突触蛋白质组学分析中双向电泳技术的优化

背景：双向电泳是突触蛋白质组学分析中最流行最通用的蛋白质分离方法之一.但文献中突触蛋白双向电泳对线性固相pH梯度（immobilized pH gradients,IPG）胶条和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroph-oresis,SDS-PAGE）浓度的选择很多,尚未见统一标准.目的：对突触蛋白双向电泳的IPG胶条和SDS-PAGE凝胶浓度进行优化,以获得高质量的突触蛋白双向电泳图谱.方法：以大鼠海马突触蛋白为试材,比较pH 5.0-8.0与pH 3.0-10.0线性IPG胶条,线性与非线性pH 3.0-10.0IPG胶条,以及单一浓度10％与12％ SDS-PAGE对双向电泳的影响.此外,还使用计算机检索了1989至2013年中国知网及PubMed数据库中关于突触蛋白双向电泳的文献,对文献中选择的IPG胶条、SDS-PAGE凝胶浓度进行了统计和评价,并总结了突触蛋白在不同pH值IPG胶条和不同浓度SDS-PAGE凝胶的双向电泳图谱上的分布特征.结果与结论：结果表明,使用pH 3.0-10.0的非线性胶条及单一浓度10％ SDS-PAGE凝胶进行突触蛋白双向电泳较为适宜,电泳图谱质量好,实验操作便利;同时还推荐合并使用pH 4.0-7.0和pH 6.0-11.0的IPG胶条,以及线性梯度浓度9％-16％ SDS-PAGE凝胶,也适用于突触蛋白双向电泳分析.     

Analysis of the association of serum uric acid levels with the progression of Parkinson’s disease in Chinese patients

Background/Aims: Uric acid (UA) is suspected to play a neuro-protective role in Parkinson’s disease (PD). This study aims to evaluate whether the serum UA level is associated with the disease progression of PD in a relatively large population of Chinese patients. Methods: Serum UA levels were measured from 399 Chinese PD patients and 387 age-matched controls; following the uric acid colorimetric method, the serum creatinine (Scr) levels were also measured to reduce the bias caused by possible differences in renal excretion function. The disease severity was scored by Hoehn and Yahr (H&Y) Scales and disease durations of PD; and the associations between serum UA level and disease progression were analyzed. Results and conclusion: PD patients were found to have significantly lower levels of serum UA than controls (249.31±79.48vs283.78±103.30, umol/). Stratified analysis showed a similar PD progression rate in both men and women. There was a significant inverse correlation of UA levels with H&Y Scales (Rs=-0.421, p<0.01) and disease duration (Rs=-0.239, p<0.01) of PD patients of both females and males. No difference of the Scr levels between PD patients and controls was found (72.09±15.64vs69.93±19.59, umol/L). Our data suggest that lower serum UA levels may possess higher risk of PD, which may be a useful biomarker to indicate the progression of PD.     

灵孢多糖对MPP^＋损伤PC12细胞的保护作用

【目的】观察灵孢多糖（GLPS）对甲基-苯基-吡啶离子（MPP^＋）诱导损伤的PCI2细胞的保护作用。【方法】将MPP＋或GLPS加入体外培养的PCI2细胞中，建立多巴胺能神经元损伤模型，用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞活力的变化；以乳酸脱氢酶（LDH）检测法检测培养上清液中LDH水平的改变；通过酪氨酸羟化酶（TH）免疫细胞化学法检测TH阳性细胞数及蛋白的表达。【结果】MPP^＋处理48h后，细胞活力降至对照组的52％，经GLPS（100、200、300μg／mL）预处理后，细胞活力明显提高。分别为65％，75％，79％（P〈0．05）。MPP^＋处理48h后．上清液中LDH水平较对照组明显提高．经不同浓度的GLPS预处理后．上清中LDH水平有所下降（P〈0．05），且TH阳性细胞数及表达强度明显高于MPP^＋组。【结论】灵孢多糖对MPP^＋诱导损伤的PCI2细胞具有保护作用。     

