾,睾丸组织用HE染色,光镜下观察其病理改变,检测附睾精子的密度和活率。结果假手术组睾丸生精小管内各级生精细胞排列整齐、致密,层次清楚,结构正常,生精小管管腔内可见大量精子;模型组生精小管的各级生精细胞损伤最重,精子极其少见;治疗组各级生精细胞排列介于假手术组和模型组之间,其中调肝中药组生精细胞排列最致密,管腔内可见精子。与模型组比较,假手术组、调肝中药组VC大鼠附睾精子密度明显升高(P0.05),附睾精子活率各组差异无统计学意义(P0.05)。结论 VC导致睾丸生精细胞损伤,中药治疗后睾丸组织各级生精细胞都有不同程度的恢复,附睾液精子数量明显增加,调肝中药疗效最好。     

内源性缓激肽对血管紧张素Ⅰ诱导乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的探讨内源性缓激肽对血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)诱导乳鼠心肌细胞肥大的作用。方法体外原代培养新生Wistar大鼠的心肌细胞,随机分为对照组、AngⅠ组(10-9～10-5mol/L)、AngⅠ(10-6mol/L)+氯沙坦(losartan,Los)组、AngⅠ+卡托普利(captopril,Capt)组、AngⅠ+Capt+缓激肽B2受体拮抗剂(Hoe-140)组和AngⅠ+Capt+左旋硝基精氨酸(L-NNA)组,测量心肌细胞3H-亮氨酸掺入量、蛋白含量、细胞体积和搏动频率。结果 (1)AngⅠ可使培养的心肌细胞肥大,其作用有剂量依赖性。AngⅠ(10-6mol/L)引起心肌细胞肥大的作用与AngⅡ(10-7mol/L)相似;(2)Los可抑制AngⅠ的促肥大作用,与AngⅠ组相比,Los能使诱导3H-亮氨酸掺入量、总蛋白、细胞体积和搏动频率分别减少18.83%、18.66%、27.18%和26.37%(P<0.05);(3)Capt可抑制AngⅠ引起的心肌细胞肥大,其作用可被Hoe-140和L-NNA完全抑制。结论培养的心肌细胞可以将AngⅠ转化成AngⅡ,后者可使心肌细胞蛋白质合成增加、细胞体积增大,Capt通过减少AngⅡ生成和减少缓激肽降解抑制心肌细胞肥大。     

抗精子抗体在实验性精索静脉曲张大鼠血清和附睾腔液中的表达及其与精子质量关系的研究

目的 探讨抗精子抗体在实验性精索静脉曲张大鼠中的表达及其对精子质量的影响.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为三组:对照组(n=10)、模型组(n=10)和治疗组(n=10).模型组和治疗组均进行左肾静脉缩窄建立左侧精索静脉曲张模型;对照组只进行左肾静脉分离,不缩窄左肾静脉.利用全自动精液分析系统分析大鼠附睾尾部精子质量;利用酶联免疫法(ELISA)检测各组血清及附睾腔液中抗精子抗体的吸光度值.结果 正常组和治疗组精子密度显著高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);三组间精子活动率、血清和附睾腔液抗精子抗体的吸光度值差异无统计学意义(P>0.05).精子密度、活动率与血清和附睾腔液抗精子抗体OD值之间未见线性相关(P>0.05).结论 抗精子抗体在VC大鼠血清和附睾腔液中表达量低,且对精子质量无影响,提示抗精子抗体与精索静脉曲张关系不大.     

