妊娠合并重度主动脉瓣狭窄患者行剖宫产手术的麻醉管理

目的探讨妊娠合并重度主动脉瓣狭窄(aortic stenosis,AS)患者行剖宫产手术的麻醉管理方法。方法回顾性分析2012年1月—2017年9月首都医科大学附属北京安贞医院收治的妊娠合并重度AS行剖宫产手术患者10例的临床资料。结果本组1例AS为风湿性病变所致,余为先天性主动脉瓣二瓣化畸形所致。剖宫产手术均采用硬膜外麻醉,硬膜外给药过程中均预防性应用去甲肾上腺素等血管活性药物维持外周血管阻力,防止血压下降。胎儿娩出后,采用变换体位及延迟胎盘娩出等方法缓解回心血量骤然增加,避免心脏过荷导致心功能恶化;对术前心功能较差及合并中重度主动脉瓣关闭不全者予适量多巴胺静脉泵注,以维护心功能;同时做好行心脏手术的准备。所有患者术中血流动力学稳定,均平稳度过围术期,无不良心血管事件发生,无一例进行同期心脏手术。结论妊娠合并重度AS患者围术期心血管风险极大,硬膜外麻醉适用于此类患者的剖宫产手术,术中预防性应用血管活性药物至关重要。     

TFH：抗体免疫应答的真正辅助者

T细胞辅助B细胞产生抗体是胸腺依赖抗原诱导体液免疫应答的一种基本方式。以往的观念认为,在该过程中发挥关键作用的是Th2细胞,但是最近一群新的T细胞亚群：TFH的发现可能改变了这一概念。TFH是一群属于CD4^＋T细胞的新的细胞亚群,在其分化发育过程中,IL-21发挥了关键作用,成熟的TFH细胞定位于生发中心,表面特异性标志为CD4^＋CXCR5^＋,可分泌IL-21等多种细胞因子。其中IL-21在自身免疫病、免疫缺陷病及肿瘤中都起重要的作用。TFH细胞的发现丰富了人们对CD4^＋T细胞亚群的认识,拓展了对各种免疫性疾病的发病机制的认识。     

PA-MSHA抗肿瘤效应的免疫机制研究

 目的  研究铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝菌毛株(pseudomonas aeruginosa mannose sensitive hemagglutinin,PA-MSHA)处理树突状细胞(dendritic cells,DCs)后对其功能及激活T细胞杀伤肿瘤细胞效应的影响。方法  取小鼠骨髓来源的DC,观察PA-MSHA体外处理后对DC表面分子、吞噬功能及T 细胞杀伤功能的影响。结果   PA-MSHA处理的DC其表面分子CD40、I-E表达显著上升,吞噬功能显著下降,由DC诱导的活化T细胞对肿瘤细胞的杀伤效应显著高于对照组。结论  PA-MSHA能有效促进DC成熟并增强抗肿瘤免疫效应。     

小鼠GL261脑胶质瘤原位模型的介绍和GL261细胞免疫原性的初步探讨

胶质母细胞瘤是成人最常见的原发性脑恶性肿瘤,近年来尽管手术、放疗、化疗都取得了一定的进展,但患者预后仍很差.免疫治疗研究是胶质母细胞瘤治疗研究的热点之一,需要有能够复制人胶质母细胞瘤特征、重复性好的胶质瘤动物模型[1],并且需要了解成瘤细胞的免疫原性.本文介绍一种目前应用较广泛的小鼠GL261脑胶质瘤原位模型,并初步探讨GL261细胞的免疫原性.     

