DNA修复酶HOGG1在食管鳞癌的表达和临床意义

目的探讨食管鳞状上皮癌组织中DNA损伤修复酶HOGG1表达与8-oxoG氧化损伤的关系及其表达改变的临床意义。方法免疫组化和Western blot检测鳞癌和癌旁组织中HOGG1的表达和8-oxoG氧化损伤,TUNEL试剂盒检测组织的凋亡指数。相关性统计分析鳞癌组织HOGG1低表达与上述两项指标之间的相关性;χ2检验与秩和检验统计鳞癌组织中HOGG1低表达与临床病理特征之间的关系。结果 HOGG1在食管鳞癌患者的组织中均有不同程度的表达,并且存在个体差异,鳞癌组织中HOGG1表达明显低于其癌旁组织(P<0.05),8-oxoG的氧化损伤程度明显高于癌旁组织(P<0.05),鳞癌组织中HOGG1的低表达与该组织8-oxoG氧化损伤程度、细胞凋亡指数呈负相关,与鳞癌的静脉侵犯、淋巴结转移有关,与患者的年龄、性别、鳞癌组织的病理分化程度无关。结论 HOGG1可作为食管鳞癌术后的检测指标,指导患者术后个体化治疗方案的制定。     

基于RNA-seq分析Eha调控迟缓爱德华菌抵抗酸化的作用

目的 Eha是一个影响迟缓爱德华菌(Et)胞内生存的转录调控因子,本研究有助于揭示其调控Et抵御酸的分子机制。方法用ATPase抑制剂洛霉素A1抑制巨噬细胞的酸化,菌落计数法比较酸化对野生株和eha基因缺失株胞内存活数目的影响;比较两种细菌在酸性应激实验中存活率的差异;构建pMP220-P_(eha)LacZ质粒,采用β-半乳糖苷酶实验检测eha基因的启动子在不同酸性pH值下和不同培养时间的转录活性;选择Eha转录水平最高的一个酸性pH值和培养时间,分别提取两种细菌RNA,进行RNA-Sequencing;并用qRT-PCR验证其结果。结果野生株ET13在巨噬细胞内和不同pH酸环境中的存活率明显高于缺失株,阻止酸化胞内菌数明显高于未阻止酸化的胞内菌数(P0.05)。对数期细菌pH6.3培养基生长2h,RNA-Sequencing结果表明:eha基因缺失株转录水平和野生株相比,147个差异显著表达的基因(DEGs)(|log2Ratio|≥1),其中113个上调,34个基因下调,qRT-PCR随机抽样,和RNA-Sequencing表达趋势呈强相关。147个基因采用GO数据库进行功能聚类,分成25类,主要涉及细菌加工、定位、代谢、结合、催化、运输、细胞成份;基于KEGG通路的富集分析,有130个可以富集到55条通路中,包括与氨基酸、核苷酸、脂质代谢及铁的转运等路径,涉及基因较多的有双组分系统、ABC转运系统、不同环境中的微生物代谢和次级代谢产物等路径。结论在酸性生存环境,Eha对Et的转录组呈多途径、多基因的适应性的全局性调控。     

聚合酶链反应检测胃粘膜内幽门螺杆菌

聚合酶链反应检测胃粘膜内幽门螺杆菌微生物学与免疫学教研室高大庆，傅翠梅，黄锡全，刘恭植胃炎、消化性溃疡、胃癌、食管癌是我国的多发病，常见病。其发生机理与幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，简称Ｈｐ）的感染有关。但目前的常规方法，还不能将...     

从实验感染动物分离感染伯氏疟原虫的红细胞的一种简单方法

本研究用Lymphoprep(含5%Ficoll和9.6% Metriz的混合液)作为密度梯度剂,分离鼠血中不同阶段的纯净的伯氏疟原虫。25%疟原虫血症的血液加肝素后,在室温下放置45分钟,然后将血浆上清液小心移去。其沉淀用0.85%氯化钠稀释4倍。再通过纤     

eha,迟缓爱德华菌一个毒力调控基因

目的探讨迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,E.tarda)溶血相关基因(E.tardahaemolysin activator gene,eha)基因调控该菌毒力基因的作用。方法利用自杀质粒pHM5,缺失E.tarda的eha基因,得到△eha缺失菌株,再构建△eha株的互补菌株。通过平板溶血性法、接触溶血法、上清溶血法,观察野生株、△eha缺失株与及互补株溶血性的差异。利用MTT法比较三种细菌培养物的过滤液对Vero细胞的毒性的差别。利用H2O2抗性纸片扩散法,比较三种菌对过氧化氢抵抗力的差异。利用RT-PCR和SDD-PAGE电泳超速酸化离心法提取的鞭毛蛋白,比较三种细菌鞭毛基因的转录和表达的差异。结果△eha缺失株和互补株不溶血,而野生株溶血。eha基因的缺失降低E.tarda菌对过氧化氢的抵抗力,△eha缺失株较野生株的细胞毒性明显减弱,eha基因可以调控迟缓爱德菌鞭毛基因的转录和表达。结论 eha基因可以调控迟缓爱德华菌毒力基因的表达,是一个毒力调控基因。     

大学新生HBV感染和HB疫苗接种的研究

大学新生入学进行健康复查时,常规地要做肝功能和ＨＢＶ标志物的检测。许多大专院校的报告证明大学生中ＨＢＶ感染是学校卫生工作中的一个严重问题。我们在以前工作的基础上着重探讨大学新生中ＨＢ疫苗接种情况与ＨＢＶ感染规律,以便为控制ＨＢＶ感染采取有效措施。对象和方法1对象:1998级本科和专科学生共10个班527人,年龄为18～22岁,其中城市学生214人,农村313人。2方法:ＨＢＶ标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ等五项指标)应用ＥＬＩＳＡ法检测。用北京邦定生物试剂公司的试剂盒。肝功能检测取ＡＬＴ和…     

迟缓爱德华菌溶血特性

目的　研究迟缓爱德华菌溶血素的特征。方法　平板检测法 ,接触溶血法 ,上清检测法。结果　讨论了迟缓爱德华菌溶血特性及检测的影响因素。结论　迟缓爱德华菌至少存在两种溶血素 ,其溶血活性受环境影响表现不同     

用重复DNA克隆作为种特异性探针检测恶性疟原虫DNA

用恶性疟原虫重复顺序克隆进行杂交的方法可提高检测系统的重现性和敏感性。分离疟原虫DNA并用CsCl放线菌素D离心去除人DNA杂质。Tanzania株Ⅰ用Sau 3AI部分酶切并克隆到有Bam HI切点的噬菌体M13mp 18中,用标记的全部恶性疟原虫基因组DNA探针进行噬菌斑杂交选出带有重复顺序的克隆株。用标记的恶性疟基因组DNA探针与人     

抗疟疫苗研究进展和存在的问题

在第六届国际寄生虫学会议上,Howard就疟疾疫苗研究的现状、抗原差异和原虫侵入机理等问题进行了综合分析。五年前尚没有关于疟原虫抗原结构的详细资料,而现已了解了几种疟原虫基因的氨基酸顺序,因此,获得针对疟原虫不同阶段的疫苗是可能的。由于疟原虫抗原有阶段特异性,且疟原