突触蛋白质组学分析中双向电泳技术的优化

背景：双向电泳是突触蛋白质组学分析中最流行最通用的蛋白质分离方法之一。但文献中突触蛋白双向电泳对线性固相pH梯度(immobilized pH gradients,IPG)胶条和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroph-oresis,SDS-PAGE)浓度的选择很多,尚未见统一标准。 目的：对突触蛋白双向电泳的IPG胶条和SDS-PAGE凝胶浓度进行优化,以获得高质量的突触蛋白双向电泳图谱。 方法：以大鼠海马突触蛋白为试材,比较pH 5.0-8.0与pH 3.0-10.0线性IPG胶条,线性与非线性pH 3.0-10.0 IPG胶条,以及单一浓度10%与12% SDS-PAGE对双向电泳的影响。此外,还使用计算机检索了1989至2013年中国知网及PubMed数据库中关于突触蛋白双向电泳的文献,对文献中选择的IPG胶条、SDS-PAGE凝胶浓度进行了统计和评价,并总结了突触蛋白在不同pH值IPG胶条和不同浓度SDS-PAGE凝胶的双向电泳图谱上的分布特征。 结果与结论：结果表明,使用pH 3.0-10.0的非线性胶条及单一浓度10% SDS-PAGE凝胶进行突触蛋白双向电泳较为适宜,电泳图谱质量好,实验操作便利;同时还推荐合并使用pH 4.0-7.0和pH 6.0-11.0的IPG胶条,以及线性梯度浓度9%-16% SDS-PAGE凝胶,也适用于突触蛋白双向电泳分析。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

灵孢多糖对MPP+损伤PC12细胞的保护作用

[目的]观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用.[方法]将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测法检测培养上清液中LDH水平的改变;通过酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学法检测TH阳性细胞数及蛋白的表达.[结果]MPP+处理48 h后,细胞活力降至对照组的52%,经GLPS(100、200、300 μg/mL)预处理后,细胞活力明显提高,分别为65%,75%,79%(P＜0.05).MPP+处理48 h后,上清液中LDH水平较对照组明显提高,经不同浓度的GLPS预处理后,上清中LDH水平有所下降(P＜0.05),且TH阳性细胞数及表达强度明显高于MPP+组.[结论]灵孢多糖对MPP+诱导损伤的PC12细胞具有保护作用.     

大活络胶囊治疗急性脑梗死的疗效观察——附100例报道

目的：观察大活络胶囊治疗急性脑梗死的临床疗效。方法：按入院顺序将200例急性脑梗死患者随机分为治疗组100例和对照组100例。两组患者接受复方血栓通注射液30ml加生理盐水250ml静脉滴注,每日1次,14d为一疗程,停药7d进行第2个疗程。治疗组在上述治疗的基础上加用大活络胶囊4颗,每日3次。两组皆治疗2个疗程。视两组患者病情轻重及并发症给予脱水、降血压、降糖等治疗,严禁使用其他扩张血管药和脑细胞代谢活化药及影响血液流变学的药物。结果：治疗组患者基本痊愈39例,显著进步28例,进步21例,无变化12例,总有效率为88％。对照组患者基本痊愈20例,显著进步18例,进步16例,无变化46例,总有效率为54％。治疗组和对照组患者的总有效率（88％对比54％,P〈0．05）、神经功能缺损评分减少程度（9．8±1．0对比16．7±2．6,P〈0．001）等比较差异均有统计学意义。结论：大活络胶囊治疗急性脑梗死疗效比较显著,不良反应少。     

植物状态与最小意识状态的意识评估和预后判断

意识障碍作为医学上的难题已困扰我们多年。在意识水平的研究上,三个不同阶段的意识状态被描述：昏迷、植物状态（Vegetativestate,VS）和最小意识状态（Minimallyconsciousstate,MCS）。VS和MCS作为两类特殊类型的意识障碍,由于病情的复杂性和特殊性,其意识的评估和预后的判断越来越引起研究者的兴趣。随着临床评估工具与新技术（如：神经成像、神经电生理）的运用,对VS和MCS的意识障碍有了新的认识。