超顺磁性氧化铁标记小鼠淋巴细胞MR成像特性探讨

目的 探讨超顺磁性氧化铁(SP IO)标记小鼠脾脏淋巴细胞及其体外MR成像的可行性.方法 取5只小鼠脾脏淋巴细胞,采用100、50、25、15、10、5μg/ml的SPIO联合3μg/ml的多聚赖氨酸(PLL)标记淋巴细胞,确定最佳标记浓度.普鲁士蓝染色鉴定细胞内铁.取30份新鲜、标记、未标记淋巴细胞行台盼蓝染色检测细胞存活率的变化.用对照组及2×106、5×106和10×106个/ml的标记后淋巴细胞接种于琼脂糖凝胶中行3.0 T MR T2 WI、T2+WI及磁敏感加权成像(SWI)序列扫描,相同细胞浓度不同序列及相同序列不同细胞浓度时各取21个感兴趣区测量MR信号值.采用组间独立样本t检验比较细胞存活率;单因素方差分析比较MR信号值差异.结果 SPIO联合PLL成功标记小鼠淋巴细胞,最佳SPIO浓度为5μg/ml.普鲁士蓝染色显示细胞内存在蓝染铁颗粒,阳性率为(93.6±2.1)％.30份台盼蓝染色细胞样本,新鲜分离的淋巴细胞存活率为(94.8±3.1)％,细胞培养6h后,标记组和未标记组淋巴细胞存活率分别为(88.7±2.7)％和(88.9±3.2)％.标记组同未标记组细胞间存活率差异无统计学意义(t =0.281,P＞0.05),但标记组、未标记组存活率同培养前相比,其下降均有统计学意义(t值分别为8.125、7.253,P值均＜0.05).相同浓度细胞,T2WI信号降低最弱,SWI信号降低最明显.结论 SPIO联合PLL能有效标记小鼠淋巴细胞,且不影响其存活率,标记细胞体外3.0T MR成像可行,以SWI序列最敏感.     

错配PCR技术在快速检测耐药结核分枝杆菌中的应用

耐药结核病的早期快速诊断是结核病控制中亟待解决的关键问题之一。利用基因型检测耐药性包括PCR产物直接测序法，错配PCR法等。错配PCR技术最早由Newton等于1989年建立并用于人抗胰岛素基因缺陷的检查，目前已广泛应用于基因点突变的检测。根据PCR引物设计的不同，可将其分为间接错配PCR，即引物与野生型完全互补，以突变株为模板不能扩增得到PCR产物，和直接错配PCR，即引物与特定的点突变完全互补，以野生株为模板不能扩增得到PCR产物。已有用间接错配PCR方法检测结核分枝杆菌利福平耐药的报道。本研究以检测耐利福平的结核分枝杆菌rpoB基因531位点的点突变为对象，建立了直接错配PCR法，并与间接错配PCR法进行了比较。     

TLR1/2信号促CD8+T细胞功能及其机制

目的：探讨Toll 受体1/2(Toll like receptor 1/2, TLR1/2)信号对荷瘤小鼠来源的CD8+T细胞功能的影响及其可能机制。方法：利用小鼠Lewis肺癌细胞株3LL建立小鼠肺癌荷瘤模型,MACS分选小鼠脾CD8+T细胞;体外经PBS或TLR1/2激动剂BLP刺激后,Real-time PCR和流式细胞术分别从基因和蛋白水平检测CD8+T细胞的TLR分子表达;用ELISA和流式细胞术检测经PBS或BLP刺激后的CD8+T细胞分泌细胞因子和增殖的能力,并用关键信号分子抑制剂分析可能的分子机制。结果：与PBS对照组相比,TLR1/2激动剂BLP不但有效上调荷瘤机体CD8+T细胞TLR1和TLR2分子的基因水平\[TLR1：（0.353±0.015） vs （0101±0.017）,P<0.01;TLR2：（0.232±0.031） vs （0.080±0.004）,P<0.05\]及蛋白水平（P<0.05）,而且显著促进CD8+T细胞分泌功能性细胞因子\[IFN-γ：（2 375±305） vs （850±50）,P<0.05;IL-2：（1 600±200） vs （350±50）,P<0.05\]和增殖的能力（P<0.05）,这一效应依赖于NF-κB和P38通路。结论： TLR1/2信号直接作用于荷瘤小鼠的CD8+T细胞并促进其功能,该研究既丰富了TLR的作用范围,也为基于TLR激动剂的肿瘤生物治疗提供了实验依据。     

BiTE-T：一种应用于实体瘤治疗的新型基因编辑T细胞

[摘要] 以嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）为代表的基因编辑T细胞在血液肿瘤中取得了卓越的成效,并逐渐应用在肿瘤的临床治疗中。2017 年,先后有两款针对血液肿瘤的CAR-T细胞产品在美国获批上市,越来越广泛地应用在于实体肿瘤的治疗。但是利用CAR-T技术治疗实体瘤却遇到一些困境,实体瘤特有的微环境和表面肿瘤抗原的限制导致CAR-T细胞治疗效果并不理想,脱靶效应造成的细胞毒性更为棘手。针对这一问题,越来越多的研究人员开始探索新型的基因编辑T细胞用于实体瘤的治疗,其中双特异性T细胞衔接子基因编辑的T细胞（BiTE-T）在体外评估以及体内动物模型中展现出高效的抗肿瘤效果引起了高度关注。本文主要论述目前实体瘤治疗面临的困境以及BiTE-T细胞制备的原理、特点和应用于实体瘤治疗的优势。