PFXYD序列参与phospholemman对L型钙通道的调节作用

目的探讨PFXYD序列在phospholemman（PLM）调节L型钙通道中的作用。方法用丙氨酸（Ala／,A）替换组成PFXYD序列的5个氨基酸,得到突变型PLM—ALL5。用磷酸钙沉淀法将编码L型钙通道的cDNA分别与编码载体质粒（empUvector,EV）、野生型PLM（wildtype,wT）、突变型PLM（ALL5）的cDNA转染到HEK293细胞中,待其表达相应蛋白后,用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流（ICa（L））并分析其动力学特性。结果在除极化电位为一20mV和一10mV时,ALL5较wT更加明显地减慢了ICa（L）激活速度,而在相同电位下ALLJ5使ICa（L）失活速度也明显减慢;与WT相反,ALL5没有减慢ICa（L）灭活速度,反使其加快了;以上ALL5所致的ICa（L）改变与电流大小无关。结论PFXYD序列理化性质的改变可以引起PLM对L型钙通道调节作用的改变,提示PFXYD序列在PLM调节L型钙通道的过程中发挥重要作用。     

小儿改良肌间沟法臂丛阻滞神经198例分析

为保证小儿臂丛神经阻滞的效果,避免臂丛神经阻滞时的神经损伤,我院2008-05-2010-05对198例小儿上肢手术实施改良肌间沟法臂丛麻醉,效果好,现报告如下. 1临床资料 1.1一般资料 本组198例,男120例,女78例,年龄1～7岁,体重8～25 kg.     

二仙汤及其药物血清对GT1-7细胞增殖及胰岛素样生长因子-1 mRNA的影响

目的 GT1-7细胞株是促性腺激素释放激素(GnRH)神经内分泌细胞株,本实验观察补肾方二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方药物血清对 GT1-7细胞株增殖及胰岛素样生长因子-1(IGF-I)mRNA 的影响。方法运用 Northern blot 方法观察 IGF-I mRNA 水平的变化;用 MTT 法观察 GT1-7细胞增殖情况。结果 (1)二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方药物血清都能增加 IGF-I mRNA 的表达,其中以滋阴组作用最显著;(2)全方组和滋阴组药物血清能促进 GT1-7细胞增殖,而温肾组无明显变化。结论补肾方二仙汤可能通过作用于 IGF-I 的mRNA 水平而影响 GT1-7细胞的增殖和 GnRH 释放,温肾组和滋阴组作用于该细胞的机制可能有所不同。     

二仙汤及其拆方对GT_(1-7)细胞株GnRH基因转录和表达的影响

目的:运用血清药理学方法,观察补肾方二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH基因转录和表达的影响。方法:SD 大鼠连续4天灌服中药二仙汤及两个拆方,末次给药1 h 后取其血清作体外细胞培养实验;用放免法测定 GT_(1-7)细胞 GnRH 的分泌;用 Northern bolt 方法观察二仙汤及其拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH mRNA 的影响。结果:(1)二仙汤全方及其两个拆方均能促进 GnRH 释放,以全方效果最好。(2)孵育24 h 后全方组和温肾组 GnRH mRNA 水平有下降趋势。(3)孵育48 h 后滋阴组 GnRH mRNA 的表达明显增加。结论:中医“肾主生殖”的功能似涉及下丘脑 GnRH 神经元及其调控性腺轴的机能,二仙汤及其拆方能够直接调节 GT_(1-7)细胞 GnRH 的释放及基因表达。     

二仙汤及其拆方对GT1-7细胞株GnRH分泌的影响

目的：GT1－7细胞是转入了猴病毒－40的T抗原（SV40T）癌基因的促性腺激素释放激素（GnRH)神经内分泌细胞株。本实验观察补肾方二仙汤及其“温肾”、“滋阴”两个拆方对GT1－7细胞株释放GnRH的影响。方法：（1）3个月龄的SD雄性大鼠予成人每公斤体重的10倍剂量灌服中药4日,于末次给药后1或2小时腹主动脉取血,制备成药物血清。（2）氯胺T法标记GnRH,建立稳定可靠的放免标准曲线。（3）TG1－7细胞用含10％、30％和50％药物血清的培养液孵育24或48小时,收集上清液做放射免疫测定。结果：（1）末次给药后1、2小时取血的二仙汤药物血清均能刺激GnRH释放,以1小时给药血清效果最好。（2）10％浓度的药物血清为最有效剂量。（3）二仙汤全方及两个拆方均能促进GnRH释放,以全方效果最显著。结论：中医“肾主生殖”的功能似涉及下丘脑GnRH神经元及其调控性腺轴的功能,二仙汤及其全方能够直接调节GnRH的分泌。     

探讨Peroxiredoxin1在胃癌腹膜转移中的作用机制

目的探讨胃癌组织中Peroxiredoxin1(Prx1)的表达与胃癌腹膜转移的关系。方法采用免疫组织化学SP染色法检测上海交通大学附属新华医院收治的65例同期伴腹膜转移胃癌患者的胃癌原发灶、腹膜转移灶、淋巴结转移灶及癌旁正常胃黏膜组织中prx1蛋白的表达。结果免疫组化显示胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶中prx1蛋白强表达,阳性表达率分别为胃癌原发灶60%(39/65)、腹膜转移灶68%(44/65)、淋巴结转移灶88.6%(39/44),癌旁正常胃黏膜组织中Prx1蛋白阳性表达率为3%(2/65),且表达很弱。癌旁正常胃黏膜中prx1蛋白的表达与胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间比较,差异具统计学意义(P<0.05);胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌病灶中的Prx1检查可能成为判断胃癌术前是否腹膜转移以及预后的生物学标志。