触减PCR在扩增抗体重链和轻链可变区中的应用

目的探讨扩增人免疫球蛋白重链和轻链可变区基因的方法。方法提取经免疫的具有乙肝表面抗体的人外周血淋巴细胞总RNA,反转录合成cDNA,采用普通PCR和触减PCR两种方法扩增抗体重链和轻链可变区基因。结果利用触减PCR方法,扩增出抗体重链和轻链的可变区基因,基因片段分别约为340bp和325bp,而普通PCR没有得到预期的结果。结论触减PCR比普通PCR更容易扩增出抗体可变区基因片段。     

精液中SCF/c-kit值在肾虚男性不育辨证中的价值

目的：评价精液中干细胞因子（stem cell factor, SCF）及其受体（c-kit）在男性不育肾虚证中的临床诊断价值,为肾藏精主生殖的基本理论提供实验依据。方法选取45例肾虚不育型患者与30例正常生育者进行对照研究,用酶联免疫吸附试验（ELISA法）测定两组精浆中SCF含量,用实时荧光定量 PCR方法对精液离心沉淀物检测c-kit的ct值,并计算其相对表达量。结果两组患者SCF浓度比较无差异（P>0.05）,与正常生育组比较,肾虚不育患者前向运动精子数明显降低（P<0.01）、精液离心沉淀物c-kit相对表达量升高（P<0.05）。结论男性不育肾虚证与精子活动和精液中c-kit表达量密切相关,两者可以作为男性不育肾虚证辨证时重要的客观指标,同时为中医肾藏精主生殖理论提供科学依据。     

调肝中药对精索静脉曲张大鼠SCF的影响和对生殖功能的作用

目的 探讨调肝中药对精索静脉曲张大鼠干细胞因子(stem cell factor,SCF)的影响和对生殖功能的作用.方法将清洁级雄性SD大鼠60只随机选取50只造模后分为模型组、调肝中药组、活血化瘀组、滋补肝肾组、补肾活血组,另外10只为假手术组,共6组,每组10只.各组均于造模后48天开始治疗.连续用药60天.实验结...     

Akt介导过氧化氢促新生大鼠心肌细胞肥大

目的探讨Akt在过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞肥大中的作用。方法用10μmol/L或50μmol/L浓度H2O2处理原代培养的新生大鼠心肌细胞,以细胞体积和蛋白含量反映心肌细胞肥大程度,观察Akt抑制剂对H2O2致心肌细胞肥大的作用;Western blot检测H2O2对Akt的激活效应。结果10μmol/L或50μmol/L的H2O2培养心肌细胞48 h后,细胞体积增大和蛋白含量增高;应用Akt抑制剂后减弱了H2O2刺激心肌细胞肥大的效应;H2O2使心肌细胞Akt磷酸化水平增高,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂Wortmannin和LY294002抑制了H2O2引起的Akt的活化。结论Akt信号通路可能介导了低浓度H2O2所致的心肌细胞肥大。     

大鼠心脏多巴胺1受体与心肌肥厚的关系

目的采用腹主动脉狭窄建立大鼠心肌肥厚模型，观察大鼠心肌肥厚时心肌组织多巴胺1受体（DA1-R）反应性的变化，借以阐明心脏DA1-R与心肌肥厚的关系。方法实验分5组：假手术对照组（C组）、腹主动脉狭窄组（A组）、腹主动脉狭窄十倍他乐克组（A＋B组）；腹主动脉狭窄十倍他乐克＋SCH23390组（A＋B＋S组）；假手术十倍他乐克＋FODA组（B＋F组）。各组均于4周后测定大鼠心功能和左心室／体重比值（LVW／BW）；另外还测定了A组心肌肥厚大鼠的心肌组织在FODA作用后cAMP生成量的变化。结果（1）A＋B组各指标变化与A组无明显差异；（2）A＋B＋S组的LVW／BW与心肌细胞横截面积的明显减小，与A组或A＋B组相比差异均有显著性（P〈0．05）；（3）B＋F组LVW／BW明显加大，形成了一定程度的心肌肥厚，与对照组相比P〈0．05。（4）A组大鼠心肌组织在FODA作用后，其CAMP的生成量明显高于对照组（P〈0．05）。结论心脏DA1-R参与了病理情况下心肌肥厚的形成，由压力超负荷引起心肌肥厚时，心脏DA1-R的反应性